VEGF和PEDF在糖尿病大鼠视网膜脉络膜中的表达

目的:通过免疫组织化学法比较正常大鼠及糖尿病大鼠视网膜、脉络膜组织中VEGF和PEDF的表达情况及相互关系。方法:选取健康雄性Wistar大鼠,随机分成糖尿病组和正常对照组(M0),用链脲佐菌素大剂量一次性腹腔注射诱导1型糖尿病模型。成模后大鼠随机平均分成1mo(M1),2mo(M2),3mo(M3)及5mo(M5)组,免疫组织化学法检测VEGF和PEDF在各组大鼠视网膜及脉络膜的表达。结果:M1大鼠VEGF在视网膜及脉络膜的表达均与M0无明显差别;M2大鼠VEGF在脉络膜有阳性表达(33.3%),在视网膜的表达与M0无明显差别;M3大鼠VEGF在脉络膜有阳性表达(55.6%),在视网膜的表达与M0比较有明显差别(33.3%);M5大鼠VEGF在视网膜及脉络膜阳性表达(88.9%);M1和M2大鼠视网膜PEDF表达与M0比较无明显差别,各组脉络膜均无PEDF表达;M3和M5大鼠视网膜PEDF表达均较M0减弱,且随病程延长表达逐渐减弱(P<0.05),各组脉络膜均无PEDF表达;随着糖尿病病程延长,VEGF/PEDF比值逐渐增大,与M0相比有显著统计学差异(P<0.01)。结论:随着糖尿病病程的延长,VEGF在视网膜及脉络膜的表达均逐渐增强,而PEDF与之相反,在视网膜的表达逐渐减弱,且VEGF/PEDF比值逐渐增大,提示VEGF和PEDF均与糖尿病病程密切相关。     

超声微泡介导野生型P53联合RB94基因转染HXO-Rb44细胞的实验研究

目的探讨超声微泡介导抑癌基因wtp53和Rb94基因转染对视网膜母细胞瘤HXO-Rb44细胞的生长抑制作用。方法以一定能量的超声介导wtp53、Rb94单独或联合转入视网膜母细胞瘤细胞株HXO-Rb44中,RT-PCR证实外源目的基因的表达后,MTT法检测不同基因转染后细胞的生长情况;转染48 h后流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot检测细胞bax蛋白表达。结果 RT-PCR结果显示单独或联合转染两基因的细胞,转入的外源性基因均被表达。与未转染的空白组HXO-Rb44细胞相比,联合转染wtpP53及Rb94基因的细胞生长速率明显降低,细胞增殖受抑制最明显,细胞凋亡率最高,凋亡相关蛋白bax表达量最多。结论超声微泡联合转染wtp53及Rb94基因比单独转染wtp53或Rb94基因在抑制HXO-Rb44细胞生长效应方面效果更强。     

维生素D及其类似物治疗视网膜母细胞瘤的研究进展

视网膜母细胞瘤的维生素D疗法是一种非诱变的化学疗法。本文综述了20a来,国内外许多学者对维生素D及其类似物治疗视网膜母细胞瘤进行的广泛研究,其抗癌作用已经得到肯定。现分别从维生素D及其类似物治疗视网膜母细胞瘤的分子机制、毒副作用及其应用前景方面进行综述。     

玻璃体腔内注射曲安奈德对兔视网膜超微结构的影响

本研究通过观察常规剂量（4mg）围产曲安奈德（triamcin-olone acetonide,TA）兔眼玻璃体腔内注射对视网膜超微结构的影响。     

糖尿病大鼠脉络膜病变超微结构的研究

随着吲哚青绿血管造影(ICGA)和荧光素眼底血管造影(FFA)的开展,人们发现糖尿病视网膜病变(DR)发生的同时脉络膜也有相应的改变,认为糖尿病的视网膜脉络膜病变可能同时存在[1],Saracco等[2]提出了糖尿病脉络膜病变(DC)的概念.我们通过建立糖尿病的动物模型,在不同病程通过透射电子显微镜从组织病理学角度进一步观察糖尿病大鼠发生脉络膜病变的超微结构改变,分析它与视网膜病变之间的关系.     

年龄相关性黄斑变性流行病学研究进展

年龄相关性黄斑变性( age-related macular degeneration, AMD)是一种与年龄相关的致盲性退行性眼底病变,全球约有3000万老年黄斑变性患者,每年约有50万人因此致盲。随着我国经济发展及人口老龄化的加剧, AMD在我国发病率呈逐年上升的趋势,现已跃居我国第三大致盲原因。目前,AMD的发病机制尚不完全明确,可能与氧化应激,炎症免疫反应, VEGF形成及遗传调控密切相关。临床上主要有光动力疗法、药物治疗、放射治疗、激光光凝、黄斑下手术、经瞳孔温热治疗、中医药治疗以及玻璃体腔注射VEGF拮抗剂如雷珠单抗、康柏西普等方法。本文主要就AMD有关的流行病学因素做一系统阐述,并重点就遗传调控方面取得的进展进行综述。     

