MAGE-A3抗原肽负载树突状细胞诱导乳腺癌患者免疫应答的研究

目的研究MAGE-A3抗原肽负载对乳腺癌患者树突状细胞(DC)的功能的影响,探讨其是否可以在体外诱导特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)应答.方法体外培养HLA-A2乳腺癌患者外周血来源的DC,并经孵育携带MAGE-A3抗原肽,用以刺激CTL,用3H-TdR渗入法检测抗原肽负载前后DC刺激同种淋巴细胞增殖能力(MLR),并用乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测CTL对靶细胞的杀伤效应.结果DC:T为1:10时,单纯DC组刺激能力显著高于抗原肽负载组DC(DC-P)(P＜0.05),但当DC:T低于1:20时后DC-P组刺激能力显著强于单纯DC组(P＜0.05).DC-P组和单纯DC组所激发的CTL对细胞株MCF-7,Sk-Br-3,MDA-MB-435s的杀伤活性有显著性差异,而对细胞株Raji无显著性差异,DC-P组对细胞株MCF-7,Sk-Br-3,MDA-MB-435s的杀伤活性明显高于对细胞株Raji的杀伤活性.结论负载MAGE-A3抗原肽的DC在体外可以诱导乳腺癌患者特异性的CTL免疫应答,为临床以DC为基础的过继免疫治疗的应用提供理论基础.     

某社区老年人支气管哮喘流行病学调查

目的　了解社区老年人支气管哮喘的患病情况 ,为哮喘防治奠定基础。　方法　采用整群抽样 ,对南海市桂城社区 2 481名 60岁以上老年人进行哮喘的流行病学调查。　结果　确诊老年人哮喘 98例 ,患病率为 3 .95 % (男4.91%、女 2 .92 % ) ,男性高于女性 (P <0 .0 5 ) ;工业区老年人哮喘的患病率高于文化区 (患病率分别为 5 .12 %、3 .2 6% ,P<0 .0 5 ) ;有遗传家族史者 45例 ,占 45 .92 % ;78%的患者发病年龄 >14岁 ;诱发因素前 3位分别是上呼吸道感染、气候变化和刺激性气体 ;合并COPD2 5例 ,占 2 5 .5 1%。　结论　老年人哮喘是不容忽视的疾病 ,需加强对社区哮喘的管理和教育。     

99TCm-RBC显像在下消化道出血诊断中的应用

目的　研究 99TCm-RBC显像诊断下消化道出血的临床价值。方法　对 2 5例下消化道出血患者行 99TCm-RBC显像 ,并与手术及病理检查结果作比较。结果　99TCm-RBC显像诊断下消化道出血阳性率为 80 .0 %,定位诊断率为 68.0 %,特异性为 85 .0 %。结论99TCm-RBC显像可作为下消化道出血诊断及定位的一种有效方法。     

离体肺组织切片的制备和孵育

目的建立一种简便有效的离体肺组织切片孵育方法。方法利用肺组织精细切片技术制备肺组织切片 ,以 0 .5mLKrebs Henseleit(K H)缓冲液作为孵育液 ,在 37℃培养箱内分别孵育 1、2、3、4h ,测定肺片的四甲基偶氮唑盐 (MTT)比色、乳酸脱氢酶 (LDH)释放率和三磷酸腺苷 (ATP)含量 ,以反映肺组织活性。结果肺片在 37℃培养箱内孵育 1、2、3、4h后MTT比色、LDH释放率和ATP含量均无统计学差异 (P >0 .0 5 )。结论应用 0 .5mLKrebs Henseleit(K H)缓冲液作为孵育液、在 37℃培养箱对肺片进行孵育时组织活性没有明显变化 ,可作为一种简便有效的孵育方法用于离体肺片研究     

应用激光显微分离技术在骨肉瘤组织原位筛选噬菌体肽库

目的将激光显微分离(laser capture microdissection, LCM) 技术应用于噬菌体表面呈现肽库的筛选过程,建立一种可以直接在天然组织中筛选肽库的方法。方法将新鲜人骨肉瘤组织块在噬菌体肽库溶液振荡孵育后制成组织冰冻切片,免疫组化染色检测噬菌体在组织中的浸润扩散。改进常规LCM切片处理方法,以冻干法替代酒精/二甲苯法脱水,以期在LCM操作过程中提高切片上噬菌体的存活率。LCM法分离摄取骨肉瘤切片上的肿瘤靶细胞,转染回收这些细胞上特异结合的噬菌体。滴定法检测所筛选的噬菌体对特异性细胞的亲和力。结果利用LCM技术,可以由肿瘤冰冻切片上收集到足够的与特异性噬菌体短肽,应用于噬菌体表面呈现肽库筛选。经过3轮筛选后所获得的噬菌体与人骨肉瘤组织的特异性亲和力提高16倍。结论本研究首次将LCM技术应用于噬菌体表面呈现肽库的筛选,可以使我们直接在新鲜人肿瘤组织中筛选与特定细胞群甚至单个细胞亲合的短肽;同时又避免了天然组织中其他杂质细胞的污染,为研制细胞特异性导向载体提供了一个新的途径。     

