Typl-HGF对TNBS诱发的大鼠溃疡性结肠炎的治疗作用

目的:评价携带肝细胞生长因子基因的减毒沙门氏茵(Typl-HGF)对TNBS诱发大鼠溃疡性结肠炎模型的治疗效果.方法:40只Wistar大鼠经TNBS灌肠诱发溃疡性结肠炎模型,并随机分为减毒沙门氏菌株(Ty)治疗组、Typl-HGF治疗组、携带绿色荧光蛋白基因的减毒沙门氏茵株(Typl-GFP)观察组和模型对照组4组,每组10只;另设生理盐水灌肠正常对照组10只.3次和6次ig l wk后,分别观察各组大鼠的一般情况、结肠大体现及评分、结肠组织学变化及评分和目的基因表达.结果:Typl-HGF治疗组3次ig后体质量略有增加,但差异无统计学意义;6次Typl-HGF治疗后动物体质量较模型对照组平均增加9.75±2.07g,差异有统计学意义(P<0.05),Ty治疗组与模型对照组大鼠症状均无明显缓解.3次和6次Typl-HGF治疗组结肠大体标本积分明显低于同期Ty治疗组和模型对照组(2.20±0.90 vs 5.10±1.70,5.30±1.30;1.70±1.10 vs 4.00±1.50,4.30±1.20,均P<0.01),且3次和6次TyplHGF ig治疗相比较有统计学意义(P<0.05).3次ig后Typl-HGF治疗组组织学评分与Ty治疗组和模型对照组无明显差别;6次Typl-HGF治疗后组织学评分与同期模型组标本积分相比,二者之间差异有统计学意义(1.60±0.30 vs 3.50±0.70,P<0.05).Typl-GFP ig后在结肠组织可见GFP强表达.结论:Typ1-HGF能明显减轻TNBS诱发溃疡性结肠炎模型大鼠的症状及炎症,对已形成的黏膜损伤及溃疡有促修复作用.     

去甲基脱氧鬼臼毒素衍生物DPPC诱导A549细胞凋亡的研究

目的 探讨鬼臼毒素衍生物L-N-甲酰-4′-去甲基脱氧鬼臼-甲硫-4-N-哌嗪酰胺(DPPC)抑制人非小细胞肺癌A549细胞的增殖作用,阐述DPPC诱导A549细胞凋亡的相关分子机制.方法 体外培养A549细胞,Ho-chest33258检测DPPC处理A549细胞后细胞凋亡现象;Annexin V-FITC/PI双染定量检测DPPC处理后细胞凋亡数量;蛋白免疫印迹实验检测凋亡基因p53、caspase-3、Bax的表达.并与依托泊苷(阳性对照组)和未给予任何药物处理的A549细胞做对照.结果 DPPC组A549细胞中γ-H2AX的表达量较阴性对照组和阳性对照组都有明显的增加.荧光显微镜下见DPPC处理后的A549细胞核呈现萎缩,并出现细胞凋亡小体.与阴性对照组比较,不同浓度DPPC处理A549细胞后,抑制肿瘤发生发展的p53基因表达增加,并呈剂量依赖性,其下游的凋亡相关蛋白caspase-3以及Bax表达增加(P<0.05,P<0.01).相同浓度的DPPC和依托泊苷抑制凋亡相关蛋白有明显的差异(P<0.05).结论 DPPC能够引起A549细胞DNA损伤,并诱导细胞凋亡,DPPC能够使细胞内凋亡相关蛋白表达异常,抑制A549细胞增殖;此外,DPPC体外表现出优越的抗肿瘤细胞增殖作用.     

小檗碱衍生物HB-13对角质形成细胞分泌IFN-γ的影响

目的研究小檗碱衍生物HB一13对人永生化角质形成细胞（HaCaT细胞）分泌γ干扰素（IFN叫）的影响,探讨HB-13的抗炎机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝法确定HB-13作用于HaCaT细胞的安全浓度;细胞经P物质刺激后,加入不同浓度的HB-13分别孵育12、24、48h,应用酶联免疫吸附法（ELISA）检测培养上清液中IFN-γ的含量,应用实时荧光定量PCR法检测细胞内IFN-γmRNA表达情况。结果HB-13浓度为2．5、5、10μg／ml对HaCaT细胞毒性作用不显著,并可促进P物质诱导的IFN-γ的分泌。结论促进表皮细胞分泌IFN-γ可能是HB-13在皮肤局部发挥抗炎作用的机制之一。     

