水溶性氮酮对体外培养兔角膜内皮细胞活性与超微结构的影响

目的研究水溶性氮酮对体外培养的兔角膜内皮细胞活性与超微结构的影响,确定水溶性氮酮应用于眼部的安全浓度。方法采用消化法培养兔角膜内皮细胞,取第3或第4代细胞以1×104个.L-1的浓度接种,共分8组,其中一组设为对照组,不给予水溶性氮酮,其他7组细胞中水溶性氮酮浓度分别为0.001,0.005,0.010,0.050,0.100,0.500,1.000 g.L-1,24 h后采用MTT法测定细胞活性。另取上述培养的细胞,按1×104个.L-1的浓度接种到载玻片上,分别加入浓度为0.010,0.100,0.500 g.L-1的水溶性氮酮作用10 m in,观察细胞膜超微结构变化。另采用相同浓度的水溶性氮酮作用于体外培养的兔角膜内皮细胞10 m in,观察细胞膜超微结构的变化。结果与对照组比较,浓度≤0.100 g.L-1的水溶性氮酮作用24 h后对兔角膜内皮细胞的活性没有明显影响,浓度≥0.500 g.L-1的水溶性氮酮作用24 h可以引起兔角膜内皮细胞活性下降(P<0.01);经浓度≤0.100 g.L-1水溶性氮酮作用10 m in,兔角膜内皮细胞细胞膜有裂隙形成,但细胞器等结构无明显损害,浓度≥0.500 g.L-1水溶性氮酮可导致兔角膜内皮细胞凋亡。结论浓度<0.100 g.L-1水溶性氮酮可增加角膜内皮细胞对药物的通透性,并有望用于角膜内皮细胞基因转染研究。     

银杏叶提取物对糖尿病大鼠视网膜神经节细胞Bax和Bcl-2基因表达的影响

目的 观察银杏叶提取物(extract of ginkgo biloba leaf, EGB)对糖尿病大鼠视网膜神经节细胞凋亡相关基因Bax和Bcl-2表达的影响,探讨EGB防治糖尿病性视网膜病变的作用机制.方法 选择健康成年Wistar大鼠30 只, 随机分成正常对照组、模型组和EGB治疗组.腹腔内注射链脲佐菌素(STZ) 诱发大鼠糖尿病.EGB治疗组给予EGB溶液灌胃12周,模型组和对照组灌服等体积生理盐水,随后制备视网膜石蜡切片,行免疫组化染色, 并对染色结果行计算机图像分析.透射电镜观察各组神经节细胞的超微结构变化.结果 Bax在模型组神经节细胞的表达较正常对照组显著增强,在EGB治疗组的表达强度较模型组减弱;Bcl-2在EGB治疗组表达较模型组明显增强,差异均有统计学意义(P<0.01).EGB治疗组神经节细胞超微结构的损害明显减轻.结论 EGB可减轻糖尿病大鼠视网膜神经节细胞的超微结构损伤,减轻细胞凋亡的发生,其机制可能与EGB调节凋亡相关基因Bax和Bcl-2的表达有关.     

p16蛋白在脸板腺癌中的表达及相关性

目的探讨p16在睑板腺癌(meibomian gland carcinoma,MGCA)中的表达及其生物学意义。方法采用免疫组织化学方法(SP法),检测p16蛋白在65例石蜡包埋的睑板腺癌标本中的表达,并在不同分化程度及生物学行为的睑板腺癌之间进行比较。结果65例睑板腺癌组织中53例表达p16蛋白,30例癌旁组织中29例表达p16蛋白,两者差异有统计学意义(χ2=10.548,P=0.014);睑板腺癌中,p16蛋白表达阳性率随组织学分级降低而降低,不同分化组中p16蛋白表达差异有显著性意义(χ2=15.000,P=0.001)。不同生物学行为睑板腺癌中p16蛋白表达差异显著,无复发组p16蛋白表达率显著高于复发转移组(χ2=24.890,P=0.000)。结论睑板腺癌中p16蛋白表达异常提示其在睑板腺癌发生发展中起着重要作用。p16蛋白的表达缺失或失活是睑板腺癌发生的重要分子事件,并与睑板腺癌的分化程度、浸润能力及复发转移密切相关,可以为临床判断预后提供依据。     

