减毒沙门氏菌靶向携带共表达质粒p53/siRNA-survivin抗前列腺癌的体内研究

目的：以人减毒沙门氏菌为基因运载体，探讨其携带p53、siRNA-survivin及其共表达质粒p53／siRNA-survivin对肿瘤的靶向性及抗人前列腺癌效应，方法：复制裸鼠前列腺癌皮下移植瘤模型，分别将已构建的重组表达质粒siRNA-scramble，p53，siRNA-survivin及共表达质粒p53／siRNA-survivin转化到减毒人伤寒沙门菌Ty21a，制备成对应重组减毒沙门菌，通过灌胃及瘤内注射到前列腺癌荷瘤裸鼠体内，观察成瘤时间及瘤块大小；以携有绿色荧光蛋白siRNA-survivin的重组茵作为报告基因，流式细胞术检测其在肝、脾、肿瘤组织中靶向分布及基因呈递作用；应用RT-PCR，Western blot，及免疫组织化学染色方法检测治疗后肿瘤组织p53和Survivin基因及蛋白表达。结果：各治疗组均较对照组肿瘤生长缓慢，肿瘤体积小，共表达质粒组与单独基因治疗组比较，肿瘤体积明显缩小，抑瘤率高；荷瘤裸鼠肿瘤组织可测及survivin mRNA表达下降，p53基因表达增强，p53相关基因GRIM-19 mRNA和蛋白表达增强；FCM检测结果发现，减毒人沙门氏菌可在肝、脾及肿瘤组织中存活及表达，但以肿瘤中绿色荧光聚集明显且维持时间较长，其他脏器仅见极少的绿色荧光，结论：人减毒沙门氏菌可作为外源基因载体携带重组质粒，对前列腺癌移植瘤有明显的靶向性，其靶向介导的p53，siRNA-survivin及其表达基因p53／siRNA-survivin，对前列腺癌荷瘤裸鼠有治疗作用，共表达基因较单基因治疗效果好，具有显著的协同作用。     

皮肤软组织扩张器注水术及护理

皮肤软组织扩张器注水术及护理沈阳军区总医院（１１００１５）梁英曹丽华李晓洁宋丽皮肤软组织扩张术是将扩张器埋植于皮下或软组织内，通过定期向扩张器内注入生理盐水使皮肤及软组织扩展伸长，从而获得修复局部皮肤及软组织缺损所需要的额外皮肤及软组织的新的整复技术...     

尾叶香茶菜二萜类化合物B对小鼠前列腺癌细胞细胞周期的影响及其机制

目的：观察尾叶香茶菜二萜类化合物B(DB)对小鼠前列腺癌细胞株RM-1细胞周期的影响并分析其机制。方法：MTT法观察不同时间、不同剂量的DB对RM-1 细胞增殖率的影响；相差显微镜观察对RM-1细胞形态影响；流式细胞术分析细胞周期变化；RT-PCR和Western blotting分别观察DB作用后RM-1细胞p53、GRIM-19、STAT3 和细胞周期相关因子CHK1、CDK2 mRNA和蛋白水平的表达。结果：（1）MTT结果：DB可抑制RM-1 细胞的增殖，呈时间、剂量依赖性；（2）形态学观察和流式细胞术检测：经DB处理后的RM-1细胞出现生长抑制，细胞主要阻滞在G1期；（3）RT-PCR结果： DB (2 mg/L,4 mg/L,8 mg/L) 分别作用RM-1细胞12 h、24 h、48 h后，p53、CHK1、GRIM-19 mRNA的含量明显高于对照组，CDK2、STAT3 mRNA的含量明显低于对照组（P<0.05）；（4）Western blotting 结果：DB (2 mg/L,4 mg/L,8 mg/L) 分别作用RM-1细胞12 h、24 h、48 h后，P53、GRIM-19 蛋白表达水平高于对照组，而CDK2蛋白表达水平则低于对照组。结论：DB可抑制RM-1细胞增殖，其机制可能是与细胞周期相关基因p53的上调，CDK2表达下降有关，影响了G1期进入S期，同时GRIM-19-STAT3-CDK2途径可能也参与G1期阻滞的过程。     

输尿管梗阻对新生大鼠肾盂功能及起搏细胞的影响

目的探讨新生大鼠单侧输尿管梗阻对肾盂蠕动功能及起搏细胞的影响。方法动物实验研究。2日龄新生SD大鼠36只, 根据随机数字表法分为单侧输尿管部分梗阻(PUUO)组、单侧输尿管完全梗阻(CUUO)组和假手术组, 每组12只。术后1周进行肾盂穿刺测压, 测压后处死幼鼠, 取左侧肾盂输尿管固定后用于组织学检测。记录并比较各组幼鼠不同灌注速度时肾盂压力、蠕动波频率、波幅等参数, 同时比较各组肾盂起搏细胞(非典型平滑肌细胞和Cajal样间质细胞)的变化情况。2组间比较采用独立样本t检验, 3组比较采用单因素方差分析。结果假手术组肾盂压力随灌注速度增加而缓慢增加;蠕动频率随灌注速度增加而快速升高, 达最大值后随灌注速度增加而降低。蠕动波振幅随灌注速度增加呈现先升高后降低。PUUO组肾盂压力随灌注速度增加而快速增加, 且均高于假手术组;蠕动频率较假手术组高, 在40 mL/h之前的蠕动频率较为接近, 但灌注速度再增加时, 蠕动波频率开始下降。蠕动波振幅随灌注速度增加出现快速升高而后下降, 且下降速度较假手术组快。CUUO组肾盂基础压力为12 cmH2O(1 cmH2O=0.098 kPa), 但在5 ...     

