米诺环素对压力作用下体外培养视网膜神经细胞凋亡的抑制

目的 观察米诺环素对压力系统作用下大鼠视网膜神经细胞(RNs)的活性及凋亡的影响，探讨其对受损RNs保护的可能机制。 方法 制备大鼠RNs体外加压培养模型，通过细胞形态学观察、四唑盐（MTT）比色法测定细胞活力、吖啶橙/溴化乙锭（AO/EB）染色法检测细胞凋亡率等方法观察不同浓度的米诺环素对上述损伤细胞的保护作用，并用免疫细胞化学法观察iNOS和caspase 3表达的改变。 结果 加压培养后RNs与对照组相比形态改变较明显，细胞活力降低，5393%的细胞发生凋亡。20000 μmol/L的米诺环素治疗组则细胞形态改善，活力显著增高，1729%的细胞发生凋亡；免疫细胞化学法显示细胞内iNOS和caspase-3表达较加压损伤组减少。 结论 一定剂量的米诺环素在体外可有效抑制压力引起的大鼠RNs损伤及凋亡；抑制iNOS和caspase-3的表达可能是其潜在作用机制。     

MMP-2、TIMP-2在内毒素诱导性葡萄膜炎中的表达

目的　探讨基质金属蛋白酶 2 (MMP 2 )及其组织型抑制剂 (TIMP 2 )在内毒素诱导性葡萄膜炎 (EIU)模型中的表达及意义。方法　 2 0 0 μg伤寒杆菌内毒素注射于SD大鼠双后足垫 ,建立EIU模型。用免疫组织化学方法检测MMP 2、TIMP 2在内毒素注射后不同时间点 (0、 6、 12、 18、 2 4、 4 8、 72、 96h和 7d)的表达。结果　内毒素注射后 6h开始出现炎症 ,于 2 4h炎症达到高峰 ,以后逐渐减轻 ,7d时基本消退。虹膜、睫状体的上皮细胞和渗出的炎性细胞表达MMP 2和TIMP 2。MMP 2在 6h表达开始增高 ,18～ 2 4h达高峰 ,以后逐渐下降。TIMP 2于 12h出现表达 ,4 8h达高峰 ,以后逐渐下降。TIMP 2和MMP 2平均吸光度值的比值与炎症程度呈负相关。结论　MMP 2是与炎症反应相关的调节因子 ,其过量表达参与葡萄膜炎的发病。减低MMP 2的活性或降低MMP 2 /TIMP 2的比值可能为治疗葡萄膜炎的新思路。     

内皮素-1对培养的兔角膜内皮细胞的影响

目的 研究内皮素-1(ET-1)对培养的兔角膜内皮细胞的增殖能力和移行能力的影响。方法 采用MTT方法并通过损伤模型观察不同浓度ET-1加药48 h后，对体外培养的兔角膜内皮细胞增殖和细胞移行的能力。光镜下和透射电镜下观察ET-1对兔角膜内皮细胞形态的影响。采用免疫组化染色法和计算机图像分析系统检测不同浓度ET-1对细胞PCNA表达的影响。结果 一定浓度ET-1促进培养的兔角膜内皮细胞的增殖和移行，且呈剂量相关性。10 pmol／L时起作用，200 pmol／L时发挥最大作用。光镜下和透射电镜下发现ET-1对兔角膜内皮细胞的形态学特征和超微结构无影响。兔角膜内皮细胞PCNA表达阳性，ET-1促进其表达，且呈剂量相关性。结论 ET-1可作为一种生长因子，一定浓度下可促进培养的兔角膜内皮细胞增殖和移行能力。     

Effects of PDTC on the Proliferation and PCNA Expression of Human Retinal Pigment Epithelial Cells

