超声造影在眼科临床诊断中的应用

超声造影是利用造影剂使后散射回声增强,明显提高超声的分辨力、敏感性和特异性的技术。目前超声造影在眼科临床的应用尚未广泛开展,但已有研究表明超声造影能明显增强球后血管的显示能力,可用来观察眼内某些病变的微循环状态。本文对超声造影在眼科临床诊断中的应用作一综述。     

白内障术前睑板腺特殊处理对结膜囊微生物影响分析

目的 前瞻性研究白内障术前通过眼睑热敷、按摩及清洁睑缘等睑板腺的特殊处理对结膜囊微生物状态的影响,寻求更安全的内眼手术术前准备方法.方法 将87例90只眼拟行白内障手术患者随机分为A(空白组:未做任何处理之前)、B(对照组:术前使用抗生素眼液滴眼、剪眼睫毛、生理盐水冲洗泪道及结膜囊等常规术前准备)、C(处理组:常规术前准备+睑板腺特殊处理)三组,分别为25例26只眼、29例29只眼、33例35只眼,A组于人院时,B、C两组于手术开始及术毕两个时间点分别采集结膜囊标本,送检行微生物培养.结果 (1)结膜囊微生物培养阳性率:A组为53.85％,B组与C组手术开始及术毕两个时间点的阳性率分别为10.34％、27.59％与2.86％、5.71％.C组结膜囊微生物培养阳性率明显降低,与A组、B组组间差异均有统计学意义(P＜0.05).(2)结膜囊微生物培养阳性率与术前抗生素眼液使用天数、术前睑板腺处理时间、手术持续时间长短差异均无统计学意义(P＞0.05).(3)结膜囊微生物培养菌种:共培养出阳性菌28株,5种菌属.未培养出真菌.结论 (1)正常人群中结膜囊存在一定细菌;术前使用抗生素眼液滴眼、剪眼睫毛、生理盐水冲洗泪道及结膜囊等常规术前准备可以减少结膜囊微生物培养阳性率;对睑板腺特殊处理后可以更进一步降低结膜囊微生物培养检出率.(2)白内障术前增加对睑板腺的特殊处理可以在减少局部使用抗生素眼液时间的情况下,同样达到有效清洁术野、减少结膜囊微生物的作用,从而起到降低术后眼内炎风险的作用.     

NY-ESO-1 致敏树突状细胞诱导的细胞毒性 T 淋巴细胞对视网膜母细胞瘤细胞的特异性杀伤作用

背景 目前用细胞免疫的方法治疗视网膜母细胞瘤(RB)成为新的研究热点,肿瘤-睾丸抗原是最具免疫原性的人类肿瘤抗原之一,已用于全身一些肿瘤的免疫治疗,但其对RB治疗作用的研究报道较少.目的 探讨肿瘤-睾丸抗原的New York-esophageal-1(NY-ESO-1)致敏树突状细胞(DCs)诱导特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对RB细胞株HXO-RB44的杀伤作用.方法 用聚合酶链反应(PCR)技术对NY-ESO-1质粒的目的基因片段进行扩增,使用SalI限制酶和EcoRI限制酶进行双酶切,切胶回收DNA片段.将其连接入pDC316质粒,构建pDC316/NY-ESO-1真核表达载体并再进行酶切鉴定.免疫荧光及Western blot 法检测NY-ESO-1蛋白在HXO-RB44细胞株中的表达.Ficoll法分离血获得单个核细胞,通过RPMI 1640重悬,调整细胞密度为1×106个/ml,通过重组人集落刺激因子(rhGM-CSF)和重组人白细胞介素4(rhIL-4)诱导培养外周血来源的DCs,通过重组质粒转染DCs,以脂多糖诱导DCs成熟,DCs与淋巴细胞数量比为1∶25的比例混合培养HXO-RB44细胞,通过MTT法检测CTL的增生情况.在培养液中同时加入CTL细胞,MTT法检测HXO-RB44细胞的活力.结果 重组质粒pDC316/NY-ESO-1的目的片段序列与NY-ESO-1基因序列完全相同,酶切鉴定结果与预期一致.Western blot法以及免疫荧光检测结果显示,NY-ESO-1在细胞株HXO-RB44中呈强阳性表达.经rhGM-CSF和rhIL-4成功诱导出的外周血DCs,重组质粒转染后其表型分子分别是HLA-DR为42.1％,CD80为54.2％,CD83为39.7％,CD86为94.8％.MTT法检测表明,pDC316/NY-ESO-1质粒转染的DCs诱导的CTL组的增生能力强于未转染组,致敏的DCs与淋巴细胞比例为1∶100时诱导CTL效果最为显著,与未转染组比较差异有统计学意义(P＜0.05),CTL对肿瘤细胞的杀伤作用明显强于未转染组和无DCs组,且效靶比为75:1时杀伤率最强,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 NY-ESO-1质粒转染DCs诱导的CTL对RB细胞具有特异性杀伤作用,为RB免疫治疗提供了一种新的方法.     

