人组织因子途径抑制物腺病毒表达系统的构建及体内表达

目的构建携载人组织因子途径抑制物(tissuefactorpathwayinhibitor,TFPI)基因的重组腺病毒载体,为基因治疗提供实验基础。方法利用基因重组技术,将人TFPI基因连接到穿梭质粒pDC316中,然后将腺病毒骨架质粒pBHGlox△E1,3Cre以及重组穿梭质粒pDC316-TFPI共转染293细胞,并在其中发生Cre重组酶介导的位点,特异性重组及腺病毒包装,扩增后进行滴度测定。将包装成功的携带人TFPI基因的重组腺病毒(Ad-TFPI)转染兔颈动脉,并用携带LacZ报告基因的重组腺病毒(Ad-LacZ)作为对照,3d后RT-PCR、ELISA法检测人TFPImRNA、蛋白的表达。结果得到了携带人TFPI基因的重组腺病毒,包装的病毒蚀斑形成单位(plaqueformationunit,PFU)滴度为7.6×1012/L。在Ad-TFPI转染兔颈动脉后3d,RT-PCR法和ELISA法均检测出TFPI表达,Ad-LacZ转染后未测到人TFPI的表达。结论成功构建了人TFPI腺病毒表达载体,为下一步的基因治疗提供了基础。     

西立伐他汀对THP-1细胞CD40和基质金属蛋白酶9表达的影响

通过观察他汀类药物对单核细胞CD4 0和基质金属蛋白酶 9的表达是否存在抑制作用 ,初步探讨他汀类药物可能的非调脂的抗动脉粥样硬化机制。将培养的THP 1细胞中加入不同浓度的西立伐他汀 ,运用RT PCR法检测CD4 0及基质金属蛋白酶 9mRNA ,酶联免疫吸附测定法测定培养基的基质金属蛋白酶 9的浓度。结果发现 ,西立伐他汀抑制THP 1细胞CD4 0和基质金属蛋白酶 9mRNA的表达 ,并呈浓度依赖性。西立伐他汀在 0 .0 1μmol L时 ,CD4 0及基质金属蛋白酶 9的表达无明显降低 ,但在 1和 10 μmol L时 ,CD4 0mRNA的表达下调 5 5 %、89% ,基质金属蛋白酶 9mRNA的表达亦明显下降 (0 .4 5 3± 0 .13比 0 .0 73± 0 .0 1和 0 .0 0 9± 0 .0 0 1)。培养基的基质金属蛋白酶 9浓度在西立伐他汀 1和 10 μmol L时分别从 0 .4 6 9± 0 .0 6降低至 0 .2 4 3± 0 .0 4和 0 .0 39± 0 .0 1(P <0 .0 5 )。结果提示 ,西立伐他汀能抑制THP 1细胞CD4 0表达以及基质金属蛋白酶的表达和分泌 ,提示他汀类药物可减轻动脉粥样斑块炎症 ,防止斑块破裂 ,从而减少急性冠状动脉事件的发生。     

载脂蛋白E基因多态性与老年人群血脂的研究

目的观察载脂蛋白E(ApoE)的遗传多态性与老年人血脂的关系。方法808例受试者,其中脑卒中430例、冠心病167例及对照组211例。采用聚合酶链式反应限制性片段多态性方法检测ApoE基因多态性。结果ApoE4表型携带者的TC、LDLC和ApoB水平显著高于ApoE2表型携带者(P<005),ApoE3/3表型携带者的LDLC水平也高于ApoE2表型携带者(P<005),而ApoE2表型携带者的HDLC水平显著高于ApoE4(P<005),这种作用在男女两性中相似。结论ApoE基因多态性影响老年人群血脂水平,无性别差异。     

结合转录因子激活蛋白1的诱杀性寡聚脱氧核苷酸能抑制血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠心肌成纤维细胞胶原表达

目的探讨结合转录因子激活蛋白1的诱杀性寡聚脱氧核苷酸(AP-1 decoy ODNs)对血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导的心肌成纤维细胞Ⅰ型及Ⅲ型胶原的影响,为高血压心肌纤维化的防治提供理论依据。方法采片用羟脯氨酸比色法测定 SD 大鼠心肌成纤维细胞(CFs)上清胶原合成,分别观察不同浓度的 AP-1 decoy ODNs 对 AngⅡ诱导的 CFs 胶原的合成、Ⅰ型及Ⅲ型 mRNA 的影响。结果①10~(-7) mol/L AngⅡ刺激24 h 后能够显著增加CFs 胶原合成,decoy ODNs 在10～200 nmol/L范围内量-效相关地抑制 CFs 胶原合成,但突变的 decoy ODNs 对CFs 的增殖、胶原合成没有明显的影响。②10~(-7)mol/L Ang Ⅱ作用24 h 后能够显著使 CFs Ⅲ型(1.04±0.07比1.63±0.07,n=3,P<0.05)和Ⅰ型(1.09±0.09比0.20±0.10,n=3,P<0.05)基因表达上调,而100 nmol/L(Ⅰ型0.45±0.05和Ⅲ型0.84±0.04)、200 nmol/L(Ⅰ型0.22±0.06和Ⅲ型0.61±0.07)的 A...     

