利用pcDNA3．1／TOPOC TA克隆构建ANNEXIN A2基因的真核表达载体

目的克隆人类ANNEXIN A2基因，构建其正义真核表达质粒。方法采用逆转录聚合酶链式反应技术，从人类正常肺组织中扩增出人类ANNEXIN A2基因的完整编码区全长序列。通过DNA重组技术将该基因重组于pcDNA3．1／TOPO TA真核表达载体上，构建出人类ANNEXIN A2基因正义表达质粒。通过DNA测序方法对重组表达质粒进行鉴定。结果通过测序分析证实，构建的重组表达质粒目的基因片段为人类ANNEXIN A2基因的完整编码区1032bp。结论构建真核表达载体的方法快速简便．适于进一步研究基因的细胞生物学作用。     

泛素特异性蛋白酶与肿瘤关系的研究

随着泛素化与肿瘤之间的关系越来越明朗,这一关系的反向调控过程,即去泛素化,最近也开始备受关注.目前认为,去泛素化酶在调控与肿瘤相关的许多途径当中有重要作用.而泛素特异性蛋白酶是去泛素化酶家族中的一个亚家族,与肿瘤发生有着不可替代的联系.该文主要从细胞周期调控、DNA损伤修复、信号通路调控等方面来介绍泛素特异性蛋白酶与肿瘤发生和治疗的关系.     

阿尔茨海默病转基因果蝇模型β淀粉样蛋白对胆碱能突触的毒性影响

目的研究β淀粉样蛋白（Aβ）多肽对阿尔茨海默病（AD）转基因果蝇大脑中胆碱神能经元突触的影响。方法分别建立转Aβ40,Aβ42基因果蝇AD两个模型组,以野生果蝇（canton-s）作为对照组。采用生物素染色和激光共聚焦成像记录投射神经元的形态;通过全细胞膜片钳方法记录各组投射神经元胆碱能的自发突触后电流和微兴奋性突触后电流;检测各组果蝇的嗅觉短期记忆能力。结果与对照组相比较,Aβ42组的自发突触后电流的频率和振幅均有明显降低,差异有统计学意义（P〈0.05）;Aβ42组微兴奋性突触后电流的频率明显下降,差异有统计学意义（P〈0.05）。在巴甫洛夫的嗅觉相关的短期学习记忆测试中,与对照组相比较,Aβ40,Aβ42两组果蝇学习记忆指数均明显降低,差异有统计学意义（P均〈0.05）。结论 Aβ肽对胆碱能突触传递的影响提示,其可能是由Aβ肽引起胆碱能神经元变性和记忆不断下降的可能机制之一。     

子宫内膜异位症中ER-α和ER-β研究进展

雌激素在子宫内膜异位症的发生发展中有重要的作用。过去认为这些雌激素的效果都是通过单一的雌激素受体ER-α(estrogen receptor-α)起作用的。然而，最近一种新形式的雌激素受体ER-β(estrogen receptor-β)的发现，促进关于雌激素对靶器官作用的再研究。本文综述了国际上关于此研究的最新报道，提示了在子宫内膜、腹膜和卵巢异位内膜中ER-α和ER-βmRNA的表达有明显差异，对于深入研究子宫内膜异位症的发生发展，临床生物特性、治疗及预后有重要意义。     

肺腺癌中p16基因外显子2的突变分析

为了解肺腺癌ｐ１６基因外显子２的突变情况，应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）及ＰＣＲ双链ＤＮＡ循环测序技术分析了２２例肺腺癌中的ｐ１６基因，结果显示：２２例肺腺癌中存在２例纯合缺失，３例点突变。其中病例１密码子５６由ＣＴＧ→ＣＡＧ的突变，编码的氨基酸由亮氨酸变为谷氨酰胺；病例１２密码子１２１由ＴＡＣ→ＴＧＣ的突变，编码的氨基酸由酪氨酸变为半胱氨酸；病例１０密码子８０由ＧＡＧ→ＡＡＧ的突变，编码的氨基酸由谷氨酸变为赖氨酸，同时这例密码子７９存在一个由ＣＧＧ→ＡＧＧ的同义突变。另外还发现１例由单碱基缺失导致的移码突变。ｐ１６基因在２２例肺腺癌中纯合缺失频率为９．１％，基因突变频率为２７．３％。可见，多重肿瘤抑制基因ｐ１６与肺腺癌的发生发展密切相关并在其演进过程中起着一定的作用。     

用于表位抗原标记的抗HA高亲和性抗体(3F10)

新的抗HA高亲和性抗体(3F10克隆)现在可与生物素、荧光素(FITC)或辣根过氧化物酶(HRP)有效结合,这些结合物与市售的其他抗HA抗体产生相比,结果更清晰.敏感性更高,特异性更好.由于此抗体具高亲和性,所以用低浓度的抗体就可以获得更好的特异性.另外,抗HA高亲和性抗体结合物使蛋白定位和测定工作简单化,可做一些以前无法进行的试验.     

p53基因网络王国

抑癌基因p53作为多种细胞应激与细胞应答的中间环节，与其上下游的各种调控因子及相关基因共同构成了一个错综复杂的信号传导通路。上游：DNA损伤、缺氧、原癌基因激活、核苷酸衰竭、端粒缩短等因素均可激活p53的功能网络；中游：p53的功能活性受mdm2(mouse double minus2)、p14^ARF(alternative reading frame)、共价修饰、蛋白质与蛋白质的相互作用等多种相互联系又相互制约的因素的调控；下游：p53肩负着介导细胞周期阻滞、促进细胞凋亡、维持基因组稳定、抑制肿瘤血管发生等多种功能使命，在整个机体组织细胞的生长、发育、分化过程中起着举足轻重的作用。因其功能的多样性及与肿瘤发生发展的高度相关性，p53已成为肿瘤发生机制研究及基因治疗的一个重要靶点。因此，作为细胞内信号传递网络的核心之一，深入理解p53基因网络的各个层面将对细胞生长代谢调控研究及肿瘤遗传学研究大有裨益。