视网膜下腔免疫赦免研究进展

视网膜下腔是免疫赦免部位,能诱导免疫偏离,产生免疫耐受。血-视网膜屏障的隔离作用、TGF-β和IFN等免疫因子的调节作用;CD95L、可溶性因子、Galectin-Ⅰ和TRAIL等所介导的RPE对T淋巴细胞的调节作用均参与了视网膜下腔的免疫赦免机制。RPE、小胶质细胞以及视网膜微血管内皮细胞等相关APC均参与了移植物的免疫排斥反应过程。视网膜移植免疫排斥反应过程中,免疫抑制剂的使用和免疫耐受状态的产生可以有效降低术后免疫排斥反应的发生。     

多焦视网膜电图用于年龄相关性黄斑变性视网膜功能的研究

目的应用多焦视网膜电流图(MERG)探讨年龄相关性黄斑变性视网膜不同部位的功能改变。方法选用年龄相关性黄斑变性(ARMD)的患者共27例54眼,其中干性ARMD11眼、湿性ARMD21眼,正常组22眼。所有患者均对其双眼进行检查。应用Veris视网膜功能分析仪对后极部视网膜的局部反应振幅和潜伏期进行检测,分别记录刺激总体、四个象限和6个环的潜伏期及反应振幅值,应用SPSS统计软件中两个独立样本的t检验进行统计学分析。结果在干性ARMD组与正常组、湿性ARMD与正常组及干性ARMD组与湿性ARMD组之间分别对1环(0.0°),2环(2.7°),3环(5.5°),4环(9.0°),5环(13.1°)和6环(18.7°)的反应振幅及潜伏期值进行统计学分析,发现:1、干性ARMD组与正常组MERG的6个环的反应振幅的比较:P值均大于0.05均无显著性差异;6个环的潜伏期的比较:P值均大于0.05均无显著性差异。2、湿性ARMD与正常组间MERG的6个环的反应振幅比较:P值均小于0.01均有非常显著性差异;6个环的潜伏期的比较:1环、5环、6环无显著性差异(P>0.05)、2环、3环、4环有显著性差异(P<0.05)。3、干性ARMD组与湿性ARMD组间MERG的6个环的反应振幅的比较:1环、3环、4环有非常显著性差异(P<0.01)、2环、5环、6环有显著性差异(P<0.05);6个环的潜伏期的比较:1环无显著性差异(P>0.05)、2环、5环、6环有显著性差异(P<0.05)、3环、4环有非常显著性差异(P<0.01)。结论研究证实,MERG能够对视网膜功能进行评价,对视网膜黄斑区功能异常进行初步定位[1],其作为一种无损伤的检查手段,在ARMD的早期诊断、随访观察及视网膜功能评价中具有一定的意义。     

准分子激光80μm深度切削制备感光细胞片层

目的 探讨PTK切削方式下，准分子激光切削视网膜制备理想感光细胞片层所需的最佳切削深度。方法 以新生小牛视网膜为研究对象，白明胶作载体，液态视网膜铺片法铺片，准分子激光PTK切削方式，共切削3种深度，制备48个感光细胞片层，行光镜和电镜观察。结果 用准分子激光PTK切削方式，80μm切削深度下可以获得较好的视网膜感光细胞片层，光镜和扫描电镜均显示完整的感光细胞节段、外颗粒层、外网状层以及部分残存的内颗粒层细胞，而50μm和100μm深度则分别较浅和较深。结论80μm是准分子激光PTK方式切削视网膜制备感光细胞片层的适宜切削深度。     

增生性玻璃体视网膜病变中细胞因子的作用

细胞因子与PVR形成密切相关。HGF通过自分泌或旁分泌方式作用于RPE和神经胶质细胞，导致RPE活化和胶质细胞迁移；通过活化磷脂酰肌醇3激酶促使神经胶质细胞产生血管内皮生长因子（VEGF）。PDGF-AA通过与含有口亚基PDGFR作用促进PVR形成，但表达PDGFβ受体的细胞不能诱导PVR发生。肌样成纤维细胞聚集是PVR中导致牵拉性视网膜脱离的重要因素，其α平滑肌肌动蛋白的表达依赖于TGF-β2RⅡ及TGF-β1在增生膜中的表达。IL-6是PVR形成的危险因素，是视网膜脱离术后PVR复发的重要预测指标。TNF-α可与RPE表面TNF受体作用并通过MAPK通路诱导RPE细胞高表达α1与α5型整合素，进而促进RPE在PDGF介导下的细胞转移。MCP-1可能在PVR早期起重要作用。     

