即时二次隆乳术的探讨

目的:探索处理隆乳术后并发症同时行二次隆乳术适应证,选择适合手术切口,放置适当组织间隙。方法:36例隆乳并发症患者(其中硅胶假体隆乳13例,聚丙烯酰胺水凝胶注射隆乳23例)行即时二次隆乳,采用乳房下皱襞切口或乳晕切口,隆乳材料均选用硅胶假体。结果:该方法具有安全、易操作、痛苦小,出血少的优点,经随访3个月至3年取得满意效果。结论:严格掌握手术适应证,聚丙烯酰胺水凝胶(PAHG)尽可能洗净,选择硅胶假体置入胸大肌下间隙,是即时二次手术隆乳术的最佳方法。     

北京和重庆市育龄期妇女风疹抗体水平调查

目的了解北京和重庆市育龄期妇女风疹抗体水平,为控制先天性风疹综合征(CRS)提供科学依据。方法2006年6~8月随机抽取北京和重庆市各1个区作为调查点,对20~39岁育龄期妇女623人(北京市311人,重庆市312人)进行血清流行病学调查。结果北京和重庆市育龄期妇女风疹抗体阳性率分别为85.21%和78.53%,自然感染获得抗体阳性率分别为85.08%和77.89%;风疹抗体分布与年龄、地区有关,随着年龄的增长抗体阳性率和几何平均浓度有下降的趋势。结论制定科学的风疹疫苗使用策略和免疫程序,提高育龄期妇女的免疫力,是减少CRS发病的有效手段。     

玄胡索散通过下调粒细胞集落刺激因子抑制脾脏髓源抑制细胞分化发挥抗乳腺癌作用

目的:探讨玄胡索散抑制乳腺癌小鼠脾脏髓源抑制细胞(MDSC)分化的作用机制。方法:4～5周龄BALB/c雌性小鼠48只,其中6只为正常对照组,其他42只采用小鼠左侧第二对乳腺皮下脂肪垫接种4T1细胞构建乳腺癌荷瘤小鼠模型,分为粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对照组、G-CSF敲减组、模型对照组、玄胡索散小剂量组、玄胡索散中剂量组、玄胡索散大剂量组和环磷酰胺组,每组6只。其中G-CSF对照组和G-CSF敲减组分别采用shRNA慢病毒转染联合嘌呤霉素构建相应4T1稳转细胞模型。各组造模48 h后,玄胡索散小剂量组、玄胡索散中剂量组、玄胡索散大剂量组分别按2、4、8 g·kg^-1·d^-1玄胡索散灌胃,每天一次;环磷酰胺组按30 mg/kg腹腔注射环磷酰胺,隔天一次;其他组给予等体积0.5%羟甲基纤维素纳。各组连续给药25 d。苏木精-伊红染色观察脾脏组织病理学改变,流式细胞术测定脾脏MDSC亚群比例,免疫荧光法检测脾脏CD11b、Ly6G共表达,酶联免疫吸附测定外周血G-CSF浓度。在体外,建立荷瘤小鼠脾脏与4T1稳转株共培养体系,玄胡索散(30μ...     

抗NMDA受体脑炎的脑电图特点及其临床评估价值

  目的  总结分析抗N-甲基-D-天冬氨酸受体脑炎（抗NMDA受体脑炎）患者的脑电图特点,并探索脑电背景慢化分级、δ刷对临床评估的价值。  方法  纳入52例抗NMDA受体脑炎患者临床资料,包括年龄、性别、起病形式、合并肿瘤情况、辅助检查（脑脊液抗NMDA受体抗体滴度、MRI报告和脑电图结果）、治疗情况和出院随访情况。分析不同临床特征患者的脑电背景异常程度(EEG)、δ刷情况。  结果  52例患者中7例脑电图正常（14%）,45例脑电图异常（87%）,包括:轻度异常25例（48%）,中度异常 11例（21%）,重度异常9例（17%）。6例出现δ刷（12%）。脑电图检查时病情轻组有32例（62%）,病情重组有20例（38%）。随访1年后,预后良好组有45例（86%）,预后不佳组有7例（14%）。脑电背景异常程度越重、出现δ刷提示病情重、需要ICU治疗、预后不佳的比例增高（P<0.01）。脑电背景异常程度越重,CSF抗体滴度>1∶10的比例越高（P=0.035）,脑电背景异常程度越重,启动二线免疫治疗比例越高（P=0.008）。合并肿瘤的患者出现δ刷的比例更高（P=0.012）。首发病例较复发病例出现δ刷的概率更高（P=0.023）。  结论  脑电慢化程度和δ刷在评估病情、预测预后结果上一致,EEG越慢病情越重、预后越差,出现δ刷提示病情重、预后差。EEG慢化与抗MNDA受体脑炎的免疫状态相关,EEG越慢,免疫异常越重,临床上可动态检测患者的EEG以评估免疫治疗效果,若EEG慢化未改善应及早考虑加强免疫治疗。合并肿瘤的患者出现δ刷的比例更高,因此当出现δ刷时应积极排查肿瘤。     

