hEGF和hbFGF的C端(78-154aa)融合蛋白的表达、纯化及活性测定

目的:将人表皮生长因子(hEGF)与人碱性成纤维细胞生长因子(hbFGF)的C端连接,构建出既可与肝素结合,又具有促进细胞生长活性的融合蛋白,并在大肠杆菌中高效表达。方法:将PCR扩增hEGF全基因与PCR扩增hbFGF5端的231bp的片段连接,克隆到表达载体pJN,构建出含融合基因的表达质粒pJRH。将pJRH转化BL21(DE3)表达菌株,获得融合蛋白的表达菌株pJRH(BL)。Westernblot检测表达产物免疫学活性。表达产物上肝素亲和柱和分子筛进行纯化。结果:融合蛋白表达产量为30%,融合蛋白不仅能与肝素结合,而且具有促细胞增殖的活性。Westernblot检测结果显示融合蛋白有EGF的免疫活性。融合蛋白的等电点为5.2。结论:本研究构建了一个hEGF和hbFGF的C端的融合蛋白,该蛋白基本保持了两者原有的生物活性。作为一个新的活性因子,本研究为探讨活性因子蛋白结构与功能的关系奠定基础。     

软骨细胞上清液诱导BMSC向软骨细胞转化的实验研究

目的:体外定向诱导大鼠骨髓基质干细胞(BMSC)向软骨细胞表型转化,并对诱导进行鉴定。方法:从SD大鼠中分别分离出BMSC和软骨细胞进行体外培养。收集软骨细胞培养上清液,作为BMSC诱导液从第2代开始进行诱导分化。7d后取出标本,甲苯胺蓝染色和Masson染色检测软骨基质的分泌,免疫组织化学检测软骨特异性Ⅱ型胶原表达,RT-PCR检测Ⅱ型胶原和aggrecan的mRNA表达。结果:镜下见细胞形态由梭形向多边多角形转化。甲苯胺蓝染色和Mas-son染色阳性,Ⅱ型胶原免疫组化检测阳性,RT-PCR检测Ⅱ型胶原和aggrecan mRNA呈阳性表达。结论:软骨细胞上清液可诱导BMSC向软骨细胞转化。     

睡眠剥夺对词汇背景记忆的影响

目的:探讨睡眠剥夺对于背景记忆的影响。方法:将32名青年被试随机分为四组,分别为剥夺睡眠21小时、45小时、69小时和正常对照组,每组被试8名。正常对照组在早8:00,进行测试;睡眠剥夺组自第一天早7:00进入实验室开始剥夺睡眠,分别在第2天、第3天和第4天凌晨4:00离开实验室。测试为词汇背景记忆测验,通过按键反应,要求被试首先再认是否为旧词,再判断旧词的颜色。结果:除45小时组和69小时组漏过率外,同一组内背景记忆成绩低于再认(P<0.05);剥夺45小时后,与对照组比再认正确率下降(80.26±7.14/92.60±4.31,F=44.213,P=0.000)、漏过率增加(10.44±3.01/3.60±0.58,F=13.667,P=0.000)、反应时延长(0.71±0.25/0.65±0.16,F=22.315,P=0.000);而SD21后,与对照组比背景记忆正确率下降(62.23±7.71/80.10±8.21,F=31.54,P=0.027)、漏过率增加(9.69±3.11/5.83±2.47,F=3.712,P=0.028)、反应时延长(0.93±0.18/0.89±0.24,F=3.093,P=0.027)。结论:睡眠剥夺后再认和背景记忆成绩下降,并随睡眠剥夺时间的延长成绩下降更加明显;睡眠剥夺对背景记忆的影响更大。     

Smad4蛋白及mRNA在卵巢不同发育阶段的表达

目的：探讨Smad4在不同发育阶段大鼠卵巢中蛋白及mRNA的表达。 方法： 选择不同发育时期大鼠卵巢，运用免疫组化方法检测卵巢中Smad4蛋白表达，并进行图像分析；采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测Smad4 mRNA在卵巢中的表达。 结果： 免疫组化结果显示Smad4主要表达在各级卵泡中，在卵巢发育早期，Smad4主要在原始卵泡和窦前卵泡中表达；随着卵巢的发育成熟，Smad4在窦状及成熟卵泡颗粒细胞和卵泡膜细胞的表达与间质细胞比较无显著差异（P>0.05）。Smad4在卵泡中的表达强度也发生了变化：随着卵泡的发育，Smad4在窦状及成熟卵泡卵母细胞的表达与窦前卵泡卵母细胞比较明显减弱（P<0.05，P<0.01）；在卵泡膜细胞的表达逐渐增强（P<0.01），而在各级卵泡颗粒细胞中的表达无显著差异（P>0.05）。RT-PCR结果显示各阶段卵巢均有mRNA的表达，从第3周起Smad4 mRNA的表达明显增强，与生后1 d比较差异显著（P<0.05）。 结论： 卵巢内存在Smad4，提示TGF-β家族对卵泡发育的调节很可能是通过Smad信号转导模式实现的。     

TLR2和TLR4在原发性肝癌中的表达

目的：本研究通过检测原发性肝癌Toll样受体2（TLR2）和Toll样受体4（TLR4）的表达，分析其与临床病理生理因素的关系，探讨TLR2，TLR4在原发性肝癌疾病过程中的可能作用。方法：采用免疫组化法和实时荧光定量PCR分别在蛋白水平及mRNA水平检测原发性肝癌组织和配对癌旁组织TLR2、TLR4的表达。结果：原发性肝癌组织在蛋白水平和mRNA水平TLR2和TLR4的表达均明显低于癌旁组织（P<0.01）。但免疫组化结果显示不论是肝癌组织还是癌旁组织，TLR2和TLR4的表达均明显高于正常肝组织（P<0.01，P<0.05），有门静脉分支癌栓的患者癌组织TLR4的表达强度低于无门静脉分支癌栓的患者（P<0.05）。结论：肝癌组织TLR2和TLR4的表达与癌旁组织相比受到相对抑制，但高于正常肝组织，TLR2和TLR4信号途径可能参与了原发性肝癌的病理过程。     