老年晚发哮喘缓解期患者气道反应性和诱导痰炎性标志物的测定

目的检测缓解期老年晚发哮喘(LOA)患者气道反应性和诱导痰嗜酸细胞、嗜酸细胞阳离子蛋白(ECP)和白介素-5(IL-5)水平,探讨其临床意义。方法选择58例缓解期 LOA 患者,测定其气道反应性,并分别采用瑞氏染色、荧光免疫法和酶联免疫吸附试验检测诱导痰中嗜酸细胞数量、ECP 和 IL-5水平;选择25例急性发作期 LOA 患者和15例健康老年人作为对照。结果 58例缓解期 LOA 患者中,49例(84.5%)支气管激发试验阳性,9例(15.5%)阴性。缓解期 LOA 组诱导痰中嗜酸细胞数量[(9.3±3.1)%]、ECP[(144.2±68.1)μg/L]和 IL-5水平[(20.3±6.3)μg/L]显著低于急性发作期 LOA 组[(21.1±9.8)%、(399.3±172.5)μg/L 和(50.6±10.7)μg/L,P<0.01],但显著高于健康老年组[(1.3±0.7)%、(48.7±21.9)μg/L 和(10.3±3.2)μg/L,P<0.01]。气道反应性增高组患者诱导痰中嗜酸细胞数量[(12.7±3.6)%]、ECP[(171.3±69.8)μg/L]和 IL-5水平[(23.6±8.5)μg/L]显著高于气道反应性正常组[(3.1±1.3)%、(52.7±21.1)μg/L 和(13.7±4.1)μg/L,P<0.01]。结论缓解期 LOA 患者多数存在气道高反应性且气道炎症持续存在,测定患者气道反应性和诱导痰中炎性标志物有助于指导缓解期治疗。     

高校中老年教职工体检结果及健康对策

目的了解高校中老年教职工的健康状况。方法2013年以来在我院参加体检的教职工中40岁以上中老年人共936名,将他们的体检资料进行统计分析。结果发病率居前10位的依次是高血脂、心电图异常、高血压、高血糖、超重／肥胖、肾功能异常、脂肪肝、肝胆结石和囊肿、前列腺肥大、肝功能异常。结论应重视高校中老年群体的健康,积极采取干预对策,加强健康教育,同时进行生活和临床干预。     

影响COPD患者长期家庭氧疗依从性的多元 Logistic分析

目的：探讨影响慢性阻塞性肺疾病（ chronic obstructive pulmonary disease,COPD）患者长期家庭氧疗（long-term oxgen treatment,LTOT）依从性的相关因素。方法将290例在我院门诊及住院部接受治疗的 COPD 患者作为研究对象,采用问卷调查表形式调查 COPD 患者 LTOT 依从性状况,并对患者的相关资料进行单因素方差分析及多元 Logistic 分析。结果影响 COPD 进行 LTOT 依从性的因素有患者的文化程度、家庭经济状况、吸氧指导、家庭自我感知支持程度。结论文化程度、家庭经济状况、吸氧指导及家庭自我感知支持程度为影响 COPD 患者进行长期家庭氧疗依从性的关键因素。     

探索全氟辛烷磺酸对HAPI小胶质细胞炎症反应的影响

目的：探讨全氟辛烷磺酸(perfluorooctane sulfonate,PFOS)对HAPI小胶质细胞的毒性反应及作用机制。方法：用20 nmol/L PFOS处理HAPI小胶质细胞6、12 h后;采用细胞免疫荧光检测活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)的表达;酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-alpha, TNF-α)的分泌量。结果：细胞免疫荧光显示 HAPI小胶质细胞在PFOS处理后,ROS的表达显著增加(P＜0.05);ELISA检测显示TNF-α的分泌量增加并达到(81.00±2.38) pg/mL,而对照组TNF-α为(22.00±1.63) pg/mL。结论：PFOS可以引起HAPI小胶质细胞产生氧化应激并分泌TNF-α。     

利用Oracle11gDataGuard实现HIS系统高可用性

医院信息系统是医院工作的生命线,其数据安全性和业务连续性至关重要。应用OraclellgDataGuard功能和最新性能,结合医院HIS系统需求,经过反复实验,总结了一套完整的、基于WindowsServer2008环境下Oracle1lgDataGuard部署的方法。     

胸腺肽肠溶胶囊联合液氮冷冻治疗扁平疣疗效探讨

目的探讨胸腺肽肠溶胶囊联合液氮冷冻治疗扁平疣的疗效。方法将92例扁平疣患者随机分为两组,对照组口服胸腺肽肠溶胶囊10 mg,tid,重组人干扰素α-2b凝胶外用bid,0.1%维A酸软膏外用睡前1次。治疗组口服胸腺肽肠溶胶囊10mg,tid,同时给于液氮冷冻治疗。两组疗程均为2个月。结果治疗组有效率为93.5%,对照组为65.2%。两组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论胸腺肽肠溶胶囊联合液氮冷冻治疗扁平疣疗效确切。