己酮可可碱对新生大鼠缺氧缺血性脑病的保护作用

目的探讨己酮可可碱(pentoxifylline,PTX)对新生大鼠缺氧缺血性脑病(hypoxic-ischemicencephalopathy,HIE)脑组织中ATP酶和炎性细胞因子的影响,揭示PTX对大鼠HIE的保护机制。方法7日龄Wistar大鼠80只随机分为假手术组、缺血组、低氧组、HIE模型组和PTX组。缺血72h后测定脑组织中Na+、K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶和Mg2+-ATP酶活性,以及TNF-αI、L-1和TXB2含量。结果缺血组、低氧组和HIE模型组Na+、K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶和Mg2+-ATP酶活性降低(P<0.01),TNF-αI、L-1和TXB2含量升高(P<0.05,P<0.01)。PTX组可显著缓解上述变化(P<0.05,P<0.01)。结论PTX对新生大鼠HIE的保护作用可能与其保护脑组织中ATP酶和降低炎性细胞因子有关。     

哌嗪异黄酮的结构确证

目的确证哌嗪异黄酮的结构。方法采用UV、IR、MS、NMR等波谱技术鉴定结构。结果确证了哌嗪异黄酮的结构。结论首次利用2D-NMR技术完整地确定了哌嗪异黄酮中所有碳氢的信号归属。     

(3S,4S)-3-苄氧羰基氨基-4-羟甲基-2-氧代氮杂环丁烷-1-磺酸四丁基铵氨甲酰化的新方法

目的研究氨甲酰化(3S,4S)-3-苄氧羰基氨基-4-羟甲基-2-氧代氮杂环丁烷-1-磺酸四丁基铵(1)的新方法。方法以化合物1为原料,二氯甲烷为溶剂,经氯磺酰异氰酸酯酰化、亚硫酸钠水溶液脱氯磺酰基,再经阳离子交换树脂得目标化合物(3)。结果所得化合物经1HNMR、IR、旋光和元素分析确证。结论所选方法用于化合物1氨甲酰化较理想。     

2001～2003年浙江省肾综合征出血热监测分析

目的　分析浙江省肾综合征出血热 (HFRS)监测数据 ,提出预防策略。方法　描述流行病学方法分析HFRS疫情 ,调查宿主动物 ,用直接免疫荧光法 (FA)检测HFRS抗原 ,用间接免疫荧光法 (IFA)测特异性IgG抗体。 结果　近 3年来全省HFRS病例总数为 4 2 4 0例 ,死亡 19例 ,发病率为 3 12 / 10万 ,病死率为 0 4 5 %。其中 2 0 0 3年发病数和死亡数与 2 0 0 2年相比分别下降36 76 %和 5 0 0 0 %。 2 0 0 2年比 2 0 0 1年发病下降 2 4 0 0 %。全省HFRS发病仍具有相对集中和稳定的特点 ,主要分布在钱塘江沿岸的浙东、浙西丘陵地带和浙南山区。绍兴、宁波和台州发病最多 ,占全省发病总数的 5 6 30 %。全年均有发病 ,其中 5～ 7月份 (12 76例 )和 11至翌年 1月份(1341例 )发病较多 ,分别占总数的 30 0 9%和 31. 6 3%。发病以 2 0～ 5 0岁人群为主 ,占发病总数的 6 8. 35 %。职业以农民为主 ,占 79 .34%。男女性别比 2 5 :1。病例的临床诊断符合率为8…     

体外静脉-静脉转流全身热疗治疗晚期癌症21例分析

目的探讨体外静脉-静脉转流灌注全身热疗(VV-PISH)对晚期肿瘤的疗效及安全性.方法 21例晚期恶性肿瘤患者在全麻状态下用TEMET 1000型体外循环全身热疗灌注治疗系统,进行全身加温治疗,通过临床观察及随访追踪,初步评估疗效.结果本疗法具有升温、降温平稳、控温简单、深部组织温度均匀的优点;具有明显止痛88.2%(15/17)作用,其杀伤抑制肿瘤有效率为57.1%(PR+SD),半年及1年病灶稳定率为63.2%(15/19)、46.7%(7/15),6个月、1年、1年6个月生存率分别为78.9%(15/19)、66.7%(10/15)、58.3%(7/12),部分患者甚至能达到消灭肿瘤的效果;虽然对重要器官组织(心、肺、肝、肾、脑)及血液有一定的副损伤,但其损伤是轻微和可逆的.结论 VV-PISH是一种安全有效的治疗方法,将为晚期恶性肿瘤病人的治疗带来新的希望.     