甘肃省某大型公立医院医疗纠纷发生原因探析△

目的：探析甘肃省某大型公立医院医疗纠纷发生的原因,并识别表面原因、过度原因及根本原因,针对性提出综合防治建议,以促进医院全面和谐发展。方法：对2015-2019年该院440例医疗纠纷案例进行历史追踪,结合访谈法深入分析其发生原因,并运用冰山分析法进行分类。结果：该院医疗纠纷发生的表面原因有3项：医疗费用过高、发生并发症、过度检查和治疗;过渡原因有9项：医患沟通不到位,不充分、就诊流程不合理、患者隐私保护不到位、诊疗行为不规范和违反常规操作、手术不当、患者期望值过高难以满足、存在心理疾病、用药不当和用药不规范、有创治疗未履行知情同意义务;根本原因有4项：诊疗能力不足及技术水平不高、服务态度差、责任意识差、管理制度落实不到位。结论：医疗机构在制定医疗纠纷的防范措施时,要从根本原因入手,从根本上解决问题。因此,在日常诊疗工作中要持续强化临床技能操作,加强医德医风建设,强化医务人员责任意识和专业服务意识,落实医疗管理制度,以最大限度地降低医疗纠纷发生率。     

2018—2020年徐州市食源性疾病监测分析

目的 分析徐州市2018—2020年食源性疾病哨点医院主动监测结果,了解该地区食源性疾病流行特征。方法 收集2018—2020年徐州市食源性疾病哨点医院监测的病例信息,并对部分病例的粪便样本进行病原学检测。结果 3年共监测食源性疾病病例7 548例,其中25～45岁年龄组占比最高(26.81%);6—9月为发病高峰;肉与肉制品(20.72%)为主要的可疑暴露食品;可疑食物进食场所主要为家庭(80.49%);农民(26.75%)和散居儿童(24.95%)病例构成比较高。共采集1 835份腹泻病例粪便样本,其中诺如病毒检出率最高为(4.69%)。结论 徐州市食源性疾病高发期为6—9月,具有明显的季节性,好发于家庭,肉与肉制品为主要暴露食品,感染患者集中在>25～45岁年龄组,诺如病毒感染率较高。     

2017—2021年扬州市宝应县水痘流行病学特征分析

目的 分析2017—2021年扬州市宝应县水痘的流行特征,为水痘防制工作提供参考依据。方法 通过查阅监测系统相关数据的方式,采用描述性流行病学方法对2017—2021年扬州市宝应县水痘发病情况进行流行病学特征分析。结果 2017—2021年扬州市宝应县累计报告水痘病例3 841例,年均发病率为105.74/10万,5年发病率总体呈逐年上升趋势(χ2=112.92,P<0.01);有2个发病高峰期,主要集中在5—7月及10月至次年的2月,报告发病数分别占总病例数的27.65%、51.54%;人群以15岁及以下学生及幼托儿童为主,占79.24%;男性发病率略高于女性;城区发病率高于乡镇地区;突发公共卫生事件的发生主要集中在水痘发生的高峰期;疫苗首针剂的接种率总体呈现逐年上升的趋势(χ2=37.37,P<0.01)。结论 扬州市宝应县水痘的发生情况有明显的季节、年龄、职业和地区差异,加强15岁及以下人群的水痘二针剂疫苗的接种及防护知识宣传,这是预防水痘疫情发生和扩散的关键。     

致肝损伤中药的减毒措施及肝损伤的中药防治作用

中药在疾病预防和治疗的过程中发挥重大作用,但部分中药在临床的长期应用过程中,给人体带来的不良反应也逐渐显现出来,肝损伤属于其中之一。肝损伤也是中药新药研发过程中作为临床安全用药的重要检查项目,已成为众多上市药物退出市场的重要原因。随着对中药临床用药安全性的关注增加,关于中药肝损伤研究日益增多,大多数研究集中于中药或者中药成分的肝脏损伤研究。为了提高中药的安全性,该文总结了部分致肝损伤中药的物质基础和机制及降低中药肝损伤的措施,包括减少给药剂量和疗程,改变给药途径,改变药物剂型,药物配伍和炮制等方法;此外该文还总结了防治各种诱导物诱发肝损伤的单体中药、中药复方和中药成分及防治肝损伤的生物效应和作用机制。结合现代致肝损伤中药的减毒研究,提出明确致肝损伤中药的安全剂量和“毒-效”界限,明确减毒措施的减毒机制及确定致肝损伤中药的毒性物质基础,为致肝损伤中药的临床应用提供安全性保障;结合中药防治肝损伤的研究,提出加强中药防治肝损伤的临床研究的同时,利用现代科学技术“从局部到整体”来阐释中药复方防治肝损伤的科学内涵,进而为临床防治肝损伤提供科学依据。     

血液透析室丙型肝炎病毒暴发事件的分析与防控

丙型肝炎病毒感染后可引起多种疾病,血液透析室丙型肝炎病毒感染暴发事件在多个国家都有报道,主要原因在于感染预防与控制出现了漏洞。回顾丙型肝炎病毒感染暴发事件的文献并结合国内外影响较大的相关管理文件进行分析,有助于更科学地防控丙型肝炎病毒在血液透析室内的传播,将其感染暴发的风险降到最低。