C基因截短的HBV复制与包装

目的 探讨C基因截短型HBV变异体的复制与包装。方法 采用分子克隆、人工定点突变等技术构建C基因截短型HBV变异体质粒，用脂质体法转染HepG2细胞，提取细胞内及培养上清液中DNA分别进行Southem杂交，PCR及实时定量荧光PCR分析。结果 经DNA测序及酶切鉴定证实C基因截短型HBV质粒载体构建成功；C基因截短型HBV为复制缺损型，与辅助质粒共转染HepG2细胞，可在细胞内及培养上清液中检测到HBV各种DNA构型；DNA定量分析提示C基因截短型HBV的包装效率较野生型HBV提高3～40倍。结论 C基因截短型HBV变异体为复制缺损型，单独转染后不能在肝细胞内包装与复制，但在缺失包装信号ε的相应辅助病毒辅助下可有效复制并包装成子代病毒颗粒分泌到胞外，且包装效率大大提高。     

离心作用测定细胞与材料间的粘附力及其初步应用

目的：介绍一种简单易行的检测细胞与材料间黏附力的方法。方法：本方法的建立基于离心力在转速一定时与半径成正比的原理。医用石膏制备培养皿固定装置，于培养皿底制备材料薄膜（包括有PLGA，PLGA COLI，PLGA COL I FN），待大鼠骨骼肌卫星细胞悬液与其作用一定时间后，一定转速开动离心机。测定未脱落细胞斑的半径R,取均值。结果：上述三种材料表面未脱落大鼠骨骼肌卫星细胞圆斑半径（R）分别为7.96、15.11、26.10mm，三组间有显著性差异。结论：（1）R的变化可反映细胞与材料间粘附力的改变。（2）利用离心作用检测细胞与材料间的粘附力是可行的，尤其适用于同一种细胞与不同材料间粘附力的比较。（3）COL I和FN的使用可以增加大鼠骨骼肌卫星细胞与PLGA间的粘附。     

P-选择素启动子区C-2123G、T-1817C基因多态性的研究

目的研究P-选择素(P-selectin)基因启动子区C-2123G、T-1817C多态性在中国湖北地区健康汉族人群中的分布,同时比较不同种族间基因型及等位基因频率分布差异.方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)的分析方法,检测200名健康者P-selectin基因启动子区C-2123G、T-1817C的基因型并计算其基因型频率及等位基因频率.结果中国湖北地区健康人群P-selectin C-2123G基因各基因型频率:CC型8.0%,CG型40.5%,GG型51.5%;C,G各等位基因频率分别为28.2%,71.8%,这种基因多态性分布在男女间无显著性差异(P＞0.05).与德国和英国比较,发现不同种族间P-selectin C-2123G基因型分布及等位基因频率均存在显著差异(P＜0.001,P＜0.001).P-selectin T-1817C基因各基因型频率:TT型65.5%,TC型28.5%,CC型6.0%;T,C各等位频率分别为79.75%,20.25%,这种基因多态性分布在男女间无显著性差异(P＞0.05).与英国比较,发现不同种族间P-selectin T-2123基因型分布及等位基因频率均存在显著差异(P＜0.001).结论中国湖北地区汉族人群中存在P-selectin启动子区C-2123G、T-1817C基因多态性,这种多态性在同种族男女间无差异,在各族间存在着较大的差异.     

腹主动脉瘤应力模型的建立及其应用

本研究用螺旋CT扫描腹主动脉瘤获得的断层图像合成腹主动脉瘤几何模型，通过设定瘤壁组织生物力学参数和边界条件，使用有限元分析的方法分析腹主动脉瘤瘤壁的应力分布。结果标明，本例腹主动脉瘤应力峰值位于远端分叉部位，瘤体应力峰值位于后壁，均小于瘤壁的承受极限。本研究所得结果对腹主动脉瘤应力模型有助于分析个体化腹主动脉瘤的破裂部位和生长方向，对研究疾病进程提供依据。     

