TaqManTM实时荧光PCR快速检测蜡样芽胞杆菌的初步研究

目的：建立实时荧光TaqMan^TM定量检测蜡样芽胞杆菌的快速检测方法，为食品中蜡样芽胞杆菌污染的调查及食物中毒的快速准确定量检测提供手段。方法：通过分析蜡样芽胞杆菌16SrDNA、23SrDNA、16S-23S ITS、gyrB、groEL、cereolysin AB、HBL（hblA、hblC、hblD）、NHE（nheA、nheC、nheD）、bce—T等目的基因，对比所选取的不同目的基因优缺点，最终选择合适的目的基因16S-23SITS进行同源性分析，并根据GenBank公布的蜡样芽胞杆菌16S-23SITS基因的保守序列，用引物与探针专业设计软件自行设计引物和TaqMan^TM探针，并利用硅胶模型^TM 基因组DNA提取法制备DNA标准品，通过对TaqMan^TM实时荧光PCR退火温度、探针浓度、引物浓度、Mg^2＋离子浓度、缓冲液浓度及酶用量等反应条件的优化，初步建立蜡样芽胞杆菌的实时荧光TaqMan^TM,陕速定量检测方法，并利用该方法对模拟样品进行检测。结果：选取的16S-23S ITS基因同源性达到99％以上，特异性好；所有蜡样芽胞杆菌均含有两段16S-23S ITS基因，有利于提高反应的灵敏度。通过对各实验条件的优化，得出蜡样芽胞杆菌TaqMan^TM实时荧光PCR的最佳反应条件，初步建立起实时荧光TaqMan^TM定量检测蜡样芽胞杆菌的快速检测方法，该方法能在3h左右完成整个检测过程。结论：实时荧光TaqMan^TM定量检测法不但灵敏度好，而且特异性高，检测时间短，能提高蜡样芽胞杆菌的检出率和检测准确性，可望应用于蜡样芽胞杆菌食物中毒的快速准确定量诊断。     

重视子癎前期子癎的治疗

子疒间前期、子疒间是导致孕产妇和围生儿病率和死亡率的主要原因。由于病因不明,至今仍然停留在对症治疗水平。因此,该病的治疗问题一直是产科领域中的难点和热点。近来该病病因、发病机制研究的进展为进一步搞好该病的治疗开辟了一些新的思路。目前,对子疒间前期、子疒间的基本治疗原则是解痉、降压、改善脏器灌流量和脏器功能。在临床上诊治病人要从多脏器可能受累角度,作好临床症状监护,及时发现和掌握疾病发展的进程,并及时予以妥善处理,以免发生严重的、危及生命的并发症。在治疗中,以下几个方面提请临床医生高度重视:(1)治疗目的:预…     

人肝癌细胞株VEGF/VEGFR的检测及意义探讨

目的：筛选血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）高表达肝癌细胞株，为进一步研究VEGF在肝癌治疗中的作用提供理论依据。并探讨VEGF受体在肝癌细胞株的表达及意义。方法：ELISA法及Western blot法分别检测人肝癌细胞株培养上清及细胞内VEGF蛋白的表达。免疫细胞化学方法检测VEGFR在人肝癌细胞中的表达。结果：5株肝癌细胞株均见VEGF蛋白表达，其中SMMC-7721的VEGF表达量最高，VEGF特异性受体Fit-1在HepG2、HHCC、SMMC-7721、Bcl-7402见阳性表达，KDR在HepG2、HHCC、Bel-7402、QGY-7701见阳性表达。结论：肝癌细胞株中VEGF表达量不尽一致，VEGF在肝癌发生发展中可能存在自分泌作用方式。     

超导型磁共振冷头的工作原理及维护保养

冷却系统是超导型磁共振正常运行的重要保障,而冷头是磁共振冷却系统的重要组件.本文着重介绍冷头的工作原理、运行方式及其在使用中的日常维护和定期保养.     

