氯离子通道阻滞剂对人眼小梁细胞增生及凋亡的影响

背景 氯离子通道阻滞剂5-硝基-2-(3-苯丙胺)苯甲酸(NPPB)对家兔心肌细胞缺血-再灌注损伤时的细胞凋亡有促进作用,而小梁细胞上也存在ClC型氯离子通道及容积敏感性氯离子通道,但NPPB究竟会对小梁细胞的形态和功能产生什么影响尚不清楚. 目的 探讨氯离子通道阻滞剂NPPB对人眼小梁细胞增生及细胞周期、细胞凋亡的影响.方法 将处于对数生长期的永生株人眼小梁细胞进行培养并以1×106个/ml的密度接种于96孔培养板,将不同浓度(10、50、100 μmol/L)的NPPB分别加入小梁细胞培养基中,通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测各组小梁细胞的增生情况以吸光度(A)值表示;采用流式细胞术测定小梁细胞的细胞周期.将100 mg/L 5-氟尿嘧啶(5-FU)加入培养的细胞中,而另一组培养的细胞中加入100 mg/L 5-FU+100μmol/L NPPB,用Annexin V-PI法检测各组小梁细胞的凋亡情况;罗丹明123法检测细胞线粒体膜电位(△ψm),分别评估各浓度NPPB对培养的人小梁细胞生长和存活的影响.结果 3种不同浓度的NPPB与小梁细胞共同孵育48 h后4个组小梁细胞的增生率差异有统计学意义(F=7.230,P=0.006),50 μmol/L、100μmoL/L NPPB作用后小梁细胞的A值明显低于10 μmol/L NPPB组,50 μmol/L NPPB组、100μmol/LNPPB组与空白对照组比较差异均有统计学意义(t=1.610,P=0.025;t=12.270,P=0.001).小梁细胞培养基中加入NPPB 48 h后,G0/G1期的细胞比例增多,S期细胞比例减少,各细胞周期小梁细胞的比例与未加NPPB的组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).用5-FU作用24 h及48 h后,100 mg/L 5-FU组和100 mg/L5-FU+100μmol/L NPPB组的细胞凋亡率均较其各自空白对照组增加(t24h=2.130,P=0.023;t48h=4.810,P=0.011);100 mg/L 5-FU+100 μmol/L NPPB组细胞凋亡率明显高于100 mg/L 5-FU组,差异均有统计学意义(t24h=1.980,P=0.037;t48h=1.290,P=0.028),小梁细胞线粒体膜电位降低,差异均有统计学意义(t24h=1.580,P=0.029;F48h=6.200,P=0.015).结论 氯离子通道阻滞剂NPPB可抑制小梁细胞增生,抑制小梁细胞通过G1/S期限制点进入S期;NPPB对5-FU诱导的小梁细胞凋亡有促进作用,与内源性线粒体凋亡通路相关.     

孕酮对慢性高眼压模型大鼠视网膜神经节细胞的保护作用

目的：建立大鼠慢性高眼压模型，检测孕酮对高眼压下大鼠视网膜神经节细胞的保护作用。方法：通过烧灼3条巩膜上静脉制作慢性高眼压动物模型，此模型按腹腔注射不同浓度的孕酮而分为高、中、低浓度孕酮注射组及空白对照组，左眼为模型眼，右眼为自身对照眼，3个月后处死动物，取眼球制石蜡切片，行HE染色、Thy-1.1免疫组化染色及TUNEL原位凋亡检测。结果：各组模型眼比较，高浓度孕酮注射组视网膜神经节细胞数多于低、中浓度孕酮注射组及空白对照组（P<0.05），且TUNEL阳性细胞数也少于低、中浓度孕酮注射组及空白组(P<0.05)。结论：孕酮对慢性高眼压模型大鼠的视网膜神经节细胞有保护作用，并且此保护作用与孕酮的浓度有关。     

肌酐检测方法及常见药物对肌酐检测干扰的研究进展

血清肌酐的检测有多种方法,每种方法的特异性和抗干扰能力均不同,由此造成不同临床实验室血清肌酐测定结果出现差异。此外,药物对肌酐测定的干扰问题受到越来越多的关注,临床上很多常见的药物均会导致肌酐测定出现假性结果,且同种药物会因不同的检测方法而出现不同的干扰方向。文章对肌酐的检测方法及干扰肌酐检测结果的常见药物作一综述。     

氯离子通道阻滞剂对人眼小梁细胞增殖的影响

目的 探讨氯离子通道阻滞剂5-硝基-2-(3-苯丙胺)苯甲酸[5-nitro-2-(3-phenyl-propylamino)-benzoic acid,NPPB]对体外培养人眼小梁细胞增殖的影响.方法 RT-PCR检测体外培养人眼小梁细胞ClC-3 mRNA表达,用不同浓度的NPPB作用体外培养的人眼小梁细胞,台盼蓝染色细胞计数法检测细胞存活率,四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测其增殖能力.结果 体外培养人眼小梁细胞存在ClC-3 mRNA表达;不同浓度NPPB作用后小梁细胞存活率无显著差异;在一定浓度范围内(50～100 μmol/L),NPPB均可使体外培养的人眼小梁细胞增殖能力下降,其中100 μmol/L NPPB的作用最强.结结论一定浓度的NPPB可降低体外培养的人眼小梁细胞增殖能力.     

