反相高效液相色谱法测定藜芦生物碱中藜芦定的含量研究

目的:建立测定藜芦生物碱中藜芦定含量的反相高效液相色谱分析方法。方法:采用Diamonsil-C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),以甲醇-0.1M乙酸铵(6040)为流动相,流速1.0ml·min-1,检测波长220nm;柱温30℃。结果:藜芦定在0.96～9.6μg线形关系良好,r=0.9999,藜芦定平均加样回收率为96.4%,RSD为1.6%(n=5)。结论:本方法准确、简便,重现性好。     

当归补血汤相状态的研究

目的:研究当归补血汤提取液的相状态。方法:通过HPLC检测阿魏酸、HPLC-ELSD检测黄芪甲苷、紫外分光光度法检测总多糖、双缩脲法检测蛋白质,并以激光衍射法检测粒径和粒径分布,结合光学现象,描述当归补血汤的相状态。结果:可以测得当归补血汤中阿魏酸、黄芪甲苷、总多糖和蛋白质的含量,提取液中分散相质点的粒径主要分布于50～100 nm和1 000 nm以上,并可以观察到明显的丁达尔现象。结论:当归补血汤含有以均相状态存在的真溶液和非均相状态存在的胶体溶液、混悬液或乳浊液,为混合分散体系。     

同病异证H22肝癌小鼠肿瘤组织细胞凋亡通路基因差异表达的特征

目的:观察昆明种H22肝癌小鼠邪毒壅盛证与气虚证肿瘤组织细胞凋亡通路基因表达特征,探讨中医同病异证发生的物质基础。方法:采用小鼠计量化辨证方法,筛选出瘤早期邪毒壅盛证与气虚证同病异证H22肝癌小鼠,采用Affymetrix GeneChip Mouse Exon 1.0 ST Array检测肿瘤组织细胞凋亡通路相关基因表达的特征。结果:依据KEGG数据库细胞凋亡通路,筛选出芯片数据中匹配的33个基因,发现(1)TNF-α和IL-1依赖的细胞凋亡信号通路总体上不利于邪毒壅盛证小鼠肿瘤细胞的凋亡;(2)IL-3依赖的细胞凋亡信号通路总体上反似有利于邪毒壅盛证小鼠肿瘤细胞凋亡;而(3)线粒体介导的细胞凋亡信号通路,邪毒壅盛证小鼠一致表达下调,提示不利于其细胞凋亡。结论:邪毒壅盛肝癌小鼠肿瘤细胞恶性增殖程度高,可能与线粒体介导的细胞凋亡信号通路系列相关基因表达轻度抑制有关。     

黄芪双向性固体发酵过程中黄芪甲苷的转化研究

目的:研究黄芪双向性固体发酵前后黄芪甲苷的转化。方法:采用HPLC测定法、柱色谱分离法、波谱鉴定技术进行发酵前后的成分变化研究;观察转化产物对血管内皮细胞的抗氧化效应。结果:在黄芪发酵过程中,黄芪甲苷转化形成6-O-β-D-葡萄糖基-环黄芪醇,该转化物具有显著的抗氧化效应。结论:黄芪中有效成分黄芪甲苷经药用真菌(灵芝)双向性固体发酵后发生了生物转化,这一转化具有增效的作用。     

中医药治疗大肠癌研究进展

大肠癌是常见的消化道恶性肿瘤之一,中医药以其整体观、辨证施治等特点,具有减毒增效、改善临床症状、延长生存期、防止复发等作用,在治疗大肠癌中有不可替代的优势。近年中医药在大肠癌治疗方面研究不断深入,总结研究现状,对进一步开展大肠癌中医药治疗研究有积极意义。     

壮药鸡尾木的化学成分及其细胞毒活性

采用硅胶、MCI、ODS柱色谱等色谱技术,从鸡尾木95%乙醇提取物中分离得到14个化合物。经波谱数据分析并结合文献对照,分别鉴定为槲皮素(1)、山柰酚(2)、(+)-儿茶素(3)、秦皮苷(4)、原儿茶酸(5)、没食子酸(6)、没食子酸甲酯(7)、没食子酸乙酯(8)、罗布麻酚A(9)、巴卡亭(10)、酵母甾醇(11)、鞣花酸(12)、3,3’,4’-三甲氧基鞣花酸(13)、N-benzoylL-phenylalaninyl-N-benzoyl-L-phenylalaninate(14)。除化合物6以外,其余化合物均为首次从该植物中分离得到,化合物1,2,6具有一定的抑制肿瘤细胞增殖作用。     

