骨形成蛋白2基因转染的人牙周膜成纤维细胞的骨诱导作用

目的　建立表达骨形成蛋白2 (BMP-2)的人牙周膜成纤维细胞(HPDLFs),观察其体内成骨作用,为牙周缺损修复基因疗法的建立提供实验依据。方法　采用脂质体载体将人BMP-2噬菌粒表达载体pBK-B2转染至 HPDLFs。利用免疫组化ABC法检测转染细胞内BMP-2蛋白的表达,并于无菌条件下将转染细胞注射于裸鼠股部肌肉内,21 d后取材,苏木精-伊红染色观察肌肉组织内骨形成情况。结果　BMP-2基因转染后HPDLFs内有BMP- 2蛋白的表达。在注射BMP-2基因转染细胞的肌肉组织内可见明显的新骨形成。结论　BMP-2基因成功转入HP- DLFs中并得到有效表达,转染BMP-2基因的HPDLFs能够在体内诱导新骨形成。     

不同型Gsa基因缺失体在大肠杆菌中的克隆与表达

在人类的一些肿瘤中已发现存在Ｇｓａ基因突变。本研究室在白血病细胞系的研究中发现了Ｇｓａ基因的３个缺失突变体以及野生型的Ｇｓａ（分别命名为ＧｓａＬ－１,５００ｂｐ;ＧｓａＬ－２,３００ｂｐ,ＧｓａＬ－３,２００ｂｐ和Ｇｓａ－４,１２００ｂｐ）,并已在一些急性白血病患中检测到,为进一步研究这些缺失体的结构、功能和生物学意义,作将克隆了ＧｓａＬ－１,ＧｓａＬ－２和Ｇｓａ－４基因的质粒分别转化到大肠杆菌ＤＨ５ａ中,提取ＤＮＡ,采用特异引物进行ＰＣＲ扩增,获得相应的目的基因,分别将其克隆支ｐＥＴ２２ｂ（＋）表达载体上,丙转化大肠杆菌进行表达。经培养,取菌体行ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳分析,研究结果：３个基因都有相应分子量的蛋白表达,且均以包涵体形式存在。这表明构建的这３个基因确具完整的基因结构,及应的蛋白表达,本研究为进一     

UBE2T通过JAK⁃STAT通路促进甲状腺乳头状癌细胞增殖

目的：探讨泛素结合酶E2T（ubiquitin-binding enzyme E2T,UBE2T）在人甲状腺乳头状癌（papillary thyroid carcino- ma,PTC）中的表达情况及其对患者预后的影响,同时探讨UBE2T在PTC细胞中的功能,旨在识别其可能的调控机制,为未来 PTC的靶向治疗策略提供理论依据。方法：采用癌症基因组图谱（The Cancer Genome Atlas,TCGA）数据库,系统分析UBE2T在 PTC中的表达及其与患者预后的关系。通过Western blot技术检测UBE2T在甲状腺肿瘤组织和癌旁正常组织中的表达。在 PTC细胞系（TPC-1、KTC-1）中进行UBE2T敲减实验,借助CCK-8、平板克隆、划痕和Transwell实验评估细胞增殖、迁移和侵袭能力,并通过Western blot检测相关蛋白水平的变化。结果：TCGA数据库生物信息学分析表明,PTC组织中UBE2T显著升高, 且其表达与患者无疾病间隔、淋巴结转移相关（P ＜0.01）。UBE2T敲减导致TPC-1和KTC-1细胞增殖活力显著下降,同时抑制细胞迁移和侵袭,诱导STAT磷酸化下调。敲减UBE2T的细胞系加入STAT激活剂后,细胞增殖显著提高。结论：敲减UBE2T 能抑制PTC细胞系TPC-1和KTC-1的增殖、迁移和侵袭,UBE2T通过调控JAK-STAT信号通路促进细胞增殖,提示UBE2T有可能成为PTC的治疗靶点。     

游离腹直肌皮瓣在口腔颌面大型缺损Ⅰ期修复中的应用

目的：探讨应用游离腹直肌皮瓣修复口腔颌面部癌术后大型缺损的可行性。方法：对18例口腔颌面部肿瘤切除术后大型缺损即刻游离移植腹直肌皮瓣修复,对临床资料进行分析和总结。结果：随访3～24个月,18例皮瓣完全成活,成活率100％。结论：腹直肌皮瓣游离移植是修复口腔颌面部大型缺损可靠和理想的方法。     

