卵巢透明细胞癌基因突变特征及相关靶向和免疫治疗研究进展

卵巢透明细胞癌(ovarian clear cell carcinoma, OCCC)是上皮性卵巢癌中特殊的组织病理学类型,对铂类为基础的化疗表现出原发性耐药,预后极差。深入研究OCCC独特的分子突变特征有助于在靶向和免疫治疗方面获得突破,对提高治疗效果和改善患者预后有重要意义。本文对近年来OCCC靶向治疗相关基因突变特征(例如ARID1、PI3K/AKT/mTOR、APOBEC等)进展进行全面综述和深入阐述。     

肺癌患者GSTP1基因启动子甲基化检测及其临床价值

目的 在肺癌的发生发展过程中,甲基化异常是导致相关基因失活的重要机制.本研究探讨肺癌患者谷胱甘肽S转移酶P1基因(Glutathione S-transferases P1,GSTP1)甲基化水平及其对肺癌诊断的临床价值.方法 收集2015-10-01-2016-01-31郑州大学第一附属医院收治的100例患者的肺泡灌洗液,其中80例肺癌患者(小细胞肺癌和非小细胞肺癌)为肺癌组,20例良性肺疾病患者(肺炎、慢性阻塞性肺疾病和肺结核)为对照组.以PCR联合高分辨率熔解曲线(high resolution melting assay,HRM) (PCR-HRM)方法检测GSTP1基因启动子甲基化水平,并结合肺癌患者临床病理特征进行分析.结果 肺癌组GSTP1基因启动子甲基化率为42.5％(34/80),显著高于对照组的15.0％(3/20),x2 =5.191,P=0.023.不同年龄、性别及病理类型肺癌患者GSTP1基因启动子甲基化率,差异均无统计学意义,P值分别为0.397、0.853和0.751.早期(Ⅰ和Ⅱ期)肺癌患者GSTP1基因启动子甲基化率42.5％(17/40),显著低于晚期(Ⅲ和Ⅳ期)的70.0％(28/40),x2=11.931,P=0.013;但显著高于对照组,x2=4.538,P=0.033.高、中分化肺癌患者GSTP1基因启动子甲基化率为43.9％(18/41),显著低于低分化患者的79.5％(31/39),x2=10.664,P=0.010;但显著高于对照组,x2 =4.974,P=0.026.结论 GSTP1基因启动子甲基化改变与肺癌发生发展及恶性程度有关,GSTP1基因启动子甲基化检测可能有助于肺癌诊断.     

CD13抑制剂乌苯美司对A549细胞顺铂敏感性的影响及其机制

  目的   检测CD13抑制剂乌苯美司联合顺铂对A549细胞增殖、细胞凋亡的影响,并探讨其机制。   方法   应用噻唑蓝比色法检测细胞增殖;流式细胞Annexin V-FITC/PI双染色法检测细胞凋亡;Western blot方法检测p53、PARP-1、Bcl-2、Bcl2-xL和Caspase蛋白水平;酶活性底物法检测CD13活性;Hoechst33342染色联合流式细胞术检测侧群细胞。   结果   乌苯美司单药对A549细胞增殖无显著影响（P>0.05）,乌苯美司（100 μg/mL）联合顺铂作用A549细胞24、48、72 h后,乌苯美司可显著增强8、16 μmol/L顺铂对A549细胞的增殖抑制（P < 0.05）,并呈时间依赖性,72h时,8、16μmol/L顺铂组和顺铂联合组的细胞增殖率分别为（62.06± 7.60）% vs.（27.92±5.84）%和（19.22±1.57）% vs.（0.67±0.42）%（P < 0.05）;但对64 μmol/L顺铂的细胞增殖率无明显影响（P>0.05）。16 μmol/L顺铂联合组细胞凋亡的比例明显增加（P < 0.05）。乌苯美司对P53、PARP-1、Bcl-2、Bcl2-xL及Capsize蛋白水平无明显影响,但显著抑制A549细胞CD13活性和降低A549侧群细胞比例（P < 0.05）。   结论   CD13抑制剂乌苯美司体外条件下显著提高低剂量顺铂对A549细胞的抑制作用,可能成为CD13阳性非小细胞肺癌患者顺铂的增敏剂。      

