RNA干涉干扰素调节因子-1和CD74可抑制因高糖所致自发高血压大鼠大血管平滑肌细胞的过度增殖

目的:探讨特异性iRNA下调干扰素调节因子-1(IRF-1)及CD74表达对高糖所致自发高血压大鼠源大血管平滑肌细胞的过度增殖的影响.方法:合成特异性IRF-1及CD74的RNA干扰片段,并将其插入载体pGSsi-U6/Neo/GFP以构建重组载体.借助Lipofectmine2000,将重组载体转染自发高血压大鼠源大血管平滑肌细胞,然后将细胞置于高糖环境培养.细胞计数、MTT法及PCNA表达以检测平滑肌细胞的增殖能力.结果:携带特异性干扰IRF-1和CD74片段的重组质粒,经Lipofectmine2000转染后,分别见88.9%和80.5%的平滑肌细胞显示绿色荧光.与对照组相比,RNA干扰后,CD74和IRF-1的表达降至9.2%和4.2%.CD74和IRF-1表达的缺失导致细胞活力和PCNA表达的显著下调.MTT法的结果显示,IRF-1干扰引起平滑肌细胞OD的限制下降,但类似的结果在CD74干扰组中未见.结论:上述结果提示IRF-1和CD74基因与糖尿病大血管病变相关,或可作为该疾病的治疗靶点.     

人退变椎间盘组织细胞凋亡相关基因表达的初步研究

目的探讨细胞凋亡与腰椎间盘退变的发生机制。方法一步法抽提6例退变及6例正常椎间盘组织的总RNA,分别用cy3,cy5荧光标记,获得两组椎间盘cDNA的探针,与cDNA表达谱芯片杂交,扫描芯片荧光信号图像,对所获得的凋亡相关基因进行生物信息学分析。采用原位末端标记法(TUNEL)和免疫组化方法,检测12例人退变椎间盘及10例正常椎间盘组织的细胞凋亡状态及凋亡相关基因Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果在4096条基因中,与细胞凋亡相关类蛋白为10条,其中Bax蛋白相关基因表达增高,Bcl-2蛋白相关基因表达降低。正常组TUNEL检测凋亡指数(AI)为(24.897±3.620),Bcl-2阳性细胞百分率为(31.440±4.150)%,Bax阳性细胞百分率为(29.372±2.588)%,阳性颗粒平均光密度值分别为(0.183±0.010)、(0.203±0.012)和(0.169±0.005);退变组AI为(49.232±3.440),Bcl-2阳性细胞百分率为(18.239±2.470)%,Bax阳性细胞百分率为(52.349±3.764)%,阳性颗粒平均光密度值分别为(0.152±0.003)、(0.310±0.008)和(0.262±0.014),两组间的AI均值、Bcl-2、Bax蛋白表达均有显著性差异(P<0.05)。结论细胞凋亡在椎间盘退变的进程中发挥重要作用,凋亡相关基因Bcl-2和Bax参与了髓核细胞凋亡的发生和发展过程。     

失神经施万细胞在周围神经损伤修复中的作用与机制

有关神经损伤后再生修复的研究已经历半个多世纪的时间,但至今仍没有基于神经损伤修复机制的突破性疗法应用于临床.基于施万细胞(Schwann cell)替代治疗的部分实验成功使干细胞移植及其构建的组织工程神经成为神经损伤修复的研究热点[1-2],然而其机制并不十分清楚,可能涉及细胞替代、营养作用、髓鞘化及稳定生长微环境等方面[3-5].目前研究主要集中在获得理想的干细胞源,以及干细胞移植后在体内的演变及对神经功能恢复的影响,但却忽视了宿主失神经施万细胞在干细胞治疗中的演变及其作用.成功的神经再生修复是由于移植细胞成功替代了宿主施万细胞还是支持或活化了退行性变中的宿主失神经施万细胞?至今未见相关报道.研究失神经施万细胞在干细胞移植过程中的演变及其作用,这对深入探究干细胞移植修复周围神经损伤的机制有着重要意义.现主要对近些年来国内外关于失神经施万细胞在周围神经损伤修复中的作用和施万细胞表型的改变对周围神经修复的影响及作用机制予以综述.     