小鼠FoxP3基因腺相关病毒的制备与鉴定

目的:构建携带小鼠FoxP3基因的重组腺相关病毒,并检测其在NIH3T3细胞的表达情况。方法:将FoxP3通过内部核糖体进入位点(IRES)与报告基因增强型绿色荧光蛋白连接,构建同时含有目的基因和报告基因的重组腺相关病毒(rAAV)表达质粒,通过磷酸钙沉淀法共转染HEK293细胞,收获并通过肝素亲和层析法纯化病毒,并对病毒纯度和滴度进行鉴定。利用携带FoxP3基因的重组病毒体外感染小鼠NIH3T3细胞,体外观察感染效率和目的基因转录情况。结果:包装成功的rAAV/FoxP3经纯化后获得了高纯度的rAAV/FoxP3,实时定量PCR检测rAAV/FoxP3的病毒滴度达到5.0×1012vg/mL,体外感染NIH3T3细胞,流式细胞术测定感染效率可达92.88%,实时PCR测定细胞内存在高水平FoxP3mRNA。结论:获得携带FoxP3-IRES-EGFP的rAAV,并可有效感染NIH3T3细胞,为进一步研究FoxP3的生物学功能提供了有效工具。     

HIV核心抗原p24原核系统的高效表达、纯化及活性鉴定

目的　在原核表达系统中对HIVp2 4抗原基因进行克隆和高效表达、纯化并鉴定其活性。方法　利用PCR技术从HIV-1全基因质粒 (B2N)中扩增p2 4抗原基因 ,并克隆入T载体中。通过酶切消化后连接到表达载体pRSET上 ,用此连接产物转化大肠埃希菌BL2 1,经IPTG诱导 ,表达p2 4抗原。利用固定化金属离子 (Ni2 )配体亲和层析技术从表达蛋白中纯化目的蛋白。并运用双酶切技术、SDS-PAGE电泳、WesternBlot(WB)及ELISA法分别对插入基因片段的正确性、表达产物的活性及特异性进行检测。结果　PCR产物约为 6 90bp ,与预期p2 4抗原全基因片段大小一致。重组质粒T-p2 4和pRSET-p2 4经BamHⅠ和HindⅢ双酶切 ,其插入的外源基因片段均为 6 90bp。将纯化前与纯化后的蛋白作SDS PAGE电泳 ,均可见一条约 2 4× 10 3的外源基因表达带 ,与计算的相对分子质量相符。经WB和ELISA试验 ,证明基因工程表达的p2 4抗原具有较高的特异性及活性。结论　成功构建了HIVp2 4表达载体pRSET-p2 4 ,并在原核细胞中高效表达 ,其表达产物具有良好的特异性及活性     

三种蚊唾腺蛋白IgE亲和成分的初步分析

从我国分布较广的三种蚊中华按蚊、淡色库蚊和白纹伊蚊中分离出唾液腺 ,制成唾腺蛋白粗提物 ,再应用ELISA、竞争抑制ELISA和免疫印迹试验分析其与IgE结合的组分。结果显示三种蚊唾腺蛋白含能与IgE结合的成分 ,以白纹伊蚊反应所呈现的A值最高 ;免疫印迹在三种蚊均显示 4条阳性带 ,中华按蚊和淡色库蚊相似 ,白纹伊蚊有 3条带差异 ,但其相对分子质量为 30 0 0 0～ 310 0 0组分阳性条带均出现于三种蚊唾腺蛋白     

改变在体兔左心室后负荷对其电生理参数的影响

目的：探讨改变在体兔左心室后负荷对室性心律失常发生情况及左心室电生理参数的影响。方法：改变左心室后负荷，观察室性心律失常发生情况，并测定左心室舒张阈值（ＶＤＴ），相对不应期（ＲＲＰ），有效不应期（ＥＲＰ）及其不应期离散和心室纤颤阈（ＶＦＴ）。结果：逐级增加左心室后负荷（ＡＢ级）可使左室空间ＲＲＰ，ＥＲＰ离散增加（Ｂ级，Ｐ＜００５），ＶＦＴ降低（Ｂ级，Ｐ＜００１）；各实验动物均出现室性心律失常（Ｂ级）；而逐级减小左室后负荷（ＣＤ级），心室电生理参数无变化（Ｐ＞００５），各实验动物亦无室性心律失常发生。结论：增加左心室后负荷诱发室性心律失常，与左室空间不应期离散增加有关。     

颈椎前路椎体间微创融合器的生物力学实验研究

目的评价植入镍钛记忆合金微创融合器(NiTi-TFC/C)的颈椎节段的稳定性及压缩力学性能。方法采集24只羊颈椎标本随机分为4组,每组6份,四组处理分别为:单取髓核组、自体髂骨植骨组、微创融合器组和钛制融合器组(InterFix)。所有标本进行前路减压,并对后3组进行椎间融合术。分别对各组标本进行生物力学测试并进行比较。结果微创融合器组与钛制融合器组在强度、刚度及扭转力学等方面无显著性差异(P>0.05)。而微创融合器组与自体髂骨植骨组具有显著性差异(P<0.05)。最大承载力为12050N。结论该微创融合器强度大、刚度高、抗扭转能力强,具有良好的抗压能力,为颈椎融合提供新型的融合装置。     

人偏肺病毒黏附蛋白的二级结构及B细胞表位初步预测

目的预测人偏肺病毒G蛋白的二级结构及B细胞表位。方法分别采用SOPMA方法及HMMTOP程序预测G蛋白的二级结构和跨膜区域；综合分析蛋白的柔性结构、亲水性、表面可及性与抗原性指数，预测G蛋白的抗原表位。结果G蛋白的二级结构主要为柔性区域，占62．1％；廿螺旋占22．37％；β-折叠占15．53％；N端第32～51位氨基酸残基为跨膜区。B细胞表位位于G蛋白N端55—77、80-104、111～126、130～167、178—210区段。结论应用多参数预测G蛋白的二级结构与B细胞表位，为进一步研究蛋白特征、单克隆抗体制备及表位疫苗研制奠定了基础。