基于网络药理学联合GEO 芯片探讨肾气丸治疗肾小管上皮间质转化的作用机制

目的：基于网络药理学联合GEO 芯片差异基因分析方法探讨肾气丸治疗肾小管上皮间质转化（EMT） 的作用机制,动物实验进一步验证肾气丸治疗EMT 的作用靶点。方法：依据中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP） 和BATMAN-TCM 数据库筛选出肾气丸的活性成分及其对应靶点,利用GEO 数据库获取疾病相关靶点, 通过Cytoscape3.7.0 软件绘制“ 药物-成分-靶点” 网络。使用STRING 数据库与Cytoscape3.7.0 软件绘制核心靶点蛋白相互作用网络,并利用R 语言对核心靶点进行GO 功能和KEGG 通路富集分析。通过实时荧光定量PCR 验证肾气丸对苏氨酸蛋白激酶1（AKT1）、细胞分裂周期蛋白20（CDC20）、表皮生长因子受体（EGFR）、核受体辅激活蛋白1（NCOA1）、细胞周期蛋白B1（CCNB1） mRNA 的影响。结果：共得到肾气丸活性成分229 个,预测作用靶点共1 331 个,与EMT GEO 芯片共同靶点共221 个。肾气丸治疗EMT 主要作用于AKT1、CDC20、EGFR、NCOA1、CCNB1 等靶点。GO 富集分析涉及到营养物质反应、金属离子反应、氧化应激反应等多种生物过程,KEGG 富集分析得到cAMP 信号通路、钙信号通路、甲状腺激素信号通路、催产素信号通路、HIF-1 信号通路等多条信号通路。实时荧光定量PCR 证明肾气丸治疗可升高腺嘌呤造模小鼠肾组织中AKT1 mRNA 表达,降低CDC20、EGFR 和CCNB1 mRNA 表达（P＜0.05）。结论：基于网络药理学方法及实验验证,初步阐明肾气丸可通过调节AKT1、CDC20、EGFR、CCNB1 mRNA 表达来改善EMT,其作用机制可能与cAMP 信号通路、钙信号通路等多条信号通路有关。     

炮制对乌头母根、子根中生物碱类成分的影响与其自身含量差异的比较研究

目的：比较炮制对乌头各部位中生物碱类成分的影响与其自身含量差异。方法：以滴定法测定总生物碱的含量,高效液相色谱法测定三种双酯型生物碱和三种单酯型生物碱的含量。结果：生川乌、生附子中总生物碱的平均含量分别为1．09％,1．33％。生川乌、生附子中三种双酯型生物碱含量总和分别为0．74％,0．96％;生川乌、生附子中三种单酯型生物碱的含量分别为0．032％,0．001％。生川乌炮制后的总生物碱含量为0．55％,三种单酯型生物碱含量为0．125％;附子的两个炮制品,白附片和黑顺片总生物碱含量降低,其含量分别为0．07％和0．05％,白附片、黑顺片中三种单酯型生物碱略有升高,其含量均为0．012％。炮制品中三种双酯型生物碱均未检测到。三种炮制品中总生物碱含量比为,制川乌：白附片：黑顺片＝11∶1．4∶1,三种单酯型生物碱含量比为,制川乌：白附片：黑顺片＝10．5∶1∶1。结论：乌头不同部位中生物碱的含量差异较小,炮制后生物碱类成分含量变化较大。炮制对乌头不同部位中生物碱类成分的影响要大于其自身含量差异。     

中西医结合治疗咳嗽变异性哮喘随机对照试验的质量评价

目的评价中西医结合治疗咳嗽变异性哮喘随机对照试验的质量。方法计算机检索MEDLINE、PumMed、EMbase、Cochrane图书馆、中国生物医学文献数据库、万方数据全文、维普医药信息资源系统、中国数字图书馆CHKD期刊全文数据库等数据库,结合手工检索相关杂志等。采用改良Jadad评分量表和《中医药临床随机对照试验报告规范》评价研究文献的质量。结果共纳入78篇随机对照试验,改良Jadad得分为1.18±0.56,且报告不规范。结论目前中西医结合治疗咳嗽变异性哮喘随机对照试验的方法学和报告质量均低下。     

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??OBJECTIVE To observe the in vivo activity of Ranti-HER, a fully human monoclonal antibody, and combined with the doxorubicin or CPT-11 in established human tumor xenografts in nude mice, and to investigate whether EGFR expression is correlated with this activity. METHODS The overall receptor of EGF was quantified by flow cytometry. The anti-tumor effects of Ranti-HER were evaluated using established, s/c human carcinoma xenografts in nude mice, and the relative growth rate of tumor was used to assess the anti-tumor activity. RESULTS A431 cells showed highly expression of EGFR by flow cytometry, SW620 showed negative expression, and EGFR were expressed positively in HT29 and SW948 cells, but both of them were showed low expression. Ranti-HER(0.25-1.0 mg) could inhibit the tumor growth in human A431 epidermoid carcinoma xenografts and dose-effect relationship was observed; Ranti-HER(1.0 mg) could also inhibit the tumor growth in human SW948 colon carcinoma xenografts, but no anti-tumor effects of Ranti-HER 1.0 mg were observed in human HT29 and SW620 colon carcinoma xenografts. Therapeutic enhancement was observed in the A431 xenografts after treatment with Ranti-HER combined with doxorubicin. For another combination regimens, Ranti-HER and CPT-11 proved to be significantly more efficacious than Ranti-HER monotherpy in SW948 xenografts. CONCLUSION Anti-tumor activity of Ranti-HER are observed in xenografts in athymic nude mice, and the activity of Ranti-HER is correlated with the EGFR expression; synergistic effects are observed when Ranti-HER is combined with chemicals compared to Ranti-HER monotherapy.