膜片钳技术与Muller细胞膜离子通道

膜离子通道活动是细胞电活动的基础，研究膜离子通道通透机制及各种离子通透性的变化，对阐明细胞生物电现象和其他生命现象的机制具有重要的理论意义和应用价值。长期以来，人们一直试图解决这一问题并做了大量工作。五十年代，Hodgldn采用电压钳技术对乌贼巨大神经轴突的离子电流和钠、钾离子通透性进行了广泛的研究。七十年代初，Keynes等测量了闸门电流，确认了钠通道门控过程与通道组分中带电成分运动的依从性。直至八十年代初发展起来的膜片技术，才为人们从分子水平上了解生物膜离子通道的门控力学特征及通透性、选择性等膜信息，提供了最直接的手段。这一技术的兴起和应用，使人们对细胞电活动的认识进入了新的阶段，也是电生理学研究方法的突破性进展。     

舒血宁联合肠溶阿司匹林治疗视网膜静脉阻塞

目的:探讨舒血宁联合肠溶阿司匹林治疗视网膜静脉阻塞(RVO)的疗效。方法:将62例RVO患者随机分组:治疗组31例,给予静脉滴注舒血宁注射液,联合应用口服肠溶阿司匹林。对照组31例,给予静脉滴注丹参注射液。两组均常规口服维生素C、路丁、肌苷及钙剂。结果:治疗组有效率达96.77%,对照组有效率81.25%,两组治疗结果差异有显著性(P<0.01)。结论:舒血宁联合肠溶阿司匹林治疗RVO疗效好,值得探讨。     

多波长氩离子激光治疗早产儿视网膜病变的疗效对比

目的 比较多波长氩离子激光治疗急进性与阈值期或阈值前期早产儿视网膜病变(retinopathy of prematurity,ROP)的临床效果.方法 临床病例回顾性对照研究.对2008年5月至2010年12月在白求恩第一医院眼科接受氩离子激光治疗的48例(94只眼)患有ROP患儿的临床资料.将其分为两组,一组:急进性早产儿视网膜病变(AP-ROP)组;二组:阈值期或阈值前期早产儿视网膜病变组.将两组ROP患儿采用多波长氩离子激光治疗的疗效及两组间各相关因素进行比较研究.结果 48例(94只眼)患儿中18例(36只眼)为AP-ROP,治愈率88.89％;30例(58只眼)为阈值期或阈值前期ROP,治愈率94.83％,两组ROP患儿的治愈率比较差异无统计学意义(x2=1.17,P=0.286,P＞0.05).两组间各相关因素比较,新生儿呼吸窘迫综合征(x2=11.27,P＜0.05)及早产儿贫血(x2=7.27,P＜0.05)两组间差异具有统计学意义.患儿的性别、胎龄、激光治疗时矫正胎龄、出生体重、败血症、新生儿肺炎、先天性心脏病等因素两组间差异无统计学意义.结论 氩离子激光治疗AP-ROP及阈值期或阈值前期ROP是安全且有效的,AP-ROP激光治疗治愈率较阈值期或阈值前期ROP低,新生儿呼吸窘迫综合征及新生儿贫血是影响ROP患儿激光光凝治愈率的危险因素.     

碱性成纤维细胞生长因子在糖尿病大鼠视网膜病变中的表达

目的 :探讨碱性成纤维细胞生长因子 ( b FGF)在糖尿病大鼠视网膜中的表达情况。方法 :建立糖尿病大鼠动物模型后 1、3、5个月进行视网膜石蜡切片的原位杂交及免疫组化实验。结果 :b FGFm RNA从 3个月开始有表达 ( 78% ) ,5个月时增加至 89% ,b FGF蛋白质也从 3个月开始有表达 ( 5 6% ) ,5个月时增至 89%。结论 :b FGF在糖尿病大鼠背景期的视网膜病变中有表达     

兔视网膜Müller细胞原代培养

目的 :建立兔视网膜 Müller细胞原代培养的方法。方法 :组织块悬浮法培养兔视网膜Müller细胞 ,用电镜和免疫组织化学法对细胞进行鉴定。结果 :培养的细胞贴壁生长 ,呈长梭形 ,胞体肥大 ,胞浆丰富。电镜下可见特征性的中间丝 (直径 8～ 1 0 nm) ;免疫组织化学显示细胞呈神经胶质纤维酸性蛋白 ( GFAP)和 S- 1 0 0阳性 ,八因子相关抗原阴性。结论 :组织块悬浮法培养兔视网膜Müller细胞是一种稳定、可靠的方法     

耳蜗螺旋神经节细胞的电生理实验研究现状

耳蜗螺旋神经节细胞(spiral gaaglion cell,SGC),可将毛细胞的信号传向听觉中枢,在听觉信息的传导中起着极其重要的作用.目前,应用全细胞记录膜片钳技术,证实了SGC细胞膜上可表达多种离子通道,如电压门控离子通道,ATP控制的离子通道,神经递质受体介导的离子通道等,而各种病理状态下的SGC均伴有某些特定离子通道的电变化.对这些电变化的研究,将为我们在细胞和分子水平上诊断和治疗许多由内耳疾病所导致的耳聋和听力障碍提供可能.     