Optisol中期保存液房水置换对角膜内皮细胞的保护作用

目的:研究Optisol中期保存液房水置换对角膜内皮细胞的保护作用。方法:采用4℃湿房保存方法保存离体兔眼球,设立房水对照组、Optisol中期保存液房水置换组,每组10只眼球。于低温保存开始前、保存后24,48及72h检测角膜厚度、角膜内皮细胞密度及形态,保存后72h取下角膜行胎盘蓝-茜素红染色,检测角膜内皮细胞存活率。结果:4℃湿房保存开始前两组平均角膜厚度、角膜内皮细胞密度及六角形细胞比率差异没有统计学意义(P>0.05)。保存后24h两组平均角膜厚度、角膜内皮细胞密度及六角形细胞比率差异没有统计学意义(P>0.05);保存后48h及72h两组平均角膜厚度、角膜内皮细胞密度及六角形细胞比率差异有统计学意义(P<0.05)。保存后72h房水对照组角膜内皮细胞存活率为(55±5.81)%,Optisol中期保存液房水置换组角膜内皮细胞存活率为(87.16±3.64)%,两组间比较有统计学意义(P<0.05)。结论:Optisol中期保存液房水置换对角膜内皮细胞活性有保护作用,可以提高湿房保存法的效率,延长有效保存时间至72h。     

异形羟基磷灰石义眼台的临床应用

目的:观察异形羟基磷灰石义眼台植入术并发症及手术效果,探讨异形义眼台的适应证及其临床应用价值。方法:设计不同体积的异形羟基磷灰石义眼台,治疗眼球萎缩、眼内容物摘除及眼球摘除术后患者共30例。对照组植入常规圆球形羟基磷灰石义眼台共30例。异形义眼台组与对照组间性别、年龄、眼部情况相似。手术后随访时间6mo以上,观察患者义眼台植入术后球结膜愈合时间、义眼台暴露、感染等并发症、义眼台活动度、位置以及与义眼片适合程度的差异。结果:异形羟基磷灰石义眼台组没有发生义眼台暴露、感染等严重并发症,球结膜愈合时间短,义眼台植入后前表面呈圆弧形,能与义眼片很好的吻合,义眼台活动度及位置均好于对照组。对照组有2例(7%)发生早期球结膜裂开的并发症,经过治疗后均愈合。结论:异形义眼台可以降低义眼台植入后引起的并发症,可以有效适应患者眼部病变的情况,获得良好的手术效果,适应证更广,安全性更好。     

p16蛋白在睑板腺癌中的表达及相关性

目的:探讨p16在睑板腺癌(meibomian gland carcinoma,MGCA)中的表达及其生物学意义。方法:采用免疫组织化学方法(SP法),检测p16蛋白在65例石蜡包埋的睑板腺癌标本中的表达,并在不同分化程度及生物学行为的睑板腺癌之间进行比较。结果:睑板腺癌组织与癌旁组织中p16蛋白表达差异有显著性意义(P<0.05);睑板腺癌中,p16蛋白表达阳性率随组织学分级降低而降低,不同分化组中p16蛋白表达差异有显著性意义(P<0.01)。不同生物学行为睑板腺癌中p16蛋白表达差异显著,无复发组p16蛋白表达率显著高于复发转移组(P<0.01)。结论:睑板腺癌中p16蛋白表达异常提示其在睑板腺癌发生发展中起着重要作用。p16蛋白的表达缺失或失活是睑板腺癌发生的重要分子事件,并与睑板腺癌的分化程度、浸润能力及复发转移密切相关,可以为临床判断预后提供依据。     

氯通道阻断剂5-硝基-2-(3-苯丙胺)苯甲酸在内皮素-1对体外培养牛角膜内皮细胞增殖中的影响

目的观察氯通道阻断剂5-硝基-2-(3-苯丙胺)苯甲酸(NPPB)在内皮素-1(ET-1)对体外培养牛角膜内皮细胞增殖中的作用。方法实验设7组,对照组、1g·L-1二甲基亚砜(DMSO)组、200pmol·L-1ET-1组、200pmol·L-1ET-1+1g·L-1DMSO组和200pmol·L-1ET-1+50、100、200μmol·L-1NPPB3个实验组。采用倒置光学显微镜观察牛角膜内皮细胞形态。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色分析法观察细胞增殖,计算细胞存活率。采用免疫细胞化学检测细胞增殖细胞核抗原(PCNA)表达,并采用计算机图像分析测定平均光吸收值。应用流式细胞仪检测细胞周期时相的变化,计算细胞增殖指数。结果 NPPB能够使细胞形态发生异常,细胞内分裂相减少。50、100μmol·L-1NPPB使培养牛角膜内皮细胞MTT光吸收值、细胞存活率和PCNA阳性细胞的平均光吸收值较200pmol·L-1ET-1组均显著降低,并具有浓度依赖性。而NPPB浓度达到200μmol·L-1时,细胞趋于死亡。经100μmol·L-1的NPPB处理后,与对照组和200pmol·L-1ET-1组相比,出现明显的凋亡峰,G1期细胞比例明显增高,S期及G2/M期细胞比例则明显降低,增殖指数明显下降。结论 NPPB浓度依赖性抑制ET-1对培养BCECs的增殖作用,使细胞周期停滞在G1期。     