脑源性神经营养因子对视网膜神经细胞bcl-2蛋白动态表达的影响

目的 探讨脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)对新生小牛视网膜神经细胞中bcl-2蛋白表达的影响.方法 以新生小牛视网膜为研究对象,传代培养视网膜神经细胞.培养细胞传至第2代,以加入BDNF为BDNF组,不加任何药物为正常对照组.在接种后第3天BDNF组加入终浓度为50μg·L-1的BDNF,Western blotting法检测给药后第2天、第4天、第6天BDNF组和正常对照组不同时间点以及两组间对应时间点bcl-2蛋白表达变化情况.结果 BDNF组bcl-2蛋白的表达在给药后第2天、第4天、第6天相对灰度值分别为0.447±0.052、0.355±0.039、0.287±0.031,呈现逐渐下降的趋势,第2天与第4天(t=2.788,JP=0.016)、第2天与第6天(t=4.844,P=0.000)比较差异均有统计学意义,第4天与第6天(t=2.056,P=0.062)比较差异无统计学意义.而正常对照组分别为0.314±0.033、0.300±0.004、0.299±0.060,第2天与第4天(t=0.411,P=0.688)、第2天与第6天(t=0.441,P=0.667)、第4天与第6天(t=0.030,P=0.976)之间比较差异均无统计学意义.在给药后第2天,BDNF组bcl-2蛋白的表达强度与正常对照组相比差异具有统计学意义(t=4.022,P=0.002),第4天(t=1.645,P=0.126)、第6天(t=0.381,P=0.710)与相应对照组间比较差异均无统计学意义.结论 BDNF能在短期内促进视网膜神经细胞bcl-2蛋白表达,提高细胞抗凋亡的能力,对延缓退行性视网膜疾病中的凋亡形成,开展视网膜神经细胞的神经保护具有一定作用.     

精氨酸-甘氨酸-天门冬氨酸-丝氨酸肽对人Tenon囊成纤维细胞的贴壁抑制试验观察

目的：研究精氨酸-甘氨酸-天门冬氨酸-丝氨酸（Arg-Gly-Asp-Ser，RGDS）肽对人Tenon囊成纤维细胞与纤维连接蛋白（FN）粘附、增殖的影响。方法：在传代培养的人Tenon囊成纤维细胞中加入不同浓度的RGDS（1、0.1、0.001g/L），用未贴壁细胞记数法及MTT法测定RGDS肽对人Tenon囊成纤维细胞粘附、增殖的影响。结果：RGDS肽能抑制成纤维细胞在FN上的粘附，呈浓度效应特点，能抑制成纤维细胞的增殖，呈浓度及时间效应特点。结论：在细胞水平上证实RGDS肽可阻止人Tenon囊成纤维细胞对FN的粘附和增殖，具有避免青光眼滤过术后瘢痕化形成的应用前景。     

复方中药金芪滴眼剂对兔角膜上皮及基质细胞增殖的影响

目的：观察复方中药金芪滴眼剂对兔角膜上皮细胞及兔角膜基质层细胞增殖的影响。方法：建立体外培养兔角膜上皮细胞，兔角膜基质层细胞系，用MTT法检测不同浓度金芪滴眼剂对细胞增殖活性的影响。结果：金芪滴眼剂对兔角膜上皮细胞有显著的促进增殖作用。且随浓度的增加。增殖率加大，对兔角膜基质层细胞无促增殖作用。高浓度时有抑制作用。结论：复方中药金芪滴眼剂对兔角膜上皮细胞有较好的保护作用。     

以腺嘌呤对慢性肾功能衰竭尿毒症期大鼠造模的方法研究

目的：优选腺嘌呤致大鼠慢性肾功能衰竭（CRF）尿毒症期的实验方法。方法：采用以下两种不同方法造模,造模A组给予2．5％腺嘌呤混悬液,按250mg／kg／d灌胃,连续给药14d,之后改为125mg／kg／d。造模B组给予2．5％腺嘌呤混液,按250mg／kg／d灌胃,第1-14天,每日给药1次,第14天后隔日给药,观察腺嘌呤对各种肾功能指标的影响及肾组织形态学的变化。结果：模型A组、模型B组大鼠血清BUN、SCr、uA浓度等指标均明显上升,模型B组较模型A组高;光镜下观察病理切片显示肾皮质、髓质有不同程度损伤,模型B组损伤程度较重。生化指标及形态组织学观察提示腺嘌呤CRF大鼠模型造模成功,模型B组模型肾皮质、髓质功能中重度损害、酸中毒,符合慢性肾功能衰竭中晚期尿毒症常见生化指标改变。结论：采用2．5％腺嘌呤混悬液,按250mg／kg／d连续灌胃14d后,再隔日给药14d的造模方法较佳。     

车前草中熊果酸、齐墩果酸的HPLC测定

采用ＨＰＬＣ法同时测定车前草中熊果酸、齐墩果酸的含量。选用Ｃ１８ＯＤＳ色谱柱,流动相：甲醇－水（８８：１２）,检测波长：２２０ｎｍ,流速;０．６ｍＬ／ｍｉｎ,柱温：２５℃。熊果酸和齐墩果酸分别在０．４０４２～２．０２０μｇ（４＝０．９９８４）和０．４１０～２。０５０μｇ（ｒ＝０．９９９７）范围内呈线性;熊果酸、齐墩果酸的平均回收率分别为９８．２％（ＲＳＤ＝１．７４％）９７．８％（ＲＳＤ＝／２．２４