糖基化终产物对人肾小球系膜细胞结缔组织生长因子及纤维连接蛋白基因表达的影响

目的：探讨体外培养条件下糖基化终产物（AGEs）对人肾小球系膜细胞结缔组织生长因子（CTGF）及纤维连接蛋白（FN）基因表达的影响。方法：用不同浓度体外制备的AGEs干预系膜细胞及同一浓度的AGEs干预细胞不同时间。应用RT-PCR检测细胞中CTGF和FN的mRNA水平。结果：随着AGEs干预浓度的增加或干预时间的延长,系膜细胞CTGF和FNmRNA水平与对照组相比显著上升。结论：AGEs可导致人肾小球系膜细胞CTGF和FNmRNA的表达增加,在糖尿病肾病的发生、发展中起一定作用。     

PPARα/γ双激动剂GCP-02对细胞葡萄糖利用?前脂肪细胞分化和细胞活力的影响

目的:研究PPARα/γ双激动剂GCP-02对细胞葡萄糖利用、前脂肪细胞分化和细胞活力的影响.方法:以罗格列酮为对照,观察GCP-02对HepG2细胞和WB-F344细胞活力的影响,对HepG2细胞葡萄糖转运、葡萄糖消耗以及对3T3-L1细胞脂肪分化的影响.结果:在1×10-5mol/L浓度下,GCP-02降低WB-F344细胞活力,对HepG2细胞活力无影响;在不影响细胞活力浓度下,GCP-02增加HepG2细胞葡萄糖消耗,但不影响其葡萄特转运;GCP-02增加3T3-L1细胞的脂肪生成.结论:GCP-02增加HepG2细胞的葡萄糖消耗,促进3T3-L1前脂肪细胞分化,降低WB-F344细胞活力.     

医学硕士研究生主观幸福感与心理健康的现状及影响因素

目的:分析医学硕士研究生主观幸福感与心理健康的现状及影响因素.方法:采用总体幸福感量表和症状自评量表对医学院三个年级237名在读硕士研究生进行心理测验.结果:症状自评量表中仅抑郁一项因子分与幸福总分存在显著负相关(p＜0.05).医学硕士研究生的躯体化、人际关系及敌对三项因子分低于全国常模,差异有统计学意义(p＜0.05).约25.1%医学硕士研究生存在不同程度的心理问题,以强迫、人际关系敏感、抑郁症状较突出.不同年级、年龄、性别、婚姻状况、生源地、专业及不同工作年限对医学硕士研究生主观幸福感的影响差异均无统计学意义(p＞0.05).结论:医学硕士研究生的主观幸福感处于中等偏上水平,医学硕士研究生心理健康水平需要加强提高.     

血清α-L-岩藻糖苷酶活性与乙型肝炎相关性研究

目的探讨血清α-L-岩藻糖苷酶（AFU）活性与非癌性肝脏损害程度的相关性。方法设定乙肝患者肝功能（ALT）正常组、乙肝患者肝功能（ALT）异常1组（40U/L400U/L）、肝硬化组、正常对照组,比较各组血清中AFU水平;分析乙肝患者肝功能（ALT）异常组血清AFU水平与ALT水平相关性;比较接受治疗前后乙肝与肝硬化患者AFU水平的变化。结果乙肝患者肝功能（ALT）正常组、乙肝患者肝功能（ALT）异常1、2组与正常对照组相互间比较差异无显著性（P〉0.05）;乙肝患者肝功能（ALT）异常3组和肝硬化组与正常对照组相互间比较差异有显著性（P〈0.01）;乙肝患者肝功能（ALT）异常1、2组与3组间相互比较差异有显著性（P〈0.01）;乙肝患者血清ALT升高程度与AFU相关性系数为r=0.810,P〈0.001。结论乙肝病人一旦经抗肝炎治疗后,血清ALT活性下降,AFU活性也迅速下降,ALT活性持续不变或上升者,AFU活性也不下降;肝硬化患者血清AFU活性长期升高提示常易发展为肝癌,所以血清AFU活性测定,有助于乙肝和肝硬化患者预测的观察。     

凝聚胺检测Kidd血型系统抗原抗体效果评价

目的 对凝聚胺试剂检测红细胞Kidd系统抗原抗体效果进行综合评价.方法 随机选取40名献血者的血液,同时采用凝聚胺法、抗球蛋白法、盐水法进行红细胞Kidd系统抗原检测,比较3种方法的检测结果及凝集强度.结果 40名献血者中,Jk(a b-)9例,占22.5%,Jk(a-b )14例,占35%,Jk(a b )16例,占42.5%.抗球蛋白与试管法的结果一致率100%,凝聚胺法共漏检了16例,其中Jk(a b-)4例,Jk(a-b )2例,Jk(a b )10例.结论 凝聚胺法检出Kidd系统的抗原抗体能力有限,难以避免Kidd系统不规则抗体导致的输血不良反应.     