生命探测仪电池容量检测电路的设计

介绍了基于bq2050电池容量检测电路的设计，实测结果表明此电池容量检测电路设计合理，实用有效，且精度高、体积小、功耗低，适合生命探测仪使用。     

右旋柠烯对实验性乳腺增生症的影响

目的:观察右旋柠烯(d-limonene, DL)对大鼠乳腺增生及血雌激素和孕激素水平的影响.方法:苯甲酸雌二醇-黄体酮注射复制乳腺增生模型;HE染色观测乳腺组织学改变;放射免疫法检测血雌激素和孕激素水平.结果:右旋柠烯低、中、高剂量均能减少大鼠乳腺小叶数(9.20±2.32、6.90±1.20、6.10±1.37)、小叶腺泡数(8.20±1.75、6.10±2.23、5.10±1.52)和导管上皮层数(5.30±0.95、4.50±1.27、3.10±0.99),与模型组(分别为10.00±1.54、12.91±3.88和6.17±1.59)比较有显著性差异(P<0.01).右旋柠烯高、中剂量亦能降低血雌激素水平(28.35±2.16、25.17±1.25),提高孕激素水平(33.84±2.23、35.39±2.20),与模型组(分别为32.63±0.93, 31.77±1.48)比较差异显著(P<0.01),且对雌激素水平的影响有明显的量效关系.结论:右旋柠烯可抑制大鼠乳腺增生,降低血清雌激素水平、提高孕激素水平可能为其作用机制.     

注射用对氨基水杨酸钠细菌内毒素检验探讨

用<中国药典>2000年版附录细菌内毒素检验法对PAS进行细菌内毒素检测并建立实验方法.实验结果表明用TAL试剂对PAS最大无干扰浓度为5mg/ml,无干扰作用,提示用细菌内毒素检查法检查PAS中的内毒素是可行的.     

西替利嗪凝胶的制备和质量评价

目的:制备西替利嗪凝胶剂,并建立质量控制方法.方法:以卡波姆940为基质制备凝胶,采用紫外分光光度法测定西替利嗪含量,并考察其稳定性.结果:西替利嗪线性范围为6～16 mg·L-1(r=0.996 7),平均回收率为98.23%,RSD为0.69%(n=5),凝胶稳定性良好.结论:该凝胶制备工艺可行,性质稳定.     

Ultrasound-Enhanced Protective Effect of Tetramethylpyrazine via the ROS/HIF-1A Signaling Pathway in an in Vitro Cerebral Ischemia/Reperfusion Injury Model

Reactive oxygen species-induced oxidative stress is an important pathophysiological process during cerebral ischemia/reperfusion (I/R) injury. It has been reported that the protective effect of tetramethylpyrazine (TMP) against cerebral I/R injury can be significantly improved by its combination with ultrasound exposure. However, the molecular mechanisms and signaling pathways underlying the synergistic protective effect remain unclear. In the present work, the damage induced by I/R injury was modeled by glutamate-induced toxicity to pheochromocytoma (PC12) cells. The ultrasound-enhanced protective effect of TMP was systemically investigated by measuring variations in cell viability, cell migration and levels of intracellular reactive oxygen species, the oxidative stress-related protein glutathione, apoptosis-related proteins (caspase-8, -9 and -3), as well as expression of related genes (hypoxia-inducible factor-1a, p53, murine double minute2). The results suggest that the ultrasound-enhanced protective effect of TMP against cerebral I/R injury might act via the reactive oxygen species/hypoxia-inducible factor-1a signaling pathway, and an appropriate ultrasound intensity should be selected to achieve an optimal synergistic neuroprotective effect.     

Self‐initiated use of topical cannabidiol oil for epidermolysis bullosa

Epidermolysis bullosa is a rare blistering skin disorder that is challenging to manage because skin fragility and repeated wound healing cause itching, pain, limited mobility, and recurrent infections. Cannabidiol, an active cannabinoid found in cannabis, is postulated to have antiinflammatory and analgesic effects. We report 3 cases of self‐initiated topical cannabidiol use in patients with epidermolysis bullosa in an observational study. One patient was weaned completely off oral opioid analgesics. All 3 reported faster wound healing, less blistering, and amelioration of pain with cannabidiol use. Although these results demonstrate promise, further randomized, double‐blind clinical trials are necessary to provide scientific evidence of our observed benefits of cannabidiol for the treatment of epidermolysis bullosa.