99Tcm-MDP显像对羟基磷灰石义眼台血管化的评估

目的探讨一种监测羟基磷灰(Hydroxyapalite，HA)义眼台植入术后血管化过程的简单方法。方法10只新西兰大白兔，右眼实施HA义眼台眼眶植入术。术后第1、2、3、4、6、8周行^99Tc^m-亚甲基二膦酸盐(MDP)显像。在双侧兔眼眶内取相同大小的感兴趣区，分别计算不同时期每只手术兔HA义眼台植入侧与非植入侧眼眶内平均放射性计数比值(R／L)。术后第8周摘取HA义眼台行病理组织学检查。结果术后第1、2、3、4周的R／L平均值依次增大，且各周均数间差异有显著性(F=74．91，P=0．000)。术后第6和8周的R／L平均值与术后第4周比较，差异均无显著性(F=2．054、3．126，P=0．243、0．511)。术后第8周病理检查示全部HA义眼台完全纤维血管化。结论^99Tc^m-MDP显像可用于监测HA义眼台眼眶内植入后的血管化程度和过程。     

图形翻转视觉诱发电位检查对白内障术后视力评估的价值

目的:探讨图形翻转视觉诱发电位(pattern reversal visual evoked potential,PRVEP)检查对白内障术后视力评估的价值。方法:回顾性分析2012-10/2013-05在同济医院眼科住院,并在白内障超声乳化术及人工晶状体植入手术前后接受PRVEP检查的的成年白内障患者72例114眼的病例资料,其中76眼为老年性白内障,38眼为并发性白内障。根据晶状体混浊程度及晶状体核硬度将数据分为两组:核硬度Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ级为A组,核硬度Ⅳ,Ⅴ级为B组,应用统计学方法进行数据间的相关性分析。结果:A组:(1)术前:视力平均值为0.344,PRVEP检查P100波的潜伏期平均值为107ms,N75-P100波的振幅平均值为4.633μV;术后:视力平均值为0.672,PRVEP检查P100波的潜伏期平均值为104.37ms,N75-P100波的振幅平均值为4.400μV。(2)手术前后视力与P100波的潜伏期呈显著负相关(P<0.01);手术前后视力与N75-P100波的振幅呈显著正相关(术前P<0.01,术后P<0.05)。(3)手术前后视力改善行数与P100波的潜伏期变化值无相关性。B组:(1)术前:视力平均值为0.116,P100波的潜伏期平均值为118.905ms,N75-P100波的振幅值为1.650μV;术后:视力平均值为0.576,P100波的潜伏期平均值为108.429ms,N75-P100波的振幅值5.132μV。(2)术前视力与P100波的潜伏期呈现显著负相关(P<0.05),而术后视力与P100波的潜伏期没有相关性;手术前后视力与N75-P100波的振幅没有相关性。(3)手术前后视力改善行数与P100波的潜伏期变化值没有相关性。结论:由白内障手术前后两组视力与PRVEP的P100波的潜伏期及N75-P100波的振幅的相关性可知,PRVEP受患者术前视力(即屈光间质混浊程度)影响较大,PRVEP检查不能作为白内障术后视力预后的判断指标,白内障手术前的PRVEP检查没有临床意义。     

12例真菌性角膜溃疡患者行氟康唑前房冲洗治疗的护理

总结12例真菌性角膜溃疡患者行清创联合羊膜移植、遮盖联合0.2%氟康唑注射液前房冲洗术后的护理经验。认为住院期间严格预防交叉感染,密切观察眼部症状,及时处理并发症,严格遵医嘱用药,详细做好出院宣教及出院随访,是保证治疗效果、预防并发症的关键。