生化过程工程与中药现代化

在生化工程20余年的研究工作基础上。结合中药现代化开展了一些技术、材料与设备的研究开发工作。研究植物细胞、组织、器官大规模培养增殖技术，应用于细胞代谢产物、生物转化和人工育种及发根，实现了工厂化生产，并成功研制多种类型的生物反应器；在原有化学工程提取分离技术的基础上，发展了反应分离耦合、微波辅助提取等新技术，实现了高效浸出，并且节能、节水；此外，又发展了包括反胶团萃取、一步三相萃取青霉素、泡沫分级分离、膜分离、高速逆流色谱分离纯化等新技术。高速逆流色谱技术是一种没有固相载体的液一液多级逆流萃取技术，避免了不可逆吸附，已成功用于多种天然产物的分析和分离，作为研究中药指纹图谱的新方法具有很好的精密度和重现性。高效液相色谱、气相色谱、毛细管电泳、质谱等技术在指纹图谱研究中发挥了重要作用。与此同时，还研制了多种分离介质，并在药物的修饰与包埋方面做了大量工作。另外，在海洋药物研究领域，创造了连续培养连续采收的新流程、新技术．进行了转基因藻的培养。用于生产基因工程产品。     

ⅡB和Ⅲ期非小细胞肺癌预后相关因素的COX模型分析

目的 :研究影响ⅡB、ⅢA、ⅢB期非小细胞肺癌 (NSCLC)长期生存的预后因素。方法 :回顾性队列研究 113例ⅡB、ⅢA、ⅢB期NSCLC的病历资料 ,生存曲线用Kaplan Meier法绘制 ,预后价值判断用Logrank检验 ;所有变量均进入COXproportionalhazardregression模型。统计软件为SPSS 10 0 ,取α =0 0 5标准筛选变量。结果 :单因素分析显示 ,性别差异、年龄 >60岁、有无临床症状、有无吸烟史、腺癌或鳞癌等不同的组织类型、病灶直径 >3cm、受累的淋巴结直径 >2cm等对ⅡB、ⅢA、ⅢB期NSCLC患者 5年生存率无明显影响 ,P >0 0 5 ;KPS、有无体质量减轻、临床分期、病灶数目、受累淋巴结分期、组织分化、治疗手段等 7个因子对ⅡB、ⅢA、ⅢB期NSCLC患者生存时间有影响 ,经Logtest检验 ,P <0 0 5。COX模型分析 :唯独KPS、临床分期 2个因子P <0 0 1。结论 :生活质量 (KPS)、有无体质量减轻、临床分期、病灶数目、受累淋巴结分期、组织分化、治疗手段等 7个因子对ⅡB、ⅢA、ⅢB期NSCLC患者生存时间有影响 ,但唯独KPS、临床分期 2个因子具有独立预后价值作用     

喉鳞癌组织中p53蛋白的表达及其临床意义

目的　探讨p5 3蛋白在喉鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义。方法　采用免疫组化技术检测p5 3蛋白在喉鳞癌、癌旁非典型增生组织及正常组织中的表达。结果　p5 3蛋白在喉鳞癌、癌旁和正常组织中阳性表达率分别为 5 3 .7%、3 8.1%和0 ,三者有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;重度非典型增生组织与中、轻度增生、癌旁单纯增生和癌旁正常黏膜 p5 3阳性表达分别有显著性差异 ,表达率分别为 68.8%、2 1.4%、16.7%、8.3 %和 0 ;在肿瘤浸润的前沿部 p5 3阳性表达显著强于浅表部 (P <0 .0 5 ) ;且癌巢边缘 p5 3表达显著强于中央部 (P <0 .0 5 ) ;p5 3阳性表达与喉鳞癌的分化、淋巴结转移有关 (P <0 .0 5 )。 结论　p5 3的过度表达可能为喉鳞癌的早期发生事件 ,癌旁组织中已发生p5 3基因突变的细胞可能是肿瘤复发的根源 ;p5 3表达与喉鳞癌的浸润生长、分化及转移有关 ,为判断预后的 1个有意义指标。     

