我国中医药胃肠动力基础实验方法研究进展

中药在胃肠动力动物基础实验研究,目前主要采用胃排空小肠推进率测定法、胃肠道腔外电桥式应力传感器记录法、胃肠激素测定(胃泌素、胃动素、生长抑素等)、免疫组织化学方法、离体体胃肠平滑肌肌条动力测定、胃肠内压描记法.采用最佳的实验研究方法,对中药的研究和认知具有重要的临床意义.     

A cell-based high-throughput screening assay for Farnesoid X receptor agonists

Objective To develop a high-throughput screening assay for Farnesoid X receptor （FXR） agonists based on mammalian one-hybrid system （a chimera receptor gene system） for the purpose of identifying new lead compounds for dyslipidaemia drug from the chemical library. Methods cDNA encoding the human FXR ligand binding domain （LBD） was amplified by RT-PCR from a human liver total mRNA and fused to the DNA binding domain （DBD） of yeast GAL4 of pBIND to construct a GAL4-FXR （LBD） chimera expression plasmid. Five copies of the GAL4 DNA binding site were synthesized and inserted into upstream of the SV40 promoter of pGL3-promoter vector to construct a reporter plasmid pG5-SV40 Luc. The assay was developed by transient co-transfection with pG5-SV40 Luc reporter plasmid and pBIND-FXR-LBD （189-472） chimera expression plasmid. Results After optimization, CDCA, a FXR natural agonist, could induce expression of the luciferase gene in a dose-dependent manner, and had a signal/noise ratio of 10 and Z＇ factor value of 0.65, Conclusion A stable and sensitive cell-based high-throughput screening model can be used in high-throughput screening for FXR agonists from the synthetic and natural compound library.     

个性化护理干预对妇科恶性肿瘤手术后生活质量的影响

[目的]探讨个性化护理干预对妇科恶性肿瘤手术后生活质量的影响。[方法]将46例在我科因妇科恶性肿瘤手术的患者随机分为实验组和对照组，通过实施个性化护理干预，对两组患者进行SF-36量表和Olson婚姻质量问卷进行测评。[结果]对妇科恶性肿瘤手术后患者进行个性化护理干预后其生活质量明显提高，差异有显著性意义（P〈0．01）。[结论]个性化护理干预能提高妇科恶性肿瘤手术后生活质量。     

肝靶向牛血清白蛋白脂质体的制备及理化性质研究

目的:研制肝靶向牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)脂质体,并研究其理化性质,为蛋白质药物的肝靶向给药提供一种新模型。方法:首先采用逆相蒸发法制备BSA负电荷脂质体,再用O-羧甲基-N-乳糖酰化壳聚糖(O-carboxymethyl N-galactosylated chitosan,Gal-CMCS)修饰,制备肝靶向BSA脂质体,并考察脂质体的形态、粒径、Zeta电位、包封率及稳定性等理化性质。结果:制得的肝靶向BSA脂质体在电镜下呈类圆形,粒径分布均匀,平均粒径为(284.1±5.41)nm,BSA包封率为(34.21±1.73)%,Zeta电位为( 27.1±1.17)mV,4℃下放置3个月粒径和包封率无明显变化。结论:成功制备了肝靶向BSA脂质体,其具有良好的稳定性和较高的药物包封率,可作为蛋白质药物肝靶向给药的一种新模型。     

食管癌术后并发心律失常相关因素的临床分析

目的探讨食管癌术后发生心律失常的相关因素。方法分析2001年5月-2008年2月间734例食管癌术后患者的资料。结果128例发生各种类型心律失常。年龄／〉70岁、术前心律失常、术前合并高血压者、术前经放化疗后尤其术前经同期放化疗后，FEV1／FVC〈70％以及手术时间〉5h，颈部吻合、主动脉弓上吻合，术后低钾、低氧，酸中毒，无镇痛者，其术后发生心律失常的几率显著增加（P〈0．01）。结论食管癌术后心律失常的发生率与患者的年龄、FEV1／FVC〈70％、术前心律失常、术前合并高血压者，术前经放化疗及手术时间〉5h，食管胃吻合的部位，术后低钾、酸中毒、低氧、无镇痛密切相关。     