黄芪多糖调节创伤应激小鼠免疫功能的研究

目的采用小鼠截肢应激模型,探讨创伤应激状态下小鼠免疫功能变化及黄芪多糖对应激状态下机体免疫功能影响。方法将50只BALBc小鼠随机分为5组正常对照组(A),每天腹腔注射生理盐水0.5ml只;应激对照组(B),截肢后每天腹腔注射生理盐水0.5ml只;应激 APS高(C)、中(D)、低(E)剂量组,截肢后分别给予APS1000mgkg、500mgkg、250mgkg,生理盐水稀释至0.5ml腹腔注射,每天1次。连续注射3d后,采用免疫组织化学技术检测CD4 、CD8 、cfos蛋白表达,原位杂交检测NFκBmRNA、IL10mRNA表达,计算机图像分析系统定量。结果与A组比较,创伤后72hB组小鼠胸腺、脾脏组织中NFκBmRNA、IL10mRNA表达水平均明显升高(P<0.01);CD4 、CD4 CD8 比值显著减少(P<0.01);cfos抗原表达明显多于正常(P<0.01)。与B组比较,C、D、E组小鼠胸腺、脾脏组织中NFκBmRNA、IL10mRNA的表达受抑(P<0.01);胸腺、脾脏组织中CD4 抗原水平、CD4 CD8 比值升高(P<0.01);胸腺、脾脏组织中cfos抗原水平降低(P<0.01)。与A组比较,C组胸腺、脾脏组织中NFκBmRNA、IL10mRNA的表达,CD4 抗原、CD8 抗原、cfos抗原分布差异无显著性(P>0.05)。结论创伤后小鼠细胞免疫功能明显紊乱;而黄芪多糖体内应用可有效恢复其免疫功能。     

血清淀粉样P成分的DNA结合特性

目的 检测血清淀粉样P成分(SAP)与不同DNA的结合活性并研究SAP与DNA的结合是否有利于此类抗原的清除，探讨它在SLE发生发展中的作用及意义。方法 用亲和层析和凝胶过滤方法自小鼠和人血清中纯化SAP，分别提取来自细菌、质粒、酵母、小鼠淋巴细胞等不同DNA，用DOT-EIA方法检测SAP与它们的结合活性，用巨噬细胞吞噬实验观察SAP与DNA结合后对DNA清除的影响。结果 人和小鼠SAP均与细菌DNA结合最强，其次为质粒、酵母DNA，与淋巴细胞DNA和小牛胸腺DNA的结合较弱，与单链λDNA结合最弱；与来源于活化状态小鼠淋巴细胞DNA的结合力高于非活化状态；SAP与活化淋巴细胞DNA结合后可促进巨噬细胞对DNA的吞噬。结论 SAP与不同DNA结合活性各异。     

急性胰腺炎患者空腹高血糖发生率及其危险因素分析

目的:回顾性分析急性胰腺炎(AP)患者空腹高血糖发生率及其危险因素。方法:收集2018-01—2018-12武汉大学人民医院胰腺外科133例AP且无糖尿病(DM)病史的住院患者病历资料,按照不同性别、年龄、AP临床分型、病因、CT指数评分(CISI)等分组,χ2检验分析各组临床因素与空腹高血糖(FPG≥6.1mmol/L)发生率的关系,多因素二元logistic回归分析空腹高血糖独立危险因素。结果:AP临床分型(χ2=5.494,P=0.019)和CTSI(χ2=6.236,P=0.013)与AP患者空腹高血糖相关(P<0.05)。CTSI≥6分(P=0.015,OR=2.920,95%Cl=1.234—6.905)为AP患者空腹高血糖的独立危险因素(P<0.05)。结论:临床分型中重症+重症及CTSI≥6分的AP患者易发生空腹高血糖,尤其CTSI≥6分是AP后空腹高血糖的独立危险因素,临床应高度关注。     

终板蛋白多糖的变化对颈椎间盘力学性能的影响

目的:通过测定退变颈椎间盘压缩性能的改变,同时观测软骨终板基质蛋白多糖(proteoglycan PG)的变化,为退变的椎间盘显现异常力学特性作一分子机制上的探讨。方法:将24只家兔随机分为对照组和模型组,模型组家兔保持45°低屈曲住5小时/次·天,取C5-6椎间盘进行生物力学测定;同时生化测定椎间盘终板糖胺多糖(glycosaminoglycan,GAG)总量、硫酸软骨素(chongdroitin sulphate,CS)和硫酸角质素(keratan sulphate,KS)比值和透明质酸(hyaluronic acid,HA)含量;总结分析颈椎间盘退变时基质各成分的系统变化及其对椎间盘力学性能的影响。结果:模型组终板抗压强度、断裂时的最大形变、终板基质蛋白多糖总含量、硫酸软骨素/硫酸角质素比值、透明质酸含量都低于对照组(P<0.05),并随造模进程的深入而减小。结论:长时间的应力不均状态,造成椎间盘终板材料力学特性改变;颈椎间盘基质蛋白多糖含量和成分改变是颈椎间盘生物力学性能减退的主要原因之一。     

强光干扰下的眩光评价研究

眩光是影响视觉的一个重要因素，而眩光后人眼的恢复时间则是进行眩光评价的重要标准。目前的眩光研究都是停留在针对普通照度的眩光源的研究背景下。通过对能产生高照度的眩光源照射后的人眼视觉恢复情况的实验研究，得到在强光干扰条件下的眩光影响因素关系。根据实验数据进行人眼恢复时间计算公式的修正，提出一种在强光干扰下对眩光的客观评价方法。通过实验，基本验证了该公式在高照度情况下的有效性和客观性。