甲状腺肿瘤增殖细胞核抗原表达的免疫组化研究

目的探讨增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）表达在甲状腺肿瘤病理学诊断和鉴别诊断中的意义及应用价值。方法采用 免疫组化ＬＳＡＢ法检测１４例甲状腺腺瘤,１０例不典型腺瘤,１５例乳头状腺癌,１０例滤泡性腺癌,１０例髓样癌,１０例未 分化癌。结果 ＰＣＮＡ增殖指数在甲状腺腺瘤为 １２．８,不典型腺瘤为 １９．８,乳头状癌为 １９．２,滤泡性腺癌为 ２６．４,髓样癌 为２７．９,未分化癌为４４．３。各组间比较：不典型腺瘤与乳头状癌之间无差异;腺瘤与不典型腺瘤和乳头状癌间有显著性 差异（Ｐ＜０．０５）,与其余各组有极显著性差异（Ｐ＜０．０１）。结论ＰＣＮＡ增殖指数可作为判断甲状腺肿瘤良恶性的指标,并 可反映其临床生物学行为,为预后提供重要信息。     

大鼠骨髓胚胎样干细胞的培养和鉴定

目的:探索骨髓胚胎样干细胞(ELSCs)的分离纯化和鉴定方法,并探讨该细胞分离培养方法的可行性。方法:采用全骨髓培养、明胶包被和无血清培养的方法,培养SD大鼠骨髓细胞,5 d后进行第1次传代,以后每2 d传代1次。观察其形态结构;免疫荧光检测其表面标志物CD73、CD90、CD105、SSEA-4、Sox-2、Nanog;流式细胞术检测干性标志物SSEA-4、OCT-4、Sox-2、Nanog的表达,并与骨髓间充质干细胞(MSCs)相比较;检测其向成骨细胞和成脂细胞的诱导分化能力。结果:获得的ELSC呈现长梭形,体积小且形态均一。免疫荧光示其表达CD73、CD90、CD105、SSEA-4、Sox-2、Nanog;流式细胞术检测示ELSCs表达CD73、CD90、CD105,且纯度高于95%,与MSCs相比,ELSCs的SSEA-4、OCT-4、Sox-2、Nanog等干性基因表达较高。结论:该方法获得的ELSCs干性较强、强度较高,可分离、培养出ELSCs。     

系统解剖学双语教学初探

系统解剖学是医学生接触的第一门医学课程.结合解剖学的专业特点、学生学习能力和英语水平,我们精心编写双语教材,采取循序渐进、逐步加大双语教学力度的方式,即按照双语单词→双语句型→双语短文→双语授课的教学顺序,最终在神经系统理论课教学中实施双语授课,取得了初步成效.     

双源窦房结动脉一例

在解剖一例成年男性离体心时,观察到其窦房结动脉由左、右两侧同时发出,现报道如下.     

骨髓神经组织定向干细胞性组织工程化神经的构建

目的:为临床周围神经损伤的移植治疗提供生物化的神经移植替代物.方法:将骨髓神经组织定向干细胞(NTCSCs)种植于犬坐骨神经脱细胞神经支架,构建组织工程化神经,桥接缺损的大鼠坐骨神经,检测所构建生物化组织工程神经中骨髓NTCSCs的增殖、分化及神经性基因表达,观察该神经移植到体内后的细胞增殖、分化及对神经缺损功能的修复.结果:由骨髓NTCSCs和异种脱细胞神经支架构建的生物化组织工程神经物理性状相似于神经移植体,骨髓NTCSCs在支架上增殖、迁移,并表达神经性基因及蛋白.该组织工程神经植入体内后,骨髓NTCSCs分化为少量神经元特异性烯醇化酶(NSE)阳性细胞及大量S-100阳性细胞,并可修复缺损的坐骨神经功能.结论:骨髓NTCSCs和异种脱细胞神经支架构建的生物化组织工程神经相似于神经移植体,可应用于周围神经损伤修复中.     

极小胚胎样干细胞的研究进展

近年来随着干细胞研究的进展,一些具有多向分化潜能的细胞群相继在成体中得到分离鉴别,如骨髓间充质干细胞(mes-enchymal stem cell,MSCs)[1],成体多能祖细胞(multipotent a-dult progenitor cells, MAPCs)[2],成体骨髓多向诱导细胞(mar-row-isolated adult muhilineage inducible,MIAMI)[3],以及非限制性体干细胞(unrestricted somatic stem cells, USSC)[4]等.     

伴导管腺癌和破骨细胞样巨细胞的胰腺未分化癌临床病理观察

目的探讨伴导管腺癌和破骨细胞样巨细胞的胰腺未分化癌的临床病理特征。方法对1例伴导管腺癌和破骨细胞样巨细胞的胰腺未分化癌进行临床、病理及免疫组化观察。结果患者男性,32岁。胃镜发现十二指肠降段菜花状肿块。切除标本示十二指肠与胰头之间有一8cm×6cm×5cm大小紫褐色肿物,质较脆,有出血坏死。镜下见肿瘤主要由两种成分构成,一种为分化较好的导管腺癌,免疫表型CK和EMA(+),vimentin(-);另一种为分化较差弥漫浸润的多形性癌细胞,免疫表型CK、EMA和vimentin(+),并见CD68和vimentin(+)的破骨细胞样多核巨细胞。结论伴有破骨细胞样巨细胞的胰腺未分化癌是胰腺导管腺癌的一个亚型,破骨细胞样巨细胞可能为反应性多核巨细胞,而非肿瘤性成分。