人骨髓间质干细胞向成骨细胞分化的形态学研究

目的：研究人骨髓间质干细胞(hMSCs)体外培养并向成骨细胞表型转化过程中的形态学改变。方法：在成骨特定诱导培养液中培hMSCs。在相差显微镜和电子显微镜下观察细胞形态，苏木精-伊红染色观察形态，组织化学法检测碱性磷酸酶(ATP)、Ca结节染色．免疫组化检测Ⅰ型胶原(COL Ⅰ)、骨钙素(OC)表达。结果：诱导培养的hMSCs形态由成纤维样梭形向多边形转变，透射电镜观察见大量扩张的粗面内质网、高尔基体、线粒体和钙盐沉积，扫描电镜见细胞表面有大量钙盐颗粒。诱导培养后7，14，2ld可见ALP染色、COL Ⅰ免疫组化染色阳性，诱导培养后14，21d可见OC免疫组化染色、Ca结节染色阳性。结论：hMSCs在特定培养液诱导下可表现为典型的成骨细胞形态，可作为骨组织工程的种子细胞。     

兔气管纤毛上皮细胞原代培养的生物学特性及其体外生长规律

目的:建立兔气管纤毛上皮细胞原代培养模型,观察其体外培养条件下的生物学特性并确定其体外生长规律。方法:实验于2005-03/07在解放军第四军医大学唐都中心实验室完成。①纤毛上皮细胞提取及培养:日本大耳兔20只,利用酶消化法分离获取兔气管纤毛上皮细胞,无血清生长因子培养基(成分:DMEM:Ham’sF12为1∶1,并加入以下激素及生长因子:10mg/L胰岛素、5mg/L转铁蛋白、20μg/L甲状腺素、0.4mg/L氢化可的松、7.5mg/L内皮细胞生长支持物、25μg/L表皮生长因子、1mmol/L-谷氨酰胺,100IU/mL青霉素,50mg/L链霉素)体外培养。②细胞纯度及鉴定:用抗角蛋白单克隆抗体进行SP法免疫细胞化学反应,二氨基联苯胺显色阳性为上皮细胞。扫描电镜观察细胞表面结构。结果:①气管上皮细胞的分离:低温消化加刷洗法获得的气管上皮细酶胞数量较多,呈圆形,较大,悬浮旋转。②气管上皮细胞生长状态和形态特征:皿接种细胞24h后,贴壁率约为60%,细胞增大,并进入分裂套相。五六天后细胞增殖旺盛,部分无纤毛上皮细胞汇合呈多角形铺路石样相嵌生长,在相差显微镜下放大200～400倍清晰可见纤毛呈海葵样向心摆动活跃,第3周纤毛逐渐消失成遗迹,细胞凋亡。③纤毛细胞的电镜观察:见纤毛由细胞顶膜伸出,大部分集结成束,除纤毛外,还可有稠密的较细短的微绒毛由细胞顶膜伸出。④气道上皮细胞的免疫细胞化学鉴定:抗角蛋白单克隆抗体免疫组织化学染色阳性,细胞达(91±3)%。结论:酶消化法分离、无血清生长因子培养基培养,以建立兔气管纤毛可上皮细胞的原代培养模型,具有成为气管组织工程种子细胞的应用价值。     

端粒酶反义RNA 对人喉癌细胞系Hep-2 生长的影晌

 目的　探讨抗端粒酶在喉癌细胞治疗中的意义。方法　用脂质体介导法将 pBBS2 12 hTR(反义端粒酶RNA真核表达载体 )转染入人喉癌Hep 2细胞系中 ,采用TRAP法测定端粒酶活性 ,细胞动力学检测 ,电镜下观察等方法研究其对Hep 2细胞的端粒酶活性、细胞增殖及细胞凋亡影响。 结果　端粒酶反义RNA能显著抑制细胞的端粒酶活性 ,抑制细胞增殖并促进其凋亡。结论　以端粒酶反义RNA抑制端粒酶活性是治疗喉癌的潜在途径。     