超声微泡介导Rb94联合野生型p53基因对鼠视网膜母细胞瘤的抑制

背景研究表明,野生型p53（wtp53）和Rb94基因对人视网膜母细胞瘤（RB）的生长均有抑制作用,这2个基因是诱导和维持细胞衰老信号通路中重要的参与基因,因此2个基因联合应用是否对RB的生长抑制效果更好是近来关注的问题。目的观察超声微泡介导Rb94联合wtp53基因转染裸鼠RB后对其凋亡的影响。方法将HXO—Rb44细胞悬液种植至40只雌性SPF级BALB／e裸鼠视网膜下腔建立RB动物模型,造模成功的裸鼠按随机数字表法平均分为模型对照组、wtp53质粒组（含wtp53质粒的微泡悬液）、Rb94质粒组（含Rb94质粒）和wtp53＋Rb94质粒组（联合组）（含wtp53质粒及Rb94质粒）,其中模型对照组不做任何处理,其他3个组造模后第7天均由鼠尾静脉注入含相应基因的微泡悬液后,每天以0．5W／cm^2。超声波辐照眼球4S,间隔24S,循环2次。转染基因超声辐照7d摘除肿瘤组织,利用半定量逆转录PCR（RT—PCR）法检测肿瘤组织中wtp53mRNA及Rb94mRNA的表达;采用Western blot法检测基因转染的肿瘤组织中wtp53及Rb94蛋白的表达;用免疫组织化学法测定肿瘤组织中血管内皮生长因子（VEGF）的表达;采用TUNEL法检测基因转染后肿瘤组织的凋亡情况,计算凋亡指数（AI）。结果HXO-Rb44细胞悬液视网膜下腔注射后移植瘤构建的成功率为80％（32／40）,常规组织病理学检查提示检测样本的细胞异型性明显。基因转染后7d,模型对照组无wtp53mRNA及Rb94mRNA的表达条带;wtp53组wtp53mRNA相对值为0．65±0．07,wtp53＋Rb94组为0．32±0．02,差异有统计学意义（t=11．743,P=0．000）;Rb94组Rb94mRNA相对值为0．42±0．03,wtp53＋Rb94组为0．23±0．03,差异有统计学意义（t=5．041,P=0．001）。wtp53、Rb94或wtp53＋Rb94转染后,各组可见与转染相应的蛋白表达条带,wtp53＋Rb94组可同时检测到wtp53及Rb94蛋白的表达条带,但模型对照组无任何基因反应条带。免疫组织化学染色表明,wtp53＋Rb94组肿瘤细胞中VEGF阳性反应强度明显弱于wtp53组、Rb94组和模型对照组。wtp53＋Rb94组AI为37．35±2．14,明显高于模型对照组的0．46±0．05、wtp53组的5．05±O．80和Rb94组的6．43±1．02,差异均有统计学意义（t=-34．395、-28．206、-26．006,P〈0．01）。结论超声微泡造影剂可介导双基因联合转染RB移植瘤,且Rb94联合wtp53基因对RB细胞的促凋亡作用较单基因转染增强。     

超声造影剂微循环显影对家兔缺血性视神经病变血流动力学改变的研究

目的：探讨超声造影剂在家兔眼部睫状循环的显影并研究颈动脉狭窄与前部缺血性视神经病变（anterior ischemic optic neuropathy,AION）的关系。方法：将36只健康雄性家兔随机分为手术组（20只40眼）、假手术组（8只16眼）、空白对照组（8只16眼）。手术组采取家兔颈动脉部分缝合术建立颈动脉狭窄的动物模型,假手术组行颈动脉临时夹闭,空白组不做任何处理。分别于术后3、7、14、21 d和35 d行颈动脉彩色多普勒超声检查、超声造影剂睫状微循环显影与视神经组织病理学分析。结果：手术组家兔造模成功,术后均出现不同程度颈动脉狭窄。3、7、14、21 d和35 d颈动脉内径值分别为（0.74±0.15）、（0.74±0.15）、（0.81±0.20）、（0.88±0.20） mm和（1.05±0.29） mm,较假手术组与空白对照组低,差异无统计学意义（P<0.05）。超声造影剂在睫状动脉显影良好,手术组单个超声微泡移动速度在各时间点分别为（7.10±2.12）、（8.20±2.39）、（8.11±2.24）、（7.46±2.19） mm/s和（10.11±3.14） mm/s,较假手术组及空白对照组低,差异有统计学意义（P<0.05）。光学显微镜下可见手术组视神经纤维排列紊乱,轴突肿胀呈空泡状,细胞质着色浅,炎性细胞浸润。结论：通过超声造影剂微循环显影可观察到颈动脉狭窄的家兔睫状动脉血流速率下降,并出现视神经的组织病理学改变,提示颈动脉狭窄可以引起缺血性视神经病变。     

气液交换治疗黄斑裂孔视网膜浅脱离

黄斑裂孔视网膜浅脱离是视网膜肿离中较特殊的一类。由于黄斑解剖位置特殊，手术操作过程较为复杂，如常用的颞侧巩膜缩短加冷凝、电凝裂孔、扣带术等。这些手术方法均直接处理了裂孔、术后疤痕形成，视力难以提高。八十年代以来，国际上和国内开始用注气法治疗黄斑裂孔视网膜脱离，如环扎加放液加注气等。但临床上对视网膜局限脱离、视网膜下液少的黄斑裂孔的治疗还存在一定困难。本文报导从用气液交换术治疗黄斑裂孔视网膜浅脱离9例从1989年11月～1990年8月取得较好疗效。