冬凌草甲素对Raji细胞的增殖抑制作用及其机制

目的探讨冬凌草甲素对B淋巴细胞白血病细胞株Raji细胞的增殖抑制作用及其机制。方法以不同浓度的冬凌草甲素作用于体外培养的Raji细胞，MTT法检测细胞生长抑制率，应用流式细胞仪、Hoechst 33258荧光染色法观察细胞凋亡，TRAP-PCR-ELISA法检测细胞凋亡前后的端粒酶活性。结果冬凌草甲素可显著降低Raji细胞的端粒酶活性，抑制细胞的生长，诱导细胞发生凋亡，并呈现出明显的剂量-效应与时间-效应关系。结论冬凌草甲素对B淋巴细胞白血病具有明显的体外抗白血病作用，降低细胞端粒酶活性，诱导细胞发生凋亡，可能是其重要作用机制。     

溃结康直肠介入治疗克隆病经验

我科在张秋才主任医师指导下开展了溃疡性肠病的研究,经多年临床实践,研创了溃结康直肠介入治疗溃疡性肠病的方法,收效良好.现将溃结康直肠介入治疗克隆病经验举例介绍如下.     

岷山红三叶草化学成分的研究

红三叶Trifolium pratense L.又名红车轴、红花苜蓿、红荷兰翘摇等,为豆科三叶草属多年生草本植物,原产于小亚细亚与东南欧,广泛分布于温带及亚热带地区,我国也有大面积种植,主要分布于甘肃、湖北、重庆等地。民间用其花序煎剂治感冒和肺结核、祛痰、利尿和消炎,外敷治脓肿、烧伤和眼疾等,并有应用花、种子、植株及根部制膏、浸膏、糊剂、煎剂和泡茶饮用,来治疗肠胃疾病[1]。近期研究发现,红三叶还具有抗癌,抗氧化,调节人体激素平衡,改善骨质疏松、妇女更年期综合征,清除自由基等作用[2~4]。鉴于其独特的药理功效及广阔的应用前景,笔者对岷…     

稳定表达MRG15基因的人晶状体上皮细胞株的建立

目的:克隆人15号染色体上死亡相关因子(MORF4-re-latedgeneonchromosome15,MRG15)基因的编码区全长,构建真核表达载体,建立稳定表达MRG15的人晶状体上皮细胞株,为MRG15在年龄相关性白内障(agerelatedcataract,ARC)发生中相关功能的研究奠定基础。方法:采用RT-PCR由人ARC晶状体前囊膜标本中扩增MRG15的编码区全长,克隆至pMD18-T载体并测序,结果正确后亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1( )中,采用脂质体法对培养人晶状体上皮细胞进行稳定转染,挑取单克隆,用Westernblot进行MRG15表达的鉴定。结果:测序证实,由ARC晶状体前囊膜中扩增出的MRG15编码区全长序列正确。重组质粒pcDNA3.1( )-MRG15经酶切后释放出与理论长度相符的片段。培养人晶状体上皮细胞稳定转染挑取单克隆后,经Westernblot检测,30个克隆中有19个MRG15的表达量明显增高。结论:克隆了人MRG15的编码区全长,成功构建了真核表达载体pcDNA3.1( )-MRG15,并建立了稳定表达MRG15的人晶状体上皮细胞株。     

抗苗勒氏管激素、瘦素与多囊卵巢综合征的相关性

目的:探讨抗苗勒氏管激素(AMH)、瘦素与多囊卵巢综合征(PCOS)发生、发展的关系。方法:测定56例PCOS患者血清AMH、瘦素、性激素,并取30例月经周期正常妇女进行对照。结果:PCOS组血清AMH明显高于对照组,PCOS组中高睾酮组AMH明显高于非高睾酮组,差异有极显著性;PCOS组血清瘦素明显高于对照组;PCOS组中血清AMH水平与睾酮水平呈显著正相关(r=0.713,P=0.001);PCOS组中瘦素与空腹胰岛素(FINS)存在正相关(r=0.655,P=0.002);多元线性回归分析瘦素与AMH存在相关(r=0.809,P=0.015)。结论:AMH与瘦素可能参与PCOS发生、发展并与性激素合成失调有关,测定血清AMH、瘦素水平为诊断和研究PCOS提供了一个重要的突破点。     

临床运用血府逐瘀汤体会

血府逐瘀汤出自清代名医王清任的《医林改错》中治疗胸中血府血瘀所致诸证.以活血化瘀而不耗血,舒肝解郁而不耗气广泛运用于临床.兹将笔者临床运用本方治疗脑梗塞、阻塞性肺气肿、糖尿病肾病的体会介绍如下.