白细胞介素1导致中耳胆脂瘤骨质破坏

中耳胆脂瘤造成骨质破坏的确切机理还不很清楚,有各种理论解释。本文作者认为白细胞介素1(IL—1)在其中起重要作用。为证实其理论,作者采用以下实验:①病人手术取出的胆脂瘤标本作石蜡切片,免疫过氧化物酶染色,证明在胆脂瘤的活性骨质破坏区有高浓度的IL—1,尤为明显的是IL—1主要在单核细胞及与胆脂瘤相连接的骨细胞内。②用新生小鼠头骨制备成骨细胞,加上不同浓度的IL—1,放免法测定IL—1刺激成骨细胞产生前列腺素E_2的量及胶原酶活性。结果当IL—1浓度为100pg/ml时前列腺素E_2产量最大。IL—1的浓度在10～1 000p/ml不刺激成骨细胞产生胶原酶。③从小鼠的     

鼻腔异位脑膜瘤1例

<正> 脑膜瘤是中枢神经系统常见肿瘤,而原发于耳鼻咽喉部位的脑膜瘤则少见。现将我们收治的1例报告如下。患者女,33岁,以鼻阻塞、鼻根部肿痛于1989年12月9日入院。2月前因“感冒”左鼻     

黏膜免疫在中耳炎及其防治中的作用

中耳系统感染引起的炎症病理过程受到多种因素的影响，其中中耳黏膜的免疫功能在这一过程中扮演了重要角色。作者就黏膜免疫、细胞因子在中耳炎病理变化中的作用机制以及在中耳炎防治中的应用作一综述。     

197例老年耳鸣患者的临床特征分析

目的 评估分析老年人群中耳鸣的临床特征.方法 以问卷调查的方式,收集2008年6月至2009年6月197例以主观性耳鸣为第一主诉的60岁以上耳鸣患者的基本信息,并进行纯音测听及耳鸣匹配检查,分析耳鸣的基本特征及其与各相关因素之间的关系.结果患者平均年龄69.63岁,其中60～70岁为分布最集中的年龄段(59.4%);突然发病者耳鸣的严重程度高于缓慢发病者,差异具有统计学意义(P＜0.01);耳呜响度与耳鸣的严重程度无关(P＞0.05);其中92.4%的患者伴有听力下降,80.2%患者的耳鸣对其心理及日常生活已产生较明显的影响.结论 耳鸣与老年人的生活质量密切相关,其影响主要是来自患者对待耳鸣的心理状态.在临床工作中应特别注重心理和社会因素对耳鸣的影响和作用.     

两种方法制备兔小肠黏膜下层的对比研究

目的：比较两种制备方法所获兔小肠黏膜下层（SIS）的异同，为SIS作为组织工程细胞载体选择最佳制备方案。方法：分别采用消毒法（实验Ⅰ组）和顺序化学浸泡脱细胞法（实验Ⅱ组）处理机械剥离获取的兔小肠黏膜下层，进行组织学、扫描电镜检查及四甲基偶氮唑蓝（MTT）细胞毒性对比实验。结果：组织学及电镜扫描显示，与消毒法相比，经顺序化学浸泡脱细胞处理的SIS纯度高，孔隙多，安全性高，胶原纤维未受损；浸提液MTT检测各实验组相对增殖率均〉1，100％SIS浸提液各实验组与对照组吸光值均有显著性差异（P〈0．05），相同浓度不同SIS浸提液组间无显著性差异，表明多种化学试剂的SIS对软骨细胞不增加毒性，有一定促生长作用。结论：化学脱细胞法较消毒法制备的SIS安全性好，易保存，可操作性强，所获SIS是一种较理想的软骨细胞载体。     

体外保存兔甲状软骨活性的实验研究

目的:研究如何在体外长期保存兔甲状软骨块的活性.方法:取兔甲状软骨15块,软骨大小约5 mill×2 mill×1mm,将所取软骨块分别置于4℃,-80℃冷冻及RPMI-1640液,于37℃培养保存,于保存24 h,7,14,21,30 d时取样品,分别用HE,AB/PAS及Masson三色染色和台盼蓝排斥试验检测软骨活性.结果:用RPMI-1640培养液保存的兔甲状软骨,在整个保存期中活性保持较好,软骨细胞活性率保持在85%左右;-80℃冷冻保存7d时软骨基本失去活性,4℃保存软骨在保存30d时软骨活性明显降低.结论:与低温保存方法相比,用组织培养法能较好地保存兔甲状软骨块活性.     

临床医学研究生创新性教育中的问题与对策

临床医学研究生是我国医学研究中的一支重要力量。培养有创新意识和创新能力的研究生对临床医学事业的发展具有重要意义。然而 ,目前在临床医学研究生创新能力培养方面不尽如人意。本文分析了目前存在的一些问题并提出解决这些问题的相应措施