基于医联工程的糖尿病大数据中心建设及其在疫情防控中的应用

目的：探索基于区域医疗大数据平台构建大型专病科研数据中心的模式,为临床研究、疫情防控提供数据支撑。方法：通过对医联工程汇聚的上海市35家市级医院海量临床诊疗数据的深度治理和融合,构建上海市糖尿病临床大数据中心,为管理部门和临床科研人员提供在线数据分析环境。结果：基于医联工程的糖尿病大数据中心探索实践了基于真实世界的临床就诊数据研究和共享模式,为区域内糖尿病预防控制、疫情中患者管理、临床资源配置等方案的制定提供了真实数据参考依据。结论：构建基于区域医疗大数据平台的大型专病科研数据中心模式,可为未来构建更多区域专病科研大数据中心提供有益参考,以满足区域内疾病预防控制、临床科研等需求。     

长强穴切开挂线法治疗耻骨直肠肌综合征59例

目的探讨长强穴切挂术治疗耻骨直肠肌综合征的临床疗效。方法采用长强穴切挂术治疗59例经排粪造影及结肠传输试验确诊的耻骨直肠肌综合征患者。结果总有效率为96.61%,术后随访1年,复发1例,远期疗效满意。结论长强穴切挂术治疗耻骨直肠肌综合征手术操作方便,并发症少且疗效满意。     

氯唑沙宗杂质的遗传毒性研究

目的：本试验在体外条件下研究氯唑沙宗杂质是否具有遗传毒性,为临床用药安全提供依据。方法：采用Derek和Sarah方法,从定量构效关系（Q）SAR的角度对氯唑沙宗杂质进行分类和评价。对于软件预测结果为阳性的杂质,进一步采用细菌回复突变试验验证上述结果。结果：氯唑沙宗杂质6(CAS:889884-60-0)、杂质7(CAS:28443-50-7)的Derek和Sarah软件预测结果为阳性。细菌回复突变试验中,杂质6、杂质7在15～1250μg/皿剂量范围内,在代谢活化系统S9存在或不存在的情况下,五种菌株的回变菌落数均未超过自发回变菌落数2倍以上,试验结果为阴性。结论：氯唑沙宗杂质6、杂质7体外细菌回复突变试验结果均为阴性,可以按照非遗传毒性杂质进行控制。     

北京市心血管介入质控中心通过管理创新推动学科发展

通过对北京市心血管介入质量控制和改进中心成立近两年的运行情况进行分析,总结了质控中心在管理方面取得的经验,发现质控中心通过加强质量管理,提高了医疗机构的质量意识,有力地推动了北京市心血管介入专业的质量提高和技术进步,认为质控中心通过质量管理创新可以在相关专业的学科发展中发挥作用。     

共表达野生型p53及siRNA-mdm2质粒的构建及其在PC-3细胞中的表达

目的：构建可同时表达野生型p53 (wt-p53)及siRNA-mdm2的重组真核表达载体用于激素非依赖性前列腺癌的联合基因治疗。方法：利用亚克隆、T-A克隆和PCR技术合成并构建pcDNA3.1-p53、siRNA-mdm2、p53/siRNA-mdm2和siRNA-scramble重组质粒。脂质体法将上述重组质粒转染至PC-3细胞,半定量RT-PCR和Western blotting检测共表达质粒对mdm2和p53表达的影响,MTT法检测共表达质粒转染后PC-3细胞增殖活性。结果：克隆出wt-p53全长及带有U6启动子的siRNA-mdm2序列,经DNA测序证实序列正确,通过连接成功构建上述真核重组表达载体;转染细胞48 h后可见siRNA-mdm2组GFP明显表达; RT-PCR和Western blotting检测显示转染共表达质粒后PC-3细胞中 wt-p53表达增强,mdm2表达下调;MTT检测显示共表达质粒转染后PC-3细胞生长抑制率为40.4%。结论：成功构建p53与siRNA-mdm2共表达质粒,共表达质粒可抑制前列腺癌细胞PC-3的增殖。     

工学结合“嵌入式”人才培养模式在高职康复治疗技术专业中的探索与实践

工学结合“嵌入式”人才培养模式是校企合作下高职人才培养模式构建的一种探索。作为与人的生命健康密切相关的职业岗位，康复治疗师的医德素养和职业技能同等重要。作者从成果导向（Outcomes-based Education，OBE）的教育理念出发，探索职业精神和职业技能的融合培养，以开展“院中校”驻点教学为试点，探讨了将医德素养嵌入教学全程、培养规格嵌入课程标准、岗位要求嵌入教学内容的人才培养模式，在实践中取得了显著的效果，具有广泛的推广价值。