重组腺病毒人内皮抑素的质量标准研究

目的: 建立重组腺病毒人内皮抑素的质量标准和检测方法. 方法: PCR法鉴定腺病毒载体的E2B区和插入基因,琼脂糖凝胶电泳检查重组病毒DNA酶切图谱.分光光度法测定病毒颗粒数,TCID50法测定病毒感染滴度.感染人肝癌细胞HepG2测定插入基因的表达量,感染人血管内皮细胞HM2测定表达产物的生物学活性.病毒的纯度分析采用A260/A280比值和HPLC法进行.采用A549细胞进行复制型腺病毒的检测.结果: 腺病毒载体E2B区和插入基因PCR扩增结果与理论相符,重组病毒DNA的酶切图谱与标准品一致.原液病毒颗粒数为2.4×1012 VP/ml,滴度为1.53×1011 IU/ml,比滴度为6.4% IU/VP;成品病毒颗粒数为1.0×1012 VP/ml,滴度为3.75×1010 IU/ml,比滴度为病3.8% IU/VP.以50 MOI重组腺病毒感染HepG2细胞48 h后培养上清人内皮抑素表达量为332 ng/ml.50 MOI重组腺病毒对血管内皮细胞生长的抑制率为55%.A260/A280为1.29,HPLC纯度为99.7%.复制型腺病毒为≤1RCA/3×1010 VP.其他各项检测指标均符合规定.结论: 建立了重组腺病毒人内皮抑素的质量标准及其检测方法,并用于该产品的质量控制.     

重组人抗HBsAg单链抗体工程菌的中试发酵工艺研究

目的研究表达重组人抗HBsAg单链抗体工程菌的中试发酵工艺。方法首先采用摇瓶培养,对培养基配方、pH值、诱导表达时机和诱导剂量进行优化,确定基本发酵参数,然后在30L发酵罐上进行中试规模发酵培养。结果在摇瓶培养时,发现含有甘油和微量元素等成分的改良培养基效果明显优于LB培养基和2×YT培养基,另外,工程茵的最佳pH值为7.0,最佳诱导时机为对数中期,最佳诱导剂浓度为0.4mmoL/L异丙基-1-硫代-β-呋喃半乳糖,最佳诱导时间为4h,将摇瓶培养确定的关键参数应用到30L发酵罐中,控制溶氧大于30%,进行3批发酵试验,发现发酵产物的湿菌产量可达58-61.9g/L,目的蛋白质表达量可达28.9%-31.2%以上。结论建立了工程菌M15[pQE-scFv]的中试发酵工艺,为进一步开发打下良好基础。     

人源抗HBsAg单链抗体与α干扰素融合蛋白酵母表达载体的构建

目的构建以人HBsAg单链抗体(HBScFv)为导向作用、α干扰素为治疗作用的融合蛋白酵母表达载体pPICZ-αB/ScFv-IFN-α。方法通过重叠PCR构建目的蛋白质基因,再亚克隆到酵母表达载体pPICZαB中,DNA测序后,转化巴氏毕赤酵母宿主菌GS115 ,菌落PCR、高浓度Zeocin抗性筛选鉴定重组酵母,重组酵母经甲醇诱导后,通过SDS PAGE分析鉴定表达产物。结果DNA测序结果显示构建的目的基因片段(HBScFv IFN-α)的序列与原设计序列相符合;菌落PCR结果显示目的基因已整合到酵母菌中;诱导表达后,SDS PAGE结果显示在相对分子质量约4 4 0 0 0处可见目的蛋白质表达带。结论成功构建了抗HBsAg单链抗体与α干扰素融合蛋白酵母表达载体     

异丙酚复合氯胺酮或芬太尼静脉麻醉在胃镜检查中的应用

目的观察异丙酚复合芬太尼或氯胺酮静脉麻醉用于胃镜检查的效果。方法90例行胃镜检查患者随机分为三组：异丙酚组（P组），异丙酚复合芬太尼组（F组）或氯胺酮组（K组）静脉麻醉，每组30例。观察各组异丙酚用量、意识消失时间、停药后清醒时间、清醒后独立离院时间；监测BP、HR、SpO2、术中及术后的不良反应。结果异丙酚用量P组显著多于K、F组。K组意识消失时间短（P〈0．05）；F组清醒时间和离院时间长（P〈0．05）。F组SpO2下降幅度及下降率高（P〈0．01）；P组和F组低血压、心率减慢发生率高于K组（P〈0．05、P〈0．01）。F组术后站立眩晕率高（P〈0．05）。结论异丙酚复合氯胺酮静脉麻醉与单纯异丙酚或复合芬太尼相比，诱导和清醒更加迅速，呼吸循环抑制轻，是胃镜检查安全可行的麻醉方式。     

核磁共振(MRI)伪影干扰的研究和探讨

MRI对神经系统变性疾病、后颅凹病变、心脑血管病变，特别是脊髓系统疾病的诊断，是其他影像所不能替代的。本文研究研讨和解决(MRI)成像的伪影干扰，突出疾病诊断的优点。     

37例新生儿耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌败血症研究

目的 探讨耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)在新生儿败血症中的分布状况、耐药特征，为临床治疗提供参考。方法 按常规培养，应用WalkAway40型仪进行菌种鉴定并对13种抗菌药物进行药敏试验。结果 血培养98株细菌中分离出葡萄球菌78株，其中MRCNS37株(47．44％，37／78)，表皮葡萄球菌16株(43．24％，16／37)，溶血葡萄球菌9株(24.32％，9／37)。MRCNS对12种抗菌药物均有不同程度耐药，未发现耐万古霉素的MRCNS。结论 新生儿MRCNS败血症已属常见，临床治疗较困难，应积极采取措施预防和控制感染。     