基于改良型痘苗病毒安卡拉株载体的新型流感疫苗研究进展

流感是由流感病毒引起的一种严重危害公众健康的呼吸道传染病,已引起全球的高度关注,接种疫苗是预防流感最有效的措施。当前,建立快速流感疫苗研发生产平台对于流感的预防与控制至关重要。以病毒为载体的活疫苗为感染性疾病的防控提供了新的手段。改良型痘苗病毒安卡拉株(Modified Vaccinia virus Ankara,MVA)是一种复制缺陷型病毒载体。MVA能够同时容纳并表达多个外源抗原、诱导较好的体液和细胞免疫应答并具备良好的安全性,具有成为理想疫苗载体的潜力。本文就MVA载体在流感疫苗研究中的应用做一综述。     

中枢性低钠血症的诊治体会

目的探讨中枢性低钠血症的发病机制、诊断及治疗方法。方法对该院21例中枢性低钠血症患者的临床资料进行回顾性分析。结果19例低钠血症恢复正常;2例因合并颅内感染,高热不退,1例死亡,1例经控制感染后,低钠血症恢复正常,但仍昏迷不醒。结论低血钠、高尿钠和意识状态改变是中枢性低钠血症的诊断依据,抗利尿激素分泌不当综合征（SIADH）应限水治疗,脑性盐耗综合征（CSWS）则作水化和补盐治疗。     

小梁切除术+睫状体冷冻术+全周边视网膜冷凝术治疗新生血管性青光眼

目的探讨新生血管性青光眼的手术治疗方法。方法对15例（15眼）新生血管性青光眼患者施行小梁切除术＋全周边视网膜冷凝＋睫状体冷冻术。结果所有病例术后随访6～24个月，12例眼压控制良好，手术成功率为80％，3例再次行睫状体冷冻术，2例眼压控制良好。结论小梁切除术＋睫状体冷冻术＋全视网膜冷凝术是治疗新生血管性青光眼一种简单、经济、有效的方法。     

基于M2e的广谱流感疫苗及其免疫保护机制研究进展

疫苗接种是预防流感最有效和经济的手段.当前使用的流感疫苗主要是作用于特异性的流感病毒表面糖蛋白血凝素,只能对和疫苗株匹配的流行株提供保护,因此每年需要对疫苗株进行更新.研发能够预防不同亚型流感病毒的广谱疫苗成为流感疫苗研究的热点.M2e是甲型流感病毒保守片段,可作为广谱流感疫苗的候选抗原,是目前广谱流感疫苗研究的热点.本文将就M2e广谱流感疫苗及其免疫保护机制的研究进展作一综述.     

hTERT、CA125、HE4联合XPO4检测在子宫内膜癌诊断及预后评估中的临床意义

目的 探讨端粒酶逆转录酶(hTERT)、输出蛋白4(XPO4)、糖类抗原125(CA125)联合附睾蛋白4(HE4)检测在子宫内膜癌诊断及预后评估中的临床意义。方法 纳入2016年5月至2017年10月我院接受手术治疗的80例子宫内膜癌(恶性组)及80例子宫内膜增生患者(良性组),采集两组患者病灶样本及血清样本，检测两组hTERT、CA125、HE4、XPO4表达；并对患者随访3.6～5.3(4.5±0.6)年，根据预后差异分为预后良好组、预后不良组，对比两组hTERT、CA125、HE4、XPO4水平并绘制受试者工作特征(ROC)曲线，分析以上指标对疾病预后的预测价值。结果 恶性组hTERT mRNA、CA125、HE4表达高于良性组，XPO4 mRNA表达低于良性组(P<0.05)。预后不良组hTERT mRNA、CA125、HE4表达高于预后良好组，XPO4 mRNA表达低于预后良好组(P<0.05)。经ROC曲线分析，联合指标(hTERT mRNA、CA125、HE4、XPO4 mRNA)诊断子宫内膜癌及预测子宫内膜癌预后的效能的AUC、灵敏度、特异性更高。结论hT...