结核分支杆菌五种耐药基因检测的临床应用及评价

目的　检测结核分支杆菌rpoBkatG、rpsL、pncA和embB耐药基因 ,评价其临床应用价值。方法　采用聚合酶链反应 单链构象多态性 (PCR SSCP)分析和药敏试验 (比例法 ) ,了解 10 9例肺结核患者结核分支杆菌耐药情况 ,并分析、比较临床治疗效果。结果　 1/ 2以上的肺结核患者至少耐两种抗结核药物 ,对RFP、INH、SM、PZA和EB总耐药率分别为 80 7%、71 5 %、78 8%、5 7 7%和48 6%。rpoB、katG、rpsL、pncA和embB基因突变率分别为 76%、68%、71%、5 1%和 3 0 %。结核分支杆菌耐药基因突变率与耐药水平联系密切 ,多数结核分支杆菌耐药基因突变易发生在高耐药株 ,也有少数基因突变发生在低耐药株。根据药敏试验和耐药基因检测结果 ,6个月耐多药结核治愈率分别达到 5 4 8%和 62 8% ,治疗效果满意 ,两种方法差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论　耐药基因检测指导治疗是一种新探索 ,PCR SSCP方法敏感、特异 ,可以快速检测结核分支杆菌rpoB、katG、rpsL、pncA和embB耐药基因突变 ,可能会成为临床指导用药的好方法     

老年新鲜与陈旧性重度胸腰椎骨质疏松性压缩骨折椎体成形术疗效比较

目的观察并比较经皮椎体成形术(PVP)治疗老年新鲜与陈旧性重度胸腰椎骨质疏松性压缩骨折的临床疗效,介绍技术操作要点。方法选择自2009-08—2013-04诊治的71例重度胸腰椎骨质疏松性压缩骨折,包括新鲜骨折23例,陈旧骨折48例,在三维CT引导、C型臂X线机透视下分期注射骨水泥行椎体成形术。结果所有患者获得随访5~24个月,平均12.5个月,大部分伤椎疼痛获得不同程度的缓解。无脊髓神经损伤、针道感染等并发症。骨水泥渗漏:新鲜骨折组5例,陈旧骨折组8例;邻椎骨折:新鲜骨折组及陈旧骨折组各有3例;2组手术前后VAS评分比较,差异有统计学意义(P0.05),2组间手术前后VAS评分改善、椎体高度恢复、后凸Cobb角改善比较,差异有统计学意义(P0.05),2组间疼痛缓解有效率、邻椎骨折发生率、骨水泥渗漏发生率比较,差异无统计学意义(P0.05)。术后3 d与末次随访时各指标差异无统计学意义(P0.05)。结论老年重度胸腰椎骨质疏松性压缩骨折采用椎体成形术可取得满意疗效,新鲜骨折的疗效优于陈旧骨折;三维CT定位、透视下分期少量注射骨水泥是手术成功的关键。     

踇趾腓侧皮瓣游离移植修复手指指腹缺损的临床分析

目的探讨踇趾腓侧皮瓣游离移植修复手指指腹缺损的临床效果。方法分析我院2009年1月至2014年6月手足外科收治的80例手指指腹缺损患者临床资料,采用踇趾腓侧皮瓣游离移植修复手指指腹缺损。结果术后3个月手指指腹缺损治疗的优良率100%高于术后1个月手指指腹缺损治疗的优良率75%,P<0.05,差异均有统计学意义。结论踇趾腓侧皮瓣游离移植修复手指指腹缺损,踇趾腓侧皮瓣是最佳皮瓣选择之一,值得临床推广应用。     

经皮空心钉内固定治疗骶髂关节损伤的临床观察

目的对C型臂引导下经皮空心钉内固定治疗骶髂关节骨折脱位疗效进行评价。方法 2008年7月至2011年1月,我科收治13例骶髂关节骨折脱位患者,其中男9例,女4例;年龄21～55岁,平均33岁。按Tile分类,C1型5例,C2型6例,C3型2例,术前行骨牵引一段时间后,在C型臂引导下采用闭合复位经皮空心钉内固定治疗。结果 13例中,复位满意者10例,复位可者3例。随访6～24个月后,13例均获骨性愈合,无血管神经损伤,骶髂关节及下肢关节功能恢复良好。结论术前牵引后,C型臂引导下经皮空心钉内固定治疗骶髂关节骨折脱位是一种简单易行、创伤小、固定可靠的方法。     