广东省惠州市未婚流动人口生育健康现状与需求

目的了解广东省惠州市未婚流动人口生育健康现状与需求。方法采用问卷调查,专题小组访谈、个人深入访谈和知情人访谈相结合的方法,收集相关的资料信息。结果共收回1333份有效问卷,年龄15~34岁,月平均收入100~2750元,每月食宿开支20~2000元,文化程度小学及以下占3.5%(37/1333),初中占52.0%(693/1333);高中、中专、职校占41.7%(556/1333),大专及以上占2.8%(37/1333),住宿形式多种多样,61.7%(822/1333)住单位集体宿舍,自己购房者仅占1.6%(21/1333),19.2%(256/1333)的人与父母交流生育健康问题,69.1%(921/1333)的人在现单位从未接受过生育健康教育,近一个月内有避孕套保护的性生活的比例只占8.4%(112/1333);出现生育健康问题时去医院治疗的比例只占17.9%(238/1333)。结论未婚流动人口的年龄结构年轻,文化程度偏低,居住不稳定,没有保护性的性行为较为多见,生育健康教育和医疗服务供给相对薄弱,需要提高生育健康教育服务和改善他们的生育健康状况。     

体外循环降温期不同氧分压对二尖瓣膜置换患者术后的影响

目的评价体外循环降温期不同的氧分压对二尖瓣置换患者术后的影响。方法75例二尖瓣置换术患者，按体外循环降温末期动脉血氧分压数，分成低氧组、常氧组和高氧组，记录体外循环结束后第1、8、16小时多巴胺用量。术后麻醉清醒时间和呼吸机辅助时间，同时记录患者的年龄、体重、体外循环时间、升主动脉阻断时间和左室射血分数。结果体外循环术后第1小时内，常氧组多巴胺用量明显小于低氧组和高氧组（P〈O．05），术后第8小时，常氧组多巴胺用量明显小于低氧组（P〈O．05）。术后麻醉清醒时间和呼吸机辅助时问各组问无显著性差异。结论二尖瓣置换术体外循环降温期，常氧分压氧合有利于术后早期患者心功能恢复。     

臭氧水消毒器对微生物杀灭效果的试验观察

目的：观察臭氧水消毒器产生臭氧水的杀菌效果。方法：采用悬液定量和载体定量杀菌试验进行检测。结果：该机产生含臭氧4．20mg／L的水溶液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌作用5min的杀灭率均为100％；当菌液中含有10％蛋白胨时，对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌作用5min的杀灭率分别为55．67％、59．48％和37．44％。用消毒液流动浸泡载体定量杀菌试验，含臭氧4．20mg／L的水溶液作用30min对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌的平均杀灭率分别为99．95％、99．99％和96．94％。结论：该臭氧水消毒器产生的臭氧水具有一定消毒效果。     

儿童肺结核支气管肺泡灌洗液Xpert MTB/RIF检测的诊断准确性研究

目的探讨支气管肺泡灌洗液的Xpert MTB/RIF检测对儿童肺结核的诊断价值。方法有疑似活动性结核病的临床症状和体征，行纤维支气管镜检查并留取了支气管肺泡灌洗液的患儿为研究对象。以支气管肺泡灌洗液作为病原学检测标本，分别以病原学诊断活动性结核病和临床诊断活动性结核病为金标准，以Xpert MTB/RIF为待测标准，考察Xpert MTB/RIF对病原学和临床诊断结核的诊断价值。基于样本中结核分枝杆菌（MTB）的Ct值反映所检测样本中MTB的载量；通过对利福平耐药位点的检测，对MTB菌株进行药物敏感性检测。结果符合本文纳入标准的疑似结核病患儿351例，男198例，女153例，年龄（5.9±3.9）岁。肺结核患儿125例，其中病原学诊断结核43例（34.4%），临床诊断结核82例（65.6%）；肺结核合并支气管结核51例（40.8%），单纯肺结核74例（59.2%）；非结核呼吸道感染性疾病226例，肺炎支原体肺炎187例（82.7%），细菌性肺炎39例（17.3%）。Xpert MTB/RIF在病原学诊断和临床诊断结核的敏感度分别为79%(95%CI：63%~89%)和51%(95%CI：40%~62%)，差异有统计学意义（χ2=9.18，P=0.002）；肺结核合并支气管结核的敏感度为80%（66%~90%),单纯肺结核的敏感度47%(35%~59%)；病原学诊断和临床诊断结核、合并支气管结核和单纯肺结核特异度均为100%(95% CI：97.9%~100%)。Xpert MTB/RIF检测病原学诊断结核敏感度高于临床诊断结核，肺结核合并支气管结核敏感度高于单纯肺结核，差异有统计学意义（χ2=13.88，P<0.001）；支气管肺泡灌洗液的MTB核酸检出载量病原学诊断结核高于临床诊断结核，差异有统计学意义（χ2=7.37，P=0.025）。76例Xpert MTB/RIF检测阳性患儿中，利福平耐药2例（2.6%）。结论支气管肺泡灌洗液的Xpert MTB/RIF检测在儿童肺结核诊断中具有较高价值，可在缺乏细菌学诊断证据的临床诊断结核病儿童中发现MTB，具有较高的敏感度，有助于提高儿童结核病病原学检出率。