鼠颞下颌关节创伤后感觉神经肽阳性纤维的变化

目的:观察间接创伤后鼠颞下颌关节中感觉神经肽阳性纤维分布及密度的动态变化,探讨感觉神经肽在颞下颌关节疾病中的作用。方法:将42只SD大鼠随机均分为6组,分别在创伤前、创伤后1、3、7、14和28d时处死,灌注同定后取双侧颞下颌关节,脱钙后恒冷切片,ABC法漂染,并对结果进行半定量分析。结果:创伤前鼠颞下颌关节中有广泛而丰富的降钙素基因相关肽和P物质阳性纤维的分布。创伤后两种神经肽阳性纤维的密度均显著降低,分别在创伤后3、1d达到最低值。然后逐渐增加,至28d时达到或超过正常值。结论:创伤后颞下颌关节中感觉神经肽的逆行释放显著增加。它们不仅参与痛觉传导,而且是颞下颌关节病理改变的神经源因素。     

肺炎链球菌所致下呼吸道感染的耐药性分析

目的:调查近期天津市肺炎链球菌下呼吸道感染的耐药情况.方法:对天津市10所医院2000-2002年收治的61例肺炎链球菌所致下呼吸道感染成人患者的细菌培养结果进行回顾性分析,药敏试验采用琼脂纸片扩散法.结果:药敏结果显示,61株肺炎链球菌对青霉素的耐药率为13.1%,头孢噻肟没有耐药菌,其他β-内酰胺类抗生素的耐药率为2.9%～10.0%,红霉素的耐药率为47.1%,左氧氟沙星耐药率为17.8%, 万古霉素没有发现耐药菌.结论:青霉素仍可作为肺炎链球菌所致下呼吸道感染最有效的抗生素,喹诺酮类抗生素耐药率升高应引起高度重视.     

人类免疫缺陷病毒感染与丙型肝炎病毒感染相互影响的研究

目的 探讨人类免疫缺陷病毒(HIV)感染与丙型肝炎病毒(HCV)感染的相互影响.方法 选取180例经输血或曾有偿献血而感染HIV/AIDS的患者为研究对象,同时选取50例本院同期诊治的HCV感染者为HCV组,50例本院健康体检者设为对照组.分析各组肝脏生化功能、CD4+和CD8+细胞计数及β2-微球蛋白(β2-MG)等指标变化.结果 180例HIV感染患者中,合并HCV感染率为89.4％,ALT、AST、A/G与HA各指标在HIV+ HCV组、HIV、HCV及对照组的差异均有统计学意义;CD4+、CD8+的细胞计数与β2-MG在各组有显著统计学差异(P＜0.01).结论 经输血或曾有偿献血而感染HIV的患者HCV感染率较高,HIV/HCV混合感染可能加重肝功能损伤,加速肝纤维化及肝硬化进程.     

上消化道大出血的急诊介入治疗

目的：探讨上消化道大出血急诊介入治疗时机、方法和急诊止血的效果。方法：65例上消化道大出血的患者行介入治疗，根据腹腔造影的表现选用出血动脉的栓塞或行经颈内静脉肝内门体静脉分流（TIPSS）。分析行介入治疗的时机、造影表现、治疗方法及其疗效。结果：65例患者中，行动脉栓塞42例，TIPSS治疗19例，2例继续内科治疗，2例转外科治疗。随访1月，TIPSS治疗后再出血1例，栓塞后再出血2例；介入治疗后无死亡患者；无介入治疗相关并发症。结论：急诊上消化道出血的介入治疗，止血效果好，死亡率低，患者创伤小。     

小鼠白细胞介素-12融合蛋白编码基因的构建与表达研究

目的 构建小鼠白细胞介素－１２的融合基因,并进行初号表达,方法 通过重叠序列引物的设计与多聚酶链反应（ＰＣＲ）技术,将小鼠ＩＬ－１２的４０ｋＰａ多肽链基因与３５ｋＤａ多肽链基因,以甘氨酸接头（Ｇｌｙ４Ｓｃｒ）３序列连接成为晤蛋白编码基因,构建融合蛋白表达载体现,转染小鼠成纤维细胞ＳＶＴ２,表达具有生物学活性的融合蛋白型ＩＬ－１２。结果 构建的小鼠ＩＬ－１２表达载体经测序无突变发生。以Ｇ４１８筛选转