胆管癌组织中TGF-β1、TβRⅡ及p27kip1蛋白的表达及其意义

目的探讨胆管癌组织中TGF—β1、TβRⅡ及p27^kip1表达的相互关系及它们在胆管癌发生发展中的作用。方法应用免疫组织化学S-P法检测49例肝外胆管癌及8例正常胆，营，管组织中TGF—β1、TβRⅡ、p27^kip1的表达，分析其与临床病理学特征的相关性。结果49例胆管癌组织TGF—p1、TβRⅡ和p27^kip1阳性表达率分别为71．43％（35／49）、36．73％（18／49）和40．82％（20／49），而在正常胆管组织分别为12．50％（1／8）、100．00％（8／8）和87．50％（7／8）；TGF-β1、p27^kip1蛋白表达与胆管癌临床分期及转移相关，Ⅲ～Ⅳ期胆管癌的TβRⅡ阳性表达率（25，81%）明显低于Ⅰ～Ⅱ期（55．56％），P〈0，05；TGF—β1及其Ⅱ型受体的共同表达与胆管癌临床分期相关（P〈0．05）；TβRⅡ与；p27^kip1在胆管痛中的表达呈正相关（γs=0．724，P〈0．01）；p27^kip1表达与TGF—β1及TBRⅡ共同表达相关（P〈0，01）。结论TGF-β1表达增高伴TβRⅡ、p27^kip1表达降低提示胆管癌生物学行为不良；胆管癌中p27^kip1蛋白的调控可能与TGF-β1信号转导有关。     

冠心病体质表型和低密度脂蛋白受体基因Avall 位点多态性关系的研究

目的:探讨CHD(冠心病)体质类型和LDL-R(低密度脂蛋白受体)第13外显子AvaⅡ位点基因多态性的关系.方法:选择符合条件的冠心病中医痰证、瘀证、痰瘀互阻证和非痰非瘀证(其他证型)患者200例,判别患者的体质类型.另选100例健康对照,常规检测所有样品的血脂水平.提取全血DNA,经PCR扩增获取目的片段,用AvaⅡ酶切检测LDL-R基因型,采用SAS软件进行相关性分析.结果:患者的-/ 基因型显著多于对照.TC(总胆固醇)、TG(总甘油三酯)和LDL-C(低密度脂蛋白胆固醇)水平在-/-、-/ 、 / 基因型患者中存在渐升的趋势, / 基因型的TC水平和动脉硬化指数AI显著高于-/-基因型.患者的体质类型以瘀血质、痰湿质和气虚质多见,其中痰湿质和 等位基因,瘀血质与 / 基因型密切相关.结论:瘀血质、痰湿质、气虚质是冠心病的主要体质表型.LDL-R第13外显子AvaⅡ位点 等位基因的携带患者多出现在痰湿质和瘀血质中,纯合子患者的TC和AI升高.这为痰瘀互结的中医病机研究提供了初步证据.     

HSP90在原发性肾病综合征发生和治疗中的意义

【目的】热休克蛋白90（HSP90）是糖皮质激素受体（GR）的伴侣蛋白，本研究探讨HSP90在原发性肾病综合征（INS）发生和糖皮质激素（GC）在治疗中的作用本质。【方法】以INS患者和GC敏感、抵抗的细胞株为研究对象。分析其HSP90、GR表达水平及HSP90的亚细胞分布；并采用HSP90特异性阻断剂研究HSP90对GC反应性的影响。【结果】与对照组比较，INS患者HSP90mRNA表达水平明显增高；而且INS患者中GC抵抗组HSP90 mRNA表达显著高于GC敏感组（P〈0．05）。深入研究发现对照组的HSP90主要分布在细胞浆中，核内仅有微量分布；INS患者的HSP90表达有所增加，并且GC抵抗组与敏感组比较，HSP90明显趋向细胞核内分布（P〈0．001）。用HSP90特异性阻断剂后发现激素敏感细胞株的GC反应性也显著下降（P〈0．01）。【结论】研究表明HSP90的异常表达及亚细胞分布变化可能是导致GC抵抗的重要机制，其一方面可能影响内源性GC对神经-内分泌-免疫网络的功能调节，进而影响机体免疫内环境的稳定，从而参与INS等免疫损伤性疾病的发病；另一方面则可能干预患者对外源性GC的治疗反应，影响临床疗效。     

