应用实时荧光PCR技术检测HBV YMDD变异

目的　应用YMDD变异荧光PCR检测试剂盒检测乙型肝炎病毒 (hepatitisBvirus,HBV)聚合酶基因区的酪氨酸 蛋氨酸 天门冬氨酸 天门冬氨酸基序 (tyrosine methionine asparticacid asparticacid ,YMDD)变异 ,希望能够替代目前使用的测序方法。方法　对 4 7例血清标本使用荧光PCR技术检测YMDD变异 ,其YMDD变异结果与DNA测序结果进行比较。结果　荧光PCR方法测得YMDD野生株 2 8例 ,变异株 19例 ;与DNA测序结果完全一致 ,符合率为 10 0 %。结论　荧光PCR技术检测YMDD变异具有方便、快速、准确的特点。     

色素上皮细胞衍生因子对脑胶质瘤抑制作用的研究

目的评价重组色素上皮细胞衍生因子(rPEDF)对与胶质瘤有关的血管活性因子、增殖和侵袭的影响。方法采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血管内皮细胞生长因子(VEGF)与血小板反应素-1(TSP-1)的变化;四甲基偶氮唑蓝[3-(4,5-dimthy-2-2thiazoly)2,5-dipheny-2H-tetrazoliunbromide,MTT]法检测胶质瘤细胞增殖率;细胞侵袭实验检测rPEDF抑制胶质瘤细胞侵袭性。结果实验数据显示:A172PEDF组(将rPEDF加入胶质瘤细胞A172中)中VEGF表达量为0·29±0·03,与未加PEDF蛋白的胶质瘤细胞作对照组(A172con组,1·31±0·02)相比,减少4·4倍,(P<0·05),同时TSP-1的表达量A172PEBF组为1585±105·67,与A172con组的,351±20·65相比,表达上调4·5倍(P<0·01);侵袭实验结果表明:胶质瘤细胞穿透数为88·67±3·32明显多于rPEDF处理过的细胞(44·41±13·81,2·0倍),加入促血管生成因子—VEGF后,细胞穿透数仍减少至69·4%(69·42±6·35,P<0·05),表明rPEDF能有效抑制胶质瘤细胞的体外侵袭性,至少部分是在血管生成因子调节的作用下。结论rPEDF是抑制胶质瘤增殖和侵袭的主要因素。     

应用SYBR GreenI荧光聚合酶链反应检测人类白细胞抗原-B27

目的采用SYBRGreenI荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术检测人类白细胞抗原-B27(HLA-B27)。方法对56例风湿科门诊及住院怀疑为强直性脊柱炎(AS)的患者,以HLA-B27的特异引物和内对照β-Globin引物对标本DNA分别进行常规PCR和SYBRGreenI荧光PCR检测,并对HLA-B27阳性DNA进行不同倍数稀释后用两种方法进行检测比较。结果常规PCR检测HLA-B27阳性的样本上具有136bp的条带,所有的阴性和阳性样本都有268bp的β-Globin条带,共有30例患者HLA-B27阳性。SYBRGreenI荧光PCR检测结果显示,阴性标本的熔解曲线图上(86.3±0.5)℃处有β-Globin的Tm峰,HLA-B27阳性的样本在熔解曲线上有(90.2±0.6)℃HLA-B27的Tm峰。两种方法结果符合率达100%。即使1:100稀释的DNA也可用SYBRGreenI荧光PCR检测出结果,而常规PCR只有用原倍DNA才能检测出结果。结论SYBRGreenI荧光PCR法快速、准确、敏感、实时、简单和环保的特点是常规PCR法所没有的,完全能够替代常规PCR法,成为检测HLA-B27的新手段。     

