传代培养角膜细胞的染色体遗传变异率分析

目的 分析传代培养角膜细胞染色体数目的变异率.方法 选择人角膜上皮细胞(HCE)、牛角膜内皮细胞(BCE)和兔角膜上皮细胞(RCE)细胞,采用直接法制备传代细胞染色体标本,常规Giemsa染色,1 000倍光学显微镜下计数分裂相染色体数目,进行核型分析,统计染色体数目变异情况.结果 HCE染色体众数为56 ～ 65,为超二倍体;BCE染色体众数为27 ～ 34,为亚二倍体;RCE染色体众数为74 ～ 88,为超二倍体.与起源细胞相比,以上3种传代细胞染色体数目均发生了改变.结论 该项核型分析为HCE、BCE和RCE 的功能研究提供了重要的参考信息.     

基于社会接触网络的大规模人群天花传播并行仿真

天花生物恐怖是世界各国面临的重大潜在威胁.本文利用并行仿真的技术手段,研究天花在大规模城市人群中的传播规律并对环形接种和大规模疫苗接种这两种主要的天花疫苗接种策略进行有效性分析,结果表明环形接种措施能够有效控制天花疫情的扩散,在天花疫苗储备不足的情况下可以优先考虑采用该措施.     

去白细胞输血对恶性血液病患者免疫活性细胞的影响

目的：观察应用输血治疗的恶性血液病化疗患者外周血T细胞亚群及NK细胞活性，探讨去白细胞输血对恶性血液病患者免疫活性细胞的影响。方法：将120例化疗期间需要接受输血治疗的恶性血液病患者分为2组：A组59例接受去白细胞输血；B组61例接受常规输血。2组每次的输血量、输血次数及化疗方案基本相同。对2组治疗前后的T细胞及NK细胞活性进行检测，并与对照组进行比较。结果：①恶性血液病患者各项免疫活性细胞表达均低于对照组（P〈0．01）；②治疗前A、B2组免疫活性细胞表达差异无统计学意义，治疗后A组的NK细胞活性明显高于B组（P〈0．01）；A组治疗后CD^3-、CD4^＋、CD4^＋／CD8^＋、NK细胞活性明显高于治疗前（P〈0．05）；③B组发生非溶血性发热反应（NHFTR）率明显高于A组（P〈0．01）。结论：T细胞亚群、NK细胞活性在恶性血液病患者中受到明显抑制；与常规的输血治疗方法相比，去白细胞输血能明显改善恶性血液病患者的细胞免疫功能，尤其是对NK细胞，并能有效预防NHFTR。     

脑型血吸虫病发病危险因素的病例-对照研究

目的 探讨脑型血吸虫病发病的危险因素。 方法 选取1999-2004年安徽省的37例脑型血吸虫病患者,分别与健康者、慢性血吸虫病及急性血吸虫病患者对照,对脑型血吸虫病发病相关的危险因素进行分析。 结果 脑型血吸虫病病例组与健康组的劳动强度、病前体质、病前经济、病前营养等4个因素;与急性血吸虫病组的癫痫史、过敏史、感染度等7个因素;与慢性血吸虫病组的感染度、感染次数、治疗次数等10个因素的差异具有统计学意义（P＜0.05）。3组多因素分析至少有两组相同的因素进入logistic回归模型,差异具有统计学意义的变量分别为感染次数、感染度、癫痫史、过敏史和家庭挫折等5个因素。 结论 血吸虫感染程度、治疗状况是脑型血吸虫病发病的主要危险因素,患者的体质和社会心理因素对该病有一定影响。     

肿瘤坏死因子α对人脐静脉内皮细胞纤溶酶原激活物抑制剂1表达及转录调控的影响

探讨肿瘤坏死因子α对人脐静脉内皮细胞纤溶酶原激活物抑制剂1活性和mRNA表达的影响，以及纤溶酶原激活物抑制剂1基因5’上游序列的调控元件在该基因转录调控中的作用。体外培养人脐静脉内皮细胞，加入不同浓度肿瘤坏死因子α作用不同时间。采用发色底物法测定纤溶酶原激活物抑制剂1活性。Northern印迹分析法测定纤溶酶原激活物抑制剂1 mRNA水平。基因重组技术构建四个含人纤溶酶原激活物抑制剂1基因不同长度5’上游序列的荧光素酶报告基因质粒，瞬时转染进入内皮细胞，并测定荧光素酶的表达情况。运用聚合酶链反应和序列分析法对构建质粒上的三个AP-元件分别进行定点突变。结果发现，不同浓度肿瘤坏死因子α作用人脐静脉内皮细胞后，纤溶酶原激活物抑制剂1活性和mRNA表达量均明显增高；当转染质粒含有纤溶酶原激活物抑制剂1基因上游序列-1509/ 90和-823／ 90时，肿瘤坏死因子α使转染细胞的荧光素酶表达量比对照组明显增高；当转染质粒含有-553／ 90和-47， 90时，肿瘤坏死因子α的诱导作用不明显。在纤溶酶原激活物抑制剂15’上游序列的三个AP-1元件突变后，肿瘤坏死因子α的诱导作用明显降低。结果提示，肿瘤坏死因子α增强血管内皮细胞纤溶酶原激活物抑制剂1活性与mRNA表达；纤溶酶原激活物抑制剂1活性提高与其mRNA表达增加呈正相关；纤溶酶原激活物抑制剂15’上游序列中三个AP-1元件在肿瘤坏死因子α对纤溶酶原激活物抑制剂1诱导中具有重要调控作用。     