腺病毒介导的Slit2及Slit2 ShRNA转染缺氧诱导的人RPE细胞对人脉络膜微血管内皮细胞增殖的影响

目的：观察腺病毒介导的Slit2及Slit2 ShRNA转染缺氧诱导的人视网膜色素上皮（retinal pigment epithelial cells,RPE）细胞对人脉络膜微血管内皮细胞（human choroidal microvascular endothelial cell,HCMEC）增殖的影响,探讨Slit2在脉络膜新生血管中的可能作用,为脉络膜新生血管（choroidal neovascularization,CNV）提供新的治疗思路。方法：体外培养并鉴定人RPE细胞、HCMEC;200 ?滋mol/L 氯化钴建立化学缺氧模型,Transwell小室建立细胞共培养模型;将缺氧的RPE细胞随机分为Slit2组（加入Slit2）、Slit2 ShRNA组（加入Slit2 ShRNA）、空腺病毒组（加入空腺病毒）、缺氧组,12、24、48 h后采用CCK 8（Cell Counting Kit-8,CCK 8）法检测HCMEC的增殖。结果：不同组别存在组间差别,差异均有统计学意义（F=98.122,P=0.000）,不同时间点存在差别（F=3388.913,P=0.000）,组别与时间点的交互作用（F=82.863,P=0.000）。Slit2组吸光度（absorbance,A）值在24 h、48 h均高于其他组（与缺氧组P=0.001,其余P=0.000）,Slit2 ShRNA组A值在24 h、48 h均低于其他组（48 h与缺氧组P=0.003,与空腺病毒组P=0.008,其余P=0.000）。结论：Slit2的高表达可明显促进HCMEC的增殖,沉默RPE细胞中的Slit2的表达后,会明显抑制HCMEC的增殖。     

增强型绿色荧光蛋白与Rb94基因共表达载体的构建和表达

目的 构建增强型绿色荧光蛋白与Rb94基因的真核共表达载体并鉴定其在真核细胞中的表达.方法 用PCR技术对cDNA-Rb质粒中的目的基因片段进行扩增,使用BamHⅠ和SalⅠ进行双酶切,切胶回收DNA片段.将其连接入pEGFP-C1,构建pEGFP-C1/Rb94真核表达载体并再进行酶切鉴定.将重组质粒用脂质体转染法转染至人视网膜母细胞瘤细胞(HXO-Rb44)中,荧光显微镜下观察EGFP在细胞内的表达,Western blot检测Rb蛋白的表达情况,流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果 重组克隆载体内的目的片段序列与Rb94基因序列完全一致.pEGFP-C1/Rb94酶切鉴定结果与预期结果一致.荧光显微镜下观察可见转染后的细胞有荧光出现.Western blot检测结果表明Rb94基因得到了有效表达.流式细胞仪检测结果显示,含Rb94基因的细胞凋亡率为(21.17±0.45)%,明显高于其他组(P<0.05).结论 成功构建EGFP和Rb94真核共表达载体,并可在真核细胞中有效表达,Rb94对视网膜母细胞瘤细胞有明显抑制生长作用.     

小儿眼内炎致盲的可避免性分析

目的小儿眼内炎由于诊断和治疗的困难,致盲率极高,本文预分析其可避免性。方法分析13例临床病例的受伤性质、首诊时间、处理方式与最终结果的关系。结果穿透性眼外伤致眼内炎早期容易漏诊,眼内炎的药物治疗效果差,应该及时作玻璃体手术。结论及时诊断眼内炎,早期玻璃体切除手术是避免致盲的最佳选择。     

眼科学教学中多媒体教学和传统教学的应用分析

多媒体教学是将文本、图形、动画、声音、视频等多种信息有机组合进行视听教学的方法。将这种教学方法与传统教学相结合，能明显提高眼科学教学的质量。本文主要探讨在医学生眼科学教学中利用多媒体教学和传统教学进行教学的体会。     

小梁切除术后无功能滤过泡患者眼压正常的机制探讨

目的初步探讨小梁切除术后无功能滤过泡患者眼压控制正常的机制。方法对小梁切除术后无功能滤过泡,但眼压控制正常的16名患者进行包括一般眼科检查、UBM检查及前房角镜检查,寻找可能的房水排除途径。结果所有16只眼为瘢痕型滤过泡,虹膜周切孔通畅;UBM检查滤过泡区域未发现结膜瓣及巩膜瓣下潜在腔隙;前房角镜检查全部患者内滤过口阻塞、房角开放均>1/2周。结论小梁切除术后无功能滤过泡但眼压控制良好眼可能并不存在特殊的房水引流途径,其原因多是由于术前对患者的手术方式选择不当或手术适应症掌握不当。     

Müller细胞在糖尿病视网膜病变中的研究进展

糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)是糖尿病常见且严重的微血管并发症,近年来对DR发病机制的探讨已成为研究热点。M櫣ller细胞是哺乳动物视网膜主要的神经胶质细胞,贯穿于整个视网膜,参与视网膜的许多病理和生理过程。随着对胶质细胞研究的深入,人们发现M櫣ller细胞对DR的发病机制研究有着重要意义。     

Mǖller细胞在糖尿病视网膜病变中的研究进展

糖尿病视网膜病变（diabetic retinopathy，DR）是糖尿病常见且严重的微血管并发症，近年来对DR发病机制的探讨已成为研究热点。Mǖller细胞是哺乳动物视网膜主要的神经胶质细胞，贯穿于整个视网膜，参与视网膜的许多病理和生理过程。随着对胶质细胞研究的深入，人们发现Mǖller细胞对DR的发病机制研究有着重要意义。