二重PCR检测龈下菌斑中齿垢密螺旋体感染及其与牙周炎病变程度的关系

目的 建立龈下菌斑标本中齿垢密螺旋体二重PCR临床快速检测方法,了解齿垢密螺旋体感染与慢性牙周炎病变程度之间的关系。方法 采取158例不同病变程度的慢性牙周炎龈下菌斑标本,用终浓度为1％的Triton X-100 100℃水浴10 min处理标本以制备DNA模板。采用PCR检测标本中齿垢密螺旋体16S rDNA和特征性外膜蛋白基因tdpA。采用卡方检验分析齿垢密螺旋体感染与慢性牙周炎(CP)不同病变程度的关系。结果 85.4％(135/158)标本16S rDNA阳性,77.2％(122/158)tdpA阳性,14.6％(23/158)两者均阴性,未发现tdpA阳性而16S rDNA阴性的标本。重度CP龈下菌斑标本16S rDNA和tdpA检出率均高于中度cP(r2=4.03,5.71;P<0.05),中度CP龈下菌斑标本16S rDNA和tdpA检出率均明显高于轻度(X2=9.32,16.06,P<0.01)。结论 所建立的二重PCR可用于牙周炎龈下标本中齿垢密螺旋体的临床快速诊断,齿垢密螺旋体感染与牙周病变程度密切相关。     

新生隐球菌对立福康唑和氟康唑的体外敏感性实验

目的 了解临床和环境中分离所得的新生隐球菌对立福康唑和氟康唑的体外敏感性。方法 采用美国国家实验室标准委员会(NCCLS)M27-A方案推荐的酵母菌微量稀释法,检测77株来自临床和环境中分离所得新生隐球菌对立福康唑和氟康唑的MIC值。结果 氟康唑、立福康唑的MIC范围分别为2.0～128μg/mL、0.008～0.5μg/mL,前者MIC₅₀、MIC₉₀几何均数值分别为4μg/mL、8μg/mL,后者几何均数值分别为0.125μg/mL、0.25μg/mL。其中,对氟康唑敏感菌株占81.8%(63/77),中度敏感或剂量依赖性敏感菌株占16.9%(13/77),耐药菌株占1.3%(1/77)。中度敏感和耐药的14株菌中,临床分离株占85.7%,尽管在临床菌株与环境分离株间差异无显著性(P>0.05),但仍应引起临床医师重视。结论 虽然部分新生隐球菌对氟康唑出现中度敏感或耐药,但立福康唑对其均具有较好的体外抗菌活性,有望成为治疗隐球菌病药物的又一选择。     

登革热病毒外膜蛋白基因的克隆、表达

目的　在大肠杆菌中表达登革热病毒外膜抗原基因 ,获得能作为检测抗原的重组蛋白。方法　登革热 2型病毒NGC株感染C6/ 36细胞后 ,抽提病毒RNA ,经逆转录和套式PCR扩增出E基因片断 ,扩增片段经酶切、连接、克隆 ,构建重组表达质粒。并转化大肠杆菌DH5α。结果　重组质粒经诱导后表达外膜抗原的部分肽链。经过免疫印迹证实其具有免疫反应性。结论　截断的部分E蛋白基因在大肠杆菌中表达成功 ,重组的蛋白可作为血清学检测抗原使用     

应用快速免疫层析法检测恙虫病特异性IgM、IgG及总抗体

目的　建立快速免疫层析法检测恙虫病特异性IgM、IgG及总抗体 ,并对其敏感性和特异性进行评价。 方法　以胶体金标记纯化的基因工程重组抗原 ,在玻璃纤维上预包被金标记的纯化抗原 (Au -Ag)和鼠IgG ,在硝酸纤维素膜上检测线处包被羊抗人 μ链、羊抗人IgG或重组抗原 ;在对照线处包被羊抗鼠IgG ,组装成检测试纸。在试纸条的玻璃纤维上加待检血清 ,再滴加 2滴反应液。观察金标抗原释放后NC膜上检测线和对照线的反应情况 ,检测线和对照线同时出现红色条带判为阳性 ,仅对照线出现红色条带判为阴性 ,对照线未出现条带为无效试验。结果　间接免疫荧光法IFA检测IgG和金标免疫层析法检测IgM、IgG、总抗体的敏感性分别为 88 1% ,92 3% ,90 9%和 98 6 % ;特异性分别为 96 0 % ,94 7% ,94 7%和93 3%。结论　金标免疫层析法可替代传统方法用于检测恙虫病东方体特异性抗体。     

微孔板双探针杂交法快速鉴别都柏林念珠菌和白念珠菌

目的 建立微孔板双探针杂交法,快速鉴别都柏林念珠菌和白念珠菌,并应用于临床分离株的快速鉴定。方法 利用真菌保守区核糖体基因和可变区内转录间隔区基因为靶序列,应用生物素标记的通用引物进行念珠菌DNA的PCR扩增,并将该PCR产物分别与固定在微孔板上的都柏林念珠菌和白念珠菌特异性探针杂交,经酶联显色反应测其A值。结果 能特异地鉴别白念珠菌和都柏林念珠菌标准菌株。对108株常规培养方法从临床标本分离的白念珠菌检测,结果显示106株菌株仅白念珠菌探针检测阳性,另2株菌株仅都柏林念珠菌探针阳性。结论 微孔板双探针杂交法能快速、特异地鉴别都柏林念珠菌和白念珠菌。