改良超滤技术在体外循环中的应用

目的　观察改良动、静脉超滤技术在体外循环 (CPB)中作用及效果。方法　 4 8例病人随机分为两组 ,各 2 4例 ,超滤组于CPB停机后 ,待血液动力学基本稳定时 ,使体内血液经动脉供血管经超滤器超滤后进入右房。对照组不行改良动、静脉超滤。结果　术后输入库血量对照组 5 90ml,超滤组 310ml(P <0 .0 1)。超滤组平均滤出液5 4 0ml,术后血细胞比容、血小板、血浆蛋白、纤维蛋白与超滤前比速度增高 (P <0 .0 1)。结论　改良动、静脉超滤技术有利于术后多余水分排出 ,可减少术后并发症和输血量 ,适用于小体重、血液稀释度大的婴幼儿和长时间CPB者。     

合并异常冠状动脉法洛四联症和右心室双出口一期根治术

目的 总结合并异常冠状动脉的法洛四联症和右心室双出口一期根治术的经验，探讨有关外科技术的改进。方法1995年6月至2002年6月完成该类一期根治术12例，其中2例采取了肺动脉移位、3例在游离的左前降支下加宽右室流出道、5例改变右室切口并在冠状动脉下缝合、2例经肺动脉和右房疏通流出道。结果无手术死亡。随访3个月～6年，无晚期死亡和并发症发生。结论合并异常冠状动脉的法洛四联症和右心室双出口的一期根治手术是可行的，且效果良好，但必须采用适当的外科技术以保护异常的冠状动脉。     

结合计算法和单一酶免法测定血清游离睾酮结果比较

目的　探寻测定血清游离睾酮 (FT)浓度的准确方法。　方法　 12 9例 45岁以上健康男性 ,按年龄分为 4组 ,收集血清标本 -40℃冻存。酶标免疫方法同批测定FT ,同时测定总睾酮 (T)和性激素结合球蛋白 (SHBG)并代入Vermeulen公式计算 :FT =T -2 3 .43FTSHBG -(T -2 3 .43FT) × 10 - 9mol/L。对两种方法测定结果进行统计学比较。　结果　 12 9例标本中酶免法FT为 (46.69± 2 1.79)pmol/L ,计算法为 (3 96.3 0± 3 17.0 4)pmol/L ,t =13 .0 1,P <0 .0 1,差异有非常显著性意义。两种方法测定FT浓度各年龄组间差异均有非常显著性意义 (P <0 .0 1) ;与年龄相关分析差异均有非常显著性意义 (P <0 .0 1) ,相关程度计算法大于酶免法。FT/T平均百分数酶免法为 0 .2 3 % ,计算法为 1.42 %。　结论　结合计算法检测FT浓度较酶免法更科学、正确 ,更适用于老年男子部分性雄激素缺乏综合征 (PADAM )的诊断     

臭氧水对SARS病毒的灭活效果观察

为了观察电解法产生的臭氧水对SARS病毒的灭活效果,采用悬液灭活试验法进行了试验。结果,以臭氧含量为27.73mg/L,作用4min可完全灭活SARS病毒;以臭氧含量为17.82mg/L,作用4min和4.86mg/L作用10min,均可使SARS病毒的灭活率达100％。结论,电解法产生的臭氧水含臭氧量达到4.86mg/L以上,对悬液内SARS病毒具有很强的灭活效果。     

多效蛋白在大肠癌恶性化过程中的作用

目的了解多效蛋白在大肠癌中的表达情况 ,以及对大肠癌恶性化的影响。方法采用RT PCR和免疫组化染色 ,对 2 4例大肠癌组织和 19例大肠癌癌旁组织的多效蛋白mRNA表达情况进行分析。结果 2 4例大肠癌组织和 19例癌旁正常组织中表达多效蛋白mRNA的各有 18例。多效蛋白不但表达在肿瘤细胞 ,还表达在其他间质细胞中。大肠癌组织中多效蛋白的表达明显高于癌旁正常组织 (34%vs.9% ,P <0 0 5 )。 (94 % )大肠癌多效蛋白mRNA主要由内源性多效蛋白转录 ,且表达在肿瘤的 4个分期中 ,而人类内源性逆转录病毒 多效蛋白仅融合转录在Ⅲ、Ⅳ期肿瘤上 (31% )。结论多效蛋白尤其是人类内源性逆转录病毒 多效蛋白与大肠癌的恶性化有关。