脐血CD133^＋细胞体外扩增巨核系祖细胞的研究

本研究探讨脐血CD133^＋（UCB—CD133^＋）细胞体外扩增巨核系祖细胞的能力和最佳收获时间。采用免疫磁珠激活细胞分选系统（MACS）分选UCB—CD133^＋细胞，将纯化的UCB—CD133^＋细胞接种于含TPO、IL-3和SCF的无血清液体培养体系中体外扩增巨核系祖细胞，在培养第7、10和14天进行细胞计数，流式细胞仪检测扩增过程中CD133、CD34、CD41抗原表达的动态变化，并采用半固体法对不同扩增阶段的细胞进行巨核祖细胞集落形成单位（CFU—MK）培养。结果表明：培养至第7天时，UCB—CD133^＋细胞扩增效果最佳，扩增了8、2-1-2．2倍；培养至第14天，细胞总数扩增了116倍；培养至10天时，平均1个CD133^＋细胞所产生的CD133^＋CD41^＋和CD34^＋CD41^＋细胞数最多，分剐为2．5±0．9和2．6±0.5个，所产生的CD41^＋细胞为20．3±5、9个；扩增前后的UCB—CD133^＋细胞均能形成CFU—MK，扩增第10天的UCB—CD133^＋细胞所形成的CFU—MK总数最多，CFU—MK扩增倍数为59．5±11．8倍。巨核细胞免疫组织化学染色显示，扩增后的巨核系细胞多呈幼稚状态，未见血小板形成。结论：UCB—CD133^＋细胞具有较强的体外扩增巨核系祖细胞的能力，培养第10天扩增效能最佳。     

严重急性呼吸综合征患者血清TNF含量动态观察及评价

SARS(严重急性呼吸综合征), 是一种新的烈性传染病, 2003年初短短的半年时间以极强的感染传播力和毒性, 波及世界30余个国家和地区, 已经引起包括我国在内的世界各国高度重视.SARS病原体冠状病毒的靶器官主要是肺脏和免疫系统[1], 它既可以引起机体的免疫反应, 也可以造成宿主免疫抑制或免疫损伤.为了解宿主病程中血清肿瘤坏死因子(TNF)含量的动态变化, 本文对29例SARS患者的TNF含量作了观察并与正常组作了对比, 现将结果报道如下.     

结核分支杆菌耐药基因检测对获得性耐药性的研究

了解不同年龄段肺结核病人的结核分支杆菌获得性耐药情况, 比较两种耐药性检测方法的检测效果, 评价它们的临床应用价值.用药敏试验(绝对浓度法)检测了结核分支杆菌株对RFP、INH、SM、PZA和EMB耐药情况, 采用聚合酶链反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP)检测结核分支杆菌耐药rpoB、katG、 rpsL、pncA和embB基因突变, 用绝对浓度法作药物敏感试验.青年组、中年组和老年组获得性耐药率分别为89.2%、85.3%和67.6%, 耐药基因突变率分别为76.2%、81.3%和63.2%,青年组耐药率和耐多药率显著高于其他组.结核杆菌耐药基因突变与耐药水平联系密切, 多数结核分支杆菌耐药基因突变易发生在高耐药区,也有少数基因突变发生在低耐药区.不规律用药时间越长耐药率越高.不同年龄组获得性耐药情况有差别, 应重视不同年龄组, 特别是青年组耐药率检测.PCR-SSCP是一种快速检测结核杆菌rpoB、katG、rpsL、pncA和embB基因突变敏感、特异的方法.     