儿童trapdoor眼眶骨折临床分析

目的 通过分析儿童trapdoor眼眶骨折病例,探讨儿童trapdoor眼眶骨折的常见病因、临床表现及手术疗效.方法 回顾2003年1月至2009年10月确诊为儿童眼眶爆裂性骨折21例患儿,11例11眼为trapdoor眼眶骨折.对11例患儿进行临床回顾性分析.结果 11例trapdoor眼眶骨折患儿主要眼部表现为患眼上转伴下转受限10例(90.9%)、仅上转受限1例(9.1%),眼球运动垂直位转动受限伴恶心、呕吐7例(63.6%),手术距受伤时间间隔为10～36 d,平均(17.0±6.9)d.术后随访1～2个月,眼球上转、下转受限较术前均有轻度改善,但双眼向下注视仍存在复视.结论 Trapdoor眼眶骨折主要临床表现为患侧垂直位眼球运动障碍,可伴恶心、呕吐,眶部CT表现为眶下壁一窄裂,下直肌等眶内软组织常被箝闭于骨折处.晚期手术(伤后10 d以上)疗效欠佳.     

人脐血内皮祖细胞体外培养和鉴定的研究(英文)

目的:阐述从人脐血单核细胞分离培养EPCs的方法,并观察EPCs体外增殖分化过程中内皮细胞特异性抗原的表达,为进一步研究EPCs在缺血性视网膜疾病的临床应用奠定基础。方法:采用密度梯度离心方法获得脐带血单个核细胞,体外进行诱导、分化和扩增,通过免疫组化和流式细胞仪分析等技术对脐血来源的EPCs进行鉴定,在我们的研究中主要分析CD34,血管内皮细胞生长因子受体-2(VEGFR-2),EPCs特异性抗原CD133,以及内皮细胞特异性抗原CD31和第八因子相关抗原(vWF)的表达情况。同时我们通过分析细胞摄取乙酰化低密度脂蛋白(acLDL)和结合植物凝集素的能力进一步鉴定细胞。结果:脐带血单个核细胞在培养早期主要为梭形细胞,逐渐呈现铺路石样外观;在细胞培养至第7d,贴壁细胞流式细胞仪分析显示,CD133, CD34和VEGFR-2的阳性率分别为17.8%±3.7%, 22.1%±4.4%和81.5%±5.0% ;免疫组化染色结果显示CD31、vWF的表达率分别为92.7%±2.2%和73.3%±4.2%;免疫荧光染色结果表明83.0%±4.3%的贴壁细胞DiI-acLDL和FITC-UEA-I染色均阳性。结论:本实验证明在体外特定的培养条件可以从脐带血单个核细胞中分离培养出EPCs,为进一步研究EPCs与视网膜新生血管的关系以及EPCs治疗缺血性眼底的临床研究奠定了基础。     

高糖培养的视网膜Muller细胞中embelin对VEGF蛋白质表达的抑制作用

目的研究高糖培养的视网膜Müller细胞中embelin对血管内皮生长因子(VEGF)蛋白质表达的调控作用。方法原代培养的大鼠视网膜Müller细胞在不同糖浓度的培养液中培养,加入X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)的特异性抑制剂emblin培养72 h后,利用Western印迹技术检测细胞内VEGF蛋白质的表达情况。结果高糖条件下,在视网膜Müller细胞中VEGF蛋白质表达上调。并且,XIAP的抑制剂emblin加入高糖培养环境后VEGF蛋白质表达下降。结论 XIAP的特异性抑制剂emblin对糖尿病性视网膜病变中VEGF引起的新生血管具有潜在治疗作用。     

糖尿病大鼠视网膜中血管内皮生长因子的表达

目的 利用糖尿病大鼠动物模型，通过大鼠视网膜中血管内皮生长因子(vascular endothellal growth fac—tor，VEGF)的表达情况，探讨VEGF在糖尿病视网膜病变(Diabetlc Retinopathy，DR)发展过程中作用机理。方法 复制链脲佐菌素(Streptozocin，STZ)糖尿病大鼠动物模型，取不同组、不同时期大鼠视网膜，利用免疫组织化学及原位杂交方法，检测VEGF蛋白质及mRNA的表达情况。结果 正常对照组(H)、血糖恢复组及糖尿病1月组(H1)大鼠视网膜均无VEGF蛋白质及mRNA的阳性表达。糖尿病3月组(M3)未见VEGF mRNA表达，而在内核层及节细胞层VEGF蛋白表达阳性(34％)，此表达与胶质纤维酸性蛋白(GFAP)染色阳性细胞相同。糖尿病5月组(M5)VEGFmRNA表达阳性率为67％，表达位于视网膜各层，内界膜中的表达与GFAP免疫组化阳性分布相同，VEGF蛋白质表达强阳性(89％)，主要位于内核层、节细胞层的细胞及血管上。结论 VEGF在STZ大鼠视网膜中的表达与病程相关，而且VEGF的产生存在着自分泌和旁分泌多种途径。