Na-K-2Cl转运蛋白基因5′端GT重复序列多态性与新疆哈萨克民族原发性高血压的相关性

目的:探讨研究Na-K-2Cl转运蛋白(NKCC2,SLC12A1,BSC-1)基因GT重复序列多态性与新疆哈萨克族人原发性高血压(EH)的关系。方法:以人群为基础进行病例-对照研究,随机选取新疆牧区30~55岁的哈萨克族牧民303例(EH患者152例,正常对照151例),采用经典的饱和酚/氯仿抽提法提取白细胞基因组DNA,运用荧光标记多聚酶链式反应(PCR)技术、毛细管电泳和Genetic Profiler自动分析软件进行微卫星基因组扫描分析技术,根据片断大小分离等位基因。检测EH患者与正常对照者的NKCC2基因GT重复序列多态性。结果:在所有研究人群中NKCC2基因重复序列存在14种等位基因(A1~A14),扩增长度为210~238 bp,其频率介于0.002~0.281,以扩增长度为224 bp的A9等位基因最为常见,其次为A5和A8,分布符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律,GT重复多态杂合率为0.812,多态信息量为0.803。EH人群NKCC2基因GT重复多态分布与正常人群差异无统计学意义(χ2=16.885,P>0.05)。结论:NKCC2基因5′端GT重复多态性标记与新疆哈萨克民族EH可能不相关。     

经肝动脉化疗栓塞联合经皮微波消融序贯治疗早期肝癌的疗效及预后影响因素

目的：探讨早期肝癌经肝动脉化疗栓塞(TACE)联合经皮微波凝固消融(PMCT)序贯治疗后的临床疗效及预后影响因素。方法2011年1月—2014年4月收集早期肝癌患者66例,先行TACE,5~7 d后在超声引导下行PMCT。分析术前、TACE和联合PMCT治疗后肝功能、甲胎蛋白(AFP)的变化。Kaplan-Meier计算无瘤累积生存率,Chi-square分析影响复发的高危因素,有统计学意义者引入logistic回归多因素分析。结果66例早期肝癌TACE后较术前ALT、TBIL、DBIL显著升高(P<0．01);联合PMCT后较术前AST、ALT、DBIL升高(P<0．01);联合PMCT后与TACE相比,AST升高(P<0．01), TBIL、DBIL降低(P<0．01)。联合PMCT与术前、TACE相比AFP均降低(P<0．01)。本组病例随访期间死亡1例,3年累积生存率98．5%。复发19例,1、2、3年的无瘤累积生存率分别为70．3%、50．8%、41．6%。单因素和多因素分析AFP≥100μg/L、病毒载量≥103拷贝/ml和肿瘤边界不规整是早期肝癌联合治疗后复发的危险因素(P<0．05)。结论 TACE联合PMCT序贯治疗是早期肝癌较理想的治疗方法,TACE后序贯PMCT不会影响肝功能恢复进程,AFP≥100μg/L、病毒载量≥103拷贝/ml和肿瘤边界不规整是早期肝癌TACE联合PMCT序贯治疗后复发的危险因素。     

伴癌与非伴癌胃高级别上皮内瘤变全基因表达谱的比较

目的 比较伴癌患者的胃高级别上皮内瘤变(HGIN)与非伴癌患者的胃HGIN组织全基因表达谱的差异。方法 收集北京协和医院2010年3月至2013年5月间行放大染色胃镜检查的21例患者的标本,胃镜活检组织病理均为HGIN。21例患者均行内镜黏膜下剥离术,病理示10例为HGIN,11例为HGIN伴部分癌变。采用4×44K人全基因表达谱芯片,用非配对t检验和Benjamini-Hochberg假发现率(FDR)校正筛选差异基因,采用GeneSpring GX 12.6进行基因本体(GO)富集分析。结果 伴癌HGIN与非伴癌HGIN组织的全基因表达谱比较,共有差异基因470个(P＜0.05,倍数变化＞2),其中表达上调的基因180个,表达下调的基因290个。上调基因GO富集主要与三酰甘油合成、甘油酯合成、中性脂质合成、甘油醚代谢、有机醚代谢及甘油酯类代谢有关。结论 脂质代谢改变可能是胃癌发生的早期事件。     

不同浓度葡聚糖硫酸钠对小鼠炎症性肠病模型建立及其致病相关免疫因子表达的影响

目的 探讨饮用不同浓度的葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium, DSS)对于建立小鼠炎症性肠病(inflammatory bowel disease, IBD)模型及其致病相关免疫因子表达的影响。方法 雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组和不同浓度的DSS饮用组(3%、5%、7%)。观察小鼠的大便性状,体重和生存时间。饮用后的第6天处死各组小鼠,观察结肠大体形态并评分;取病变处进行石蜡包埋病理切片,苏木素伊红染色并进行病理组织学评分;定量PCR检测各组脾细胞免疫因子表达情况。结果 饮用3%、5%、7%浓度DSS的小鼠在第6天均有不同程度溃疡形成,成模率随着DSS浓度提升而增加,但是小鼠死亡率也相应增加。定量PCR结果表明促炎因子(TNF-α、IFN-γ和IL-17A)的表达水平与DSS浓度成正相关,而抑炎因子(IL-4和IL-10)以及调节性T细胞相关的转录因子Foxp3的表达水平与DSS浓度成负相关关系。结论 给予小鼠5%浓度的DSS溶液饮用有助于高效经济地建立小鼠IBD模型,为进一步研究IBD的发病机理、生物学特性、干预因素等打下了重要基础。