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者脉络膜厚度的变化

目的：分析阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(obstructive sleep apnea hypopnea syndrome, OSAHS)患者的脉络膜厚度的改变。

方法：纳入17例初次诊断为OSAHS的患者和31例健康对照者。利用频域光相干断层扫描仪,采用增强深部成像技术,测量黄斑中心凹及距离中心凹上方、下方、鼻侧和颞侧各2mm部位的脉络膜厚度并进行统计学分析。

结果：对照组和OSAHS组中心凹脉络膜厚度分别为323.58±58.63、316.82±46.43μm,差异无统计学意义(t=0.409,P=0.684)。对照组和OSAHS组距中心凹上方2mm脉络膜厚度分别为318.29±56.89、314.29±59.8μm,差异无统计学意义(t=0.229,P=0.820)。对照组和OSAHS组距中心凹下方2mm脉络膜厚度分别为308.42±54.95、291.65±55.37μm,差异无统计学意义(t=1.009,P=0.318)。对照组和OSAHS组距中心凹颞侧2mm脉络膜厚度分别为308.23±54.62、302.76±46.97μm,差异无统计学意义(t=0.347,P=0.730)。对照组和OSAHS组距中心凹鼻侧2mm脉络膜厚度分别为266.23±58.10、277.12±63.99μm,差异无统计学意义(t=-0.599,P=0.552)。分别按睡眠呼吸暂停低通气指数和血氧浓度对OSAHS进行严重程度分级后比较,组内差异均无统计学意义(P>0.05)。

结论：与正常人相比,OSAHS患者的脉络膜厚度略有下降(中心凹鼻侧2mm除外),但差异无统计学意义。对于初次诊断为OSAHS的患者,疾病严重程度对脉络膜厚度无影响。     

二母颗粒对小鼠Lewis肺癌模型的肿瘤血管生成的影响

目的 观察二母颗粒对C57BL/6小鼠体内Lewis肺癌生长、转移以及血管生成的影响及其作用机制.方法 制备C57 BL/6小鼠Lewis肺癌模型,随机分为二母颗粒高、中、低(3、2、1g·kg-1生药)剂量组、环磷酰胺组、沙利度胺组、模型组.分别给予相应药物后,观察各组小鼠的肿瘤生长情况及肺转移发生率,采用免疫组化方法观察瘤内血管内皮细胞生长因子(VEGF)和微血管密度(MVD)的表达.结果 二母颗粒高、中、低剂量组连续ig给药14 d,对小鼠Lewis肺癌的抑瘤率分别为30.80％、10.63％、0.其中,二母颗粒高剂量组的瘤重、抑瘤率、VEGF及MVD的表达与模型组比较均有显著差异(P＜0.05).结论 二母颗粒具有抑制小鼠Lewis肺癌的作用,其作用机制可能与抑制瘤内VEGF和MVD的生成有关.     

人胎盘CD133+细胞具有高增殖潜能集落形成细胞特性

目的 通过对人胎盘CD133+细胞群中高增殖潜能集落形成细胞(HPP-CFC)检测与生物学特性的分析,证明人胎盘存在早期造血干/祖细胞(HSPC). 方法 采用机械法制备人胎盘组织(PT)单细胞悬液,用Histopaque-1007分离出单个核细胞(MNC),经磁式分选(MACS)富集CD133+细胞,培养28 d后观察HPP-CFC集落形成能力,用流式细胞仪(FCM)对分选的细胞组份和HPP-CFC进行表型分析,实验全程用脐带血(UCB)作平行比较分析. 结果 培养28 d后,PT-CD133+与UCB-CD133+细胞组份分别扩增了266和362倍,前者低于后者(P<0.01);PT-CD133+与UCB-CD133+细胞中HPP-CFC分别为(32.4±11.2)/5×103、(17.7±5.7)/5×103,前者形成的HPP-CFC数量明显高于后者(P<0.01);PT.CD133+、UCB-CD133+细胞培养至28 d时,除UCB-CD133+组的CD133+CD34-亚群比例无明显改变外,CD133+CD34+、CD133-CD34+和CD133+CD34-(PT-CD133+组)亚型均比培养前减少. 结论 人胎盘组织CD133+细胞中存在HPP-CFC,说明胎盘CD133+细胞群中存在早期HSPC.