Proliferative vitreoretinopathy (PVR) is oneof the most common eye diseases that couldlead tosevere vision i mpairment and tend to cause blind-ness .It has beenfound that the abnormal prolifer-ation of retinal pigment epithelium(RPE) plays akey role in the onset and development of PVR.Under pathologic status ,such as rhegmatogenousdetachment of retina and severe ocular trauma ,RPE cells may migrate and proliferate because ofthe sti mulations of cytokines or chemokines ,thusmay lead to path…     

Optisol中期保存液房水置换对角膜内皮细胞的保护作用

目的:研究Optisol中期保存液房水置换对角膜内皮细胞的保护作用。方法:采用4℃湿房保存方法保存离体兔眼球,设立房水对照组、Optisol中期保存液房水置换组,每组10只眼球。于低温保存开始前、保存后24,48及72h检测角膜厚度、角膜内皮细胞密度及形态,保存后72h取下角膜行胎盘蓝-茜素红染色,检测角膜内皮细胞存活率。结果:4℃湿房保存开始前两组平均角膜厚度、角膜内皮细胞密度及六角形细胞比率差异没有统计学意义(P>0.05)。保存后24h两组平均角膜厚度、角膜内皮细胞密度及六角形细胞比率差异没有统计学意义(P>0.05);保存后48h及72h两组平均角膜厚度、角膜内皮细胞密度及六角形细胞比率差异有统计学意义(P<0.05)。保存后72h房水对照组角膜内皮细胞存活率为(55±5.81)%,Optisol中期保存液房水置换组角膜内皮细胞存活率为(87.16±3.64)%,两组间比较有统计学意义(P<0.05)。结论:Optisol中期保存液房水置换对角膜内皮细胞活性有保护作用,可以提高湿房保存法的效率,延长有效保存时间至72h。     

异形羟基磷灰石义眼台的临床应用

目的:观察异形羟基磷灰石义眼台植入术并发症及手术效果,探讨异形义眼台的适应证及其临床应用价值。方法:设计不同体积的异形羟基磷灰石义眼台,治疗眼球萎缩、眼内容物摘除及眼球摘除术后患者共30例。对照组植入常规圆球形羟基磷灰石义眼台共30例。异形义眼台组与对照组间性别、年龄、眼部情况相似。手术后随访时间6mo以上,观察患者义眼台植入术后球结膜愈合时间、义眼台暴露、感染等并发症、义眼台活动度、位置以及与义眼片适合程度的差异。结果:异形羟基磷灰石义眼台组没有发生义眼台暴露、感染等严重并发症,球结膜愈合时间短,义眼台植入后前表面呈圆弧形,能与义眼片很好的吻合,义眼台活动度及位置均好于对照组。对照组有2例(7%)发生早期球结膜裂开的并发症,经过治疗后均愈合。结论:异形义眼台可以降低义眼台植入后引起的并发症,可以有效适应患者眼部病变的情况,获得良好的手术效果,适应证更广,安全性更好。     

米诺环素对压力作用下体外培养神经细胞凋亡的抑制

目的在开放式压力控制培养系统作用下体外培养大鼠视网膜神经细胞（retinal neurons，BNs），观察米诺环素对其活性及凋亡的影响，并进一步探讨其对受损RNs保护的可能机制。方法采用出生0～3d的Sprague Dawley（SD）大鼠视网膜神经细胞体外混合培养，制备RNs加压培养模型。通过细胞形态学观察、四唑盐（MTT）比色法测定细胞活力、吖啶橙／溴化乙锭（AO／EB）染色法检测细胞的凋亡率来观察米诺环素对上述损伤细胞的保护及治疗作用，以及应用免疫细胞化学染色法，观察诱导型一氧化氮合酶（iNos）和半胱天冬酶-3（caspase-3）表达的改变。结果加压培养后，在倒置显微镜下RNs与对照组相比形态改变较明显，细胞活力降低，大量细胞发生凋亡（占53．93％），而米诺环素治疗组（20μmol／L）细胞则形态改善，活力显著增高，凋亡数目减少（占17．29％），差异具有显著性（P〈0．05）。免疫细胞化学染色法示米诺环素治疗组细胞内iNOs和caspase-3表达较加压损伤组减少。结论一定剂量的米诺环素在体外可有效抑制压力引起的大鼠视网膜神经细胞损伤及凋亡，抑制iNOs和caspase-3的表达可能是其潜在作用机制。     