对羟基桂皮醛诱导食管癌TE-13细胞分化及其作用机制

目的：探讨木鳖子单体化合物对羟基桂皮醛（p-hydroxylcinnamaldehyde,CMSP）对食管癌细胞株TE-13的分化作用及其机制。方法：用流式细胞术检测质量浓度为10、20、40 μg/ml的 CMSP处理TE-13细胞对该细胞凋亡和细胞周期分布的影响,用吉姆萨染色、电镜观察TE-13细胞形态学改变,Real-time PCR和ELISA方法检测TE-13细胞中肿瘤相关抗原CEA和SCC的表达,用克隆集落形成实验、Transwell迁移实验检测不同质量浓度CMSP对TE-13细胞的增殖、迁移能力的影响,Western blotting检测CMSP（20 μg/ml）对TE-13细胞中MAPK通路中各蛋白水平的影响。结果： CMSP可抑制食管癌Kyse30、TE-13、Eca109和Kyse180细胞的增殖\[(1.6±0.2)×104 vs （3.8±0.3)×104、(1.7±0.3)×104 vs (4.5±0.4)×104、 (2.5±0.1)×104 vs (4.0±0.4)×104、(1.5±0.1)×104 vs (2.5±0.3)×104个细胞, 均P<0.01\],而对人食管上皮细胞无明显作用(P>005)。CMSP处理TE-13细胞后：(1) 随CMSP质量浓度（10 、20 、40 μg/ml）和处理时间的增加（24、48、72 h）,G0/G1期细胞数量均增加、S期细胞数量减少（P<0.01或 P<0.05）,但细胞凋亡率无明显变化（P>0.05）;(2) 细胞出现典型分枝状突起,且随CMSP质量浓度增加更显著（P<0.05）;（3）CEA和SCC水平显著降低（P<0.01）;（4）抑制TE-13细胞的增殖和迁移能力,诱导细胞分化;（5）p-P38蛋白水平明显升高（P<0.01）,而p-ERK、p-SPKA/JNK蛋白水平明显降低（P<0.01）。结论： CMSP抑制食管癌TE-13细胞的增殖、诱导其分化,其作用机制可能与上调MAPK信号通路中p-P38和下调p-ERK、p-SPKA/JNK有关。     

HIF-1α与Caspase-3在乳腺癌中的表达及临床病理意义

目的：检测HIF-1α、Caspase-3在乳腺浸润性癌、导管内癌、导管内乳头状瘤中的表达,分析两者与乳腺癌发生及临床病理因素的关系。方法：免疫组化法检测HIF-1α、Caspase-3在乳腺浸润性导管癌、导管内癌、导管内乳头状瘤组织中的表达。结果：乳腺浸润性导管癌、导管内癌、导管内乳头状瘤中,HIF-1α阳性表达率分别为68.3%（41/60）、46.7%（28/60）、33.3%（20/60）,P〈0.05,差异有统计学意义,Caspase-3阳性表达率分别为48.3%（29/60）、58.3%（35/60）、62.8%（47/60）,P〈0.05,差异有统计学意义;两者表达与浸润性导管癌患者年龄、肿瘤大小无相关性（P〉0.05）。HIF-1α表达与乳腺癌病理分期、淋巴结有无转移、组织病理学分级有关（P〈0.05）。Caspase-3表达与组织病理学分级有关（P〈0.05）。HIF-1α、Caspase-3在乳腺浸润性癌中的表达呈负相关（r=-0.271,P〈0.05）。结论：HIF-1α、Caspase-3在乳腺癌的发生中起重要作用,联合检测可作为判断乳腺癌恶性程度和预后的指标。     

阿帕替尼逆转P-gp转运体介导的乳腺癌化疗多药耐药性的作用及其机制

目的 探讨阿帕替尼对人乳腺癌化疗多药耐药性的逆转作用及其机制。方法 不同浓度的阿帕替尼作用于体外培养的人乳腺癌MCF-7及MCF-7/ADR细胞48 h,MTT法检测阿帕替尼对两种细胞的细胞毒性;低毒浓度的阿帕替尼与化疗药物紫杉醇及阿霉素联用,探讨阿帕替尼对两种细胞化疗耐药性的影响;采用流式细胞术检测阿帕替尼对罗丹明123在MCF-7及MCF-7/ADR细胞内蓄积的影响;采用Pgp-Glo? Assay Systems试剂盒观察阿帕替尼对多药耐药相关蛋白P-gp的ATPase活性的影响;采用Western blot法检测阿帕替尼对P-gp表达及AKT磷酸化的影响。结果 阿帕替尼可浓度依赖性地逆转乳腺癌MCF-7/ADR细胞对紫杉醇及阿霉素的多药耐药性（P<0.05）、增加罗丹明123在MCF-7/ADR细胞内的蓄积（P<0.05）及激活P-gp转运体的ATPase活性（P<0.05）,而对P-gp的表达没有影响;此外,阿帕替尼不改变AKT的磷酸化水平。结论 阿帕替尼可能通过抑制P-gp转运体的外排功能逆转P-gp转运体介导的乳腺癌化疗多药耐药性。     

城市和农村妇女高危型人乳头瘤病毒感染的危险因素分析

目的:探讨影响我国城市和农村地区高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)感染的危险因素,为HR-HPV感染和子宫颈癌的防治工作提供依据。方法:采用横断面调查方法对城市地区(北京和上海)1 569人、农村地区(山西和河南)1 763人进行流行病学调查和妇科检查及高危型人乳头瘤病毒检测(HC-Ⅱ)。利用χ2检验和非条件Logistic回归模型分析HR-HPV感染的危险因素。结果:多因素分析结果显示,影响城市地区HR-HPV感染的危险因素为丈夫婚外性行为、生殖器感染史(STD)、流产次数和吸烟,而细胞学检查史是保护因素。影响农村地区HR-HPV感染的危险因素为初次性交年龄、近5年性伴侣数、丈夫婚外性行为、性生活年限和饮酒。结论:影响城市与农村地区妇女感染HR-HPV的危险因素存在着较大差异。提示,在