HPLC法测定鼻通宁滴剂中木兰脂素的含量

目的:测定鼻通宁滴剂中木兰脂素的含量.方法:采用HPLC法,以十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱:Diamonsil C18(250mm×4.6min,5μm);流动相:乙腈-水(49:51);流速:1.0mL/min;检测波长:278nm.结果:木兰脂素在36.00～84.00μg/mL范围内,浓度与峰面积线性关系良好(r=0.9994).平均回收率为100.84%,RSD为1.32%(n=9),方法的精密度、稳定性及重现性良好.结论:分析方法简便,快速准确,可作为鼻通宁滴剂的质控标准.     

丹酚酸B诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化

目的:体外分离、培养、纯化大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs),并研究中药单体丹酚酸B诱导MSCs向心肌样细胞分化.方法:用贴壁培养法分离、培养、纯化MSCs,免疫荧光法检测细胞抗原CD44和CD34.分别用含5 μmol/L的5-氮胞苷(5-aza)和30 mg/L丹酚酸B的低糖DMEM培养液培养MSCs 24 h后,RT-PCR法检测培养1,7,14和21 d心肌特异性转录因子NKX2.5,GATA-4和心肌特异性蛋白α-actin mRNA的表达,用免疫荧光法检测诱导后α-actin的表达情况.结果:获得纯化的MSCs,免疫荧光检测细胞表面标记CD44呈阳性,CD34呈阴性.诱导后细胞形态逐渐发生变化.RT-PCR显示NKX2.5和GATA-4 mRNA在MSCs有基础性的表达,而分别以5-aza和丹酚酸B处理24 h后,NKX2.5和GATA-4mRNA表达增强,7 d时表达达高峰,以后维持在高水平,与空白对照组相比,有统计学差异(P＜0.01).未诱导的MSCs α-actin mRNA表达呈阴性,丹酚酸B诱导后的第14日,出现α-actin mRNA的表达.结论:用贴壁培养法可获得纯化的MSCs,丹酚酸B可诱导MSCs向心肌样细胞分化.     

正交试验法优选赤芍提取条件

目的:采用正交试验法优选赤芍的最佳提取条件.方法:采用正交设计方法,考察提取次数,溶剂用量,浸泡时间和提取时间对芍药苷含量的影响.结果:最佳提取工艺为A2B1C3D3,即用15倍量的水,浸泡12 h,破碎提取2次,提取9 min.结论:破碎提取法简单、高效,可节约大量能源.     

Detection of HBV and HCV Coinfection by TEM with Au Nanoparticle Gene Probes

Gold(Au) nanoparticle HBV DNA or HCV cDNA gene probes were prepared and were used to detect HBV DNA and HCV RNA extracted from positive serum of patients with HBV and HCV coinfection directly by transmission electron microscopy(TEM).PCR identifying HBV and HCV in serum of patients with HBV and HCV coinfection was established.Alkanethiol-modified oligonucleotide was bound with self-made Au nanoparticles to form nanoparticle HBV DNA or HCV cDNA gene probes through covalent binding of Au-S.HBV DNA and HCV RNA extracted from positive serum of patients with HBV and HCV coinfection was added to the detection system composed of nanoparticle HBV DNA and(or) HCV cDNA gene probes.The results showed that HBV DNA and HCV RNA could be specifically amplified by PCR.The zones of DNA amplification appeared in 431 bp and 323 bp respectively.When HBV DNA and HCV RNA extracted from positive serum of patients with HBV and HCV coinfection were added to the detection system,TEM displayed the nanoparticles self-assembled into large network aggregates.It was concluded that the detection of HBV and HCV coinfection by TEM was convenient and efficient with high specificity and sensitivity.