复发性肝包虫病经完整外囊摘除和内囊摘除术后复发率的比较

目的:通过随访观察来对比肝包虫外膜内外囊完整摘除术与常规内囊摘除术在治疗复发性肝包虫后的复发率,来评价其临床应用价值.方法:对我院8年间(1999 年～2007年)再次入院的复发肝包虫病患者70例,将其分为两组:A组30例:保留外囊的传统术式组;B组40例:外膜内外囊完整摘除术(新术式).对临床观察指标原位复发率进行统计分析.随访时间中位数为36月(3月～96月).结果:外膜内完整外囊摘除术式组原位复发率低于传统术式(P<0.05).结论:外膜内完整外囊摘除术式能降低复发病例的再次手术复发率.     

HIV-1 Rev基因编码蛋白在PEL细胞系中的表达及其表达蛋白抑制HHV-8溶解性周期复制

目的:构建含人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)病毒颗粒蛋白表达调节因子(regulator of virion protein expression, Rev)编码基因的重组真核表达质粒并初步探索Rev基因编码蛋白对人类疱疹病毒8型(HHV-8)溶解性周期复制的影响.方法:构建pRev-Flag重组质粒并进行酶切鉴定和序列测定;将pRev-Flag重组质粒瞬时转染原发性渗出性淋巴瘤细胞系(PEL)BCBL-1细胞和小鼠胚胎成纤维细胞NIH/3T3,采用RT-PCR、Western blot分别从mRNA和蛋白水平检测Rev基因的表达情况;提取瞬时转染pRev-Flag重组质粒的BCBL-1细胞总RNA,进行RT-PCR检测HHV-8次要衣壳蛋白编码基因ORF26 mRNA转录水平.结果:核酸序列分析结果表明,克隆的Rev基因序列与GenBank中已登记的Rev序列100%同源.RT-PCR和Western blot都在Rev预期位置检测到特异性条带.RT-PCR检测显示,Rev基因对编码蛋白能够降低HHV-8 ORF26 mRNA转录水平.结论:成功构建含Rev基因序列的重组质粒并在真核细胞中获得正确表达;初步探索表明Rev蛋白能够抑制HHV-8溶解性周期复制.     

胰岛素抵抗与非酒精性脂肪肝的关系研究

目的:研究胰岛素抵抗与非酒精性脂肪肝发病之间的关系.方法:连续观察体检人群81例,其中非酒精性脂肪肝患者59例,测身高、体重、腰嗣、臀围,计算体质指数(BMI)及腰臀比(WHR),检测空腹血清血糖、胰岛素、总胆固醇、甘油三酯,比较2组人群之间的差异.结果:非酒精性脂肪肝组较对照组BMI、WHR及血甘油三脂更高、胰岛素敏感指数更低,多元Logistic回归分析显示:对非酒精性脂肪肝的发病具有影响的是WHR和胰岛素敏感指数.结论:WHR和胰岛素敏感指数是非酒精性脂肪肝发病的独立影响因素.     

CCR3在哮喘豚鼠模型肺和骨髓中的表达及意义

目的观察哮喘豚鼠肺和骨髓组织嗜酸粒细胞趋化因子受体3（CCR3）及嗜酸粒细胞（EOS）不同时相表达的变化，探讨哮喘发病的可能机制。方法用卵白蛋白（OVA）和生理盐水致敏法制备豚鼠哮喘和对照模型，分为正常对照组（N）及哮喘组（A、B、C、D、E），每组8只，于激发后30min，6h，12h，24h，48h处死，瑞氏染色计数骨髓涂片和外周血涂片中EOS比例，免疫组织化学技术检测骨髓中CCR3的表达；制备豚鼠肺组织病理标本，苏木精-伊红染色，免疫组化检测肺组织中CCR3的表达。结果①哮喘组骨髓和外周CCR3及EOS表达明显增加；②OVA激发后，骨髓和外周CCR3及EOS表达：30min变化不明显，6h，12h达到峰值，24h开始下降，48h恢复正常水平；③骨髓的变化早于外周，CCR3的表达早于EOS的增多，且CCR3和EOS呈线性相关。结论哮喘豚鼠肺组织和骨髓之间存在骨髓EOS细胞到循环再到肺组织的通路，CCR3表达增强，为EOS从骨髓快速募集到肺组织提供了可能。