微阵列技术结合免疫组化分析BRCA2在肺鳞癌中的表达

目的研究BRCA2(乳腺癌易感基因2)在肺鳞癌中的表达情况,以筛选肺鳞癌分子标志物。方法利用cDNA微阵列技术研究6个分期为Ⅰ期的手术切除鳞癌标本的基因表达谱,重点分析BRCA2的表达情况,并利用免疫组化方法测定其蛋白表达水平。结果BRCA2基因在全部6个肺鳞癌标本中均呈下调表达,免疫组化结果显示BRCA2蛋白在20个肺鳞癌标本中表达较低(与20例正常肺组织比较),与cDNA微阵列技术检测结果相符。结论cDNA微阵列技术结合免疫组化可用于肺鳞癌分子标志物的筛选,BRCA2可初步作为肺鳞癌的侯选分子标志物。     

IRS-1的表达和泛素化在KKAy及C57BL/6J小鼠糖尿病发展过程中的意义

目的:探讨胰岛素受体底物-1(IRS-1)蛋白表达和泛素化水平在糖尿病发展过程中的作用。方法:20只8周龄C57BL/6J小鼠随机分为正常对照组(正常饲料喂养,n=10)和胰岛素抵抗组(高脂饲料喂养,n=10)。8周龄KKAy小鼠8只,高脂饲料喂养,为2型糖尿病组。检测各组小鼠体重、血糖和血胰岛素水平。12周后免疫印迹检测各组动物肝组织IRS-1的表达量,同时采用剥离免疫印迹法检测肝组织IRS-1的泛素化水平。结果:高脂喂养12周后C57BL/6J小鼠出现胰岛素抵抗,KKAy小鼠出现肥胖和糖尿病。2型糖尿病组IRS-1的表达显著低于正常对照组和胰岛素抵抗组(P<0.05),而IRS-1的泛素化水平则显著高于胰岛素抵抗组(P<0.05),与对照组无显著性差异(P>0.05)。结论:2型糖尿病时IRS-1的表达下调,IRS-1泛素化水平增加是导致胰岛素信号转导障碍的重要原因。     

分化型甲状腺癌的多因素预后分析

 【目的】探讨影响分化型甲状腺癌（differentiated thyroid carcinoma，DTC）预后的因素。【方法】回顾性收集1985年1月1日至1997年12月31日在中山大学肿瘤防治中心治疗的分化型甲状腺癌581例，对其预后进行单因素和多因素分析。【结果】581例分化型甲状腺癌的5、10、15年生存率分别为93．6％、87．5％和80．6％。单因素分析显示影响分化型甲状腺癌预后的因素有性别、年龄、肿瘤大小、T分期、远处转移、治疗方式、复发和临床病理分期，P〈0．05，病理类型、淋巴结转移对预后无显著性影响，P〉0．05。Cox多因素分析表明T分期、治疗方式和临床病理分期是影响分化型甲状腺癌预后的独立因素。【结论】性别、年龄、肿瘤大小、T分期、复发、远处转移和临床病理分期是影响分化型甲状腺癌预后的主要因素，其中T分期、治疗方式和临床病理分期为独立的预后因素。     

急性胰腺炎294例病因分析

目的：探讨急性胰腺炎的病因，旨在提高对急性胰腺炎发病因素的认识。方法：回顾性分析我院自1996年1月至2005年12月的294例内外科住院急性胰腺炎患者。对其发病因素进行分析。结果：急性胰腺炎发病例数逐年增多，1996年至2000年间病例数占同期内外科住院总人数的0．43％，而2001年至2005年间则上升为0．65％，两者差异有显著性意义（P〈0．05）。病因构成比为胆道疾病57．1％，酗酒13．3％，暴饮暴食11．9％，高脂血症6．1％，其他2．7％，不明原因8．8％。其中不明原因所占比例呈上升趋势。胆道疾病和不明原因相关急性胰腺炎以女性居多（P〈0．05）；高脂血症和酒精相关急性胰腺炎则以男性为主（P〈0．05）。结论：急性胰腺炎常见病因依次为胆道疾病、酗酒、暴饮暴食和高脂血症，病毒感染可能是不明原因急性胰腺炎发病例数增加的一个因素。