重组凝血活酶试剂与其他两种凝血活酶试剂的比较

目的评价重组凝血活酶试剂的精密度、敏感度和准确性。方法本文采用商品名为“Innovin”的重组凝血活酶试剂，配用IL公司ACL-3000型的自动凝血分析仪，按试剂说明书规定和仪器设定程序测定血浆凝血酶原时间(PT)，并同时用IL公司和国产的PT测定的二种取自动物组织的试剂作对照。对比了“Irmovin”对Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ四种凝血因子的敏感性，又用三种试剂测定了130名健康人和心脏手术后正在服用warfarin的病人53名的PT，结果用回归相关分析法证明服药后的INR的三种结果无显著差异，“Innovin”试剂比Ⅱ。公司及国产取自动物的试剂对Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ四种凝血因子的敏感性高。结论重组凝血活酶试剂将逐步地取代目前沿用的取自动物组织凝血活酶，使凝血酶原时间的标准化又向前近进一步。     

氢醌对作业工人健康的影响

本文报导了氢醌（ＨＱ）生产厂ＨＱ的接触水平以及对工人健康的影响。车间空气中ＨＱ的平均几何浓度为０．２９３ｍｇ／ｍ３，ＴＷＡ为０．２４７ｍｇ／ｍ３，随工艺流程的不同各生产工段空气中ＨＱ浓度不一，以包装工段最高。接触工人呼吸道刺激症状增加，视力和肺功能与对照组相比略有降低，而肝、肾、造血功能无异常改变。     

有关2010年版中国药典大蒜质量标准的几点建议

通过文献综述阐述大蒜的活性成分———蒜氨酸、蒜酶和大蒜辣素及三者之间的关系;介绍国外药典收载大蒜及相关制剂含量测定的指标,简述大蒜素的由来及结构。对2010年版中国药典大蒜质量标准中含量测定的方法提出疑问,并提出修改建议。     

闭锁综合征长期护理的体会

病例摘要患者 ,男性 ,6 8岁 ,于 1998- 0 9- 18晚饭后无原因突然摔倒后出现在左侧肢体运动障碍伴言语不清 ,门诊以“脑干梗塞”收入院 ,做头部ＣＴ除基底结有小梗塞灶外 ,没发现其它异常。入院时检查双瞳孔对光反射 (+) ,双瞳孔 <2ｍｍ ,双眼上、下视正常 ,水平眼球不能运动。双侧角膜反射消失 ,眼球尚可闭合 ,左侧完全性偏瘫 ,右侧尚正常。Ｔ36℃ ,Ｐ6 2次 /ｍｉｎ ,Ｒ16次 /ｍｉｎ ,ＢＰ16 / 12ｋＰａ(14 7/ 90ｍｍＨｇ) ,心电图显示 :窦性心律Ｐ6 4次 /ｍｉｎ ,病人饮酒史 10年 ,在此前 3个月因患丘脑小梗死入院治疗 ,当时头ＣＴ检查双侧…     

脑脊液免疫球蛋白G寡克隆区带的实验室检测标准流程建立和一致性验证

目的:旨在建立脑脊液寡克隆区带（OCB）检测标准流程（SOP）,并验证不同实验室采用该SOP检测脑脊液OCB的一致性。方法:通过启动脑脊液免疫球蛋白G寡克隆区带多中心临床研究（“CNS-OCB”）形成的多中心的SOP,选择国内具有代表性的三家研究型医院神经免疫实验室,采用商业化检测自动化操作系统与OCB试剂盒,采用美国...     

少见暗色真菌Pleurostomophora richardsiae引起脚部真菌感染1例

<正>暗色真菌是一类菌丝和(或)孢子含有黑褐色色素的真菌,普遍存在于自然环境中,以往常常被认为是污染菌,严重者可引起免疫缺陷或免疫健全的宿主中的侵袭性、致命性感染,故其临床意义不容忽视。近年来,少见致病暗色真菌引起的感染也日益增多。下面报道1例老年男性患者的诊疗经过,以期为同行提供参考。该例患者以“反复右下肢皮肤结节4年”入院,