视网膜新生血管形成过程中VEGF对TGF-β表达的影响——生长因子冗余性的初步探索

目的：研究早产儿视网膜病变新生血管形成过程中VEGF对TGF-β表达的影响。方法：体外培养人视网膜血管内皮细胞（HRCECs），分别转染重组腺相关VEGF病毒和VEGF的RNA干扰质粒到HRCECs，增高和抑制VEGF的表达，通过二氯化钴诱导HRCECs缺氧，观察TGF-β在不同VEGF水平下的mRNA表达变化，同时观察HRCECs增殖的变化。结果：高表达VEGF组（C组），低表达VEGF组（D组），阴性对照组（E组），阳性对照组（F组）的VEGF／actin分别为：1．15±0．77，0．36±0．31，0．28±0．16，0．83±0．72；而TGF-β／actin为：0．55±0．39，0．92±0．57，0．18±0．07，0．70±0．45，当VEGF高表达，TGF-β的mRNA表达下调；在VEGF低表达时，TGF-β的mRNA表达上调。结论：TGF-β能部分代偿VEGF的功能，视网膜新生血管形成过程中生长因子具有冗余性。     

眼部疾病的B超诊断分析

目的探讨眼科专用B超检查对眼科各类疾病的诊断价值,分析B超检查过程中导致误诊或漏诊的可能原因。方法对2000￣2005年在该院眼科进行B超检查的4625例,5814只眼的B超资料进行回顾性分析,总结常见眼部疾病的B超检查诊断符合率,并对误诊或漏诊的原因进行分析讨论。结果眼科专用B超检查对眼球疾病的诊断符合率明显高于对眼眶疾病的诊断符合率(P<0.05),机器性能、操作手法、病变所处的解剖部位等多种因素可以导致误诊或漏诊。结论B超检查对眼部疾病尤其对眼球疾病是一种简便易行、非创伤性、诊断符合率高的辅助影像学方法,在眼科疾病的诊断中具有较高的实际应用价值,可以作为眼科疾病的常规检查手段;同时,眼科医师对各种B超检查的误诊或漏诊原因要有充分的认识,应采取适当手段尽量避免和减少误诊或漏诊的发生。     

Bcl-xl/LipofectamineTM2000比值对人角膜基质细胞转染效率的影响

目的检测Bclxl/LipofectamineTM2000复合物中两者比值对转染人角膜基质细胞转染效率的影响,探讨其用于人角膜基质细胞基因转染的最佳比值。方法选择Bclxl/LipofectamineTM2000比值1∶2、1∶4、1∶8、1∶10四个实验组制备载体复合物转染人角膜基质细胞,转染时间24h。在转染后3d,采用半定量RTPCR检测目的基因Bclx1mRNA表达的变化;采用免疫组织化学染色法及流式细胞计数法检测目的基因Bclx1表达阳性细胞率。数据采用SPSS软件分析。结果Bclxl/LipofectamineTM2000载体复合物中两者比值能显著影响其对人角膜基质细胞的转染效率,存在最佳的比值。当Bclxl/LipofectamineTM2000比值为1∶8时,培养的人角膜基质细胞获得了最佳的转染效率。转染后3d,定量PCR显示1∶8组mRNA表达水平高于其他组(P<0.05),Bclx1免疫组化染色及流式细胞计数法均显示1∶8组转染效率最高,阳性细胞率为(45.6±2.0)%(免疫组织化学染色法),(48.3±3.0)%(流式细胞计数法)(P<0.05)。结论LipofectamineTM2000能有效介导外源基因Bclxl转染人角膜基质细胞。Bclxl/LipofectamineTM2000载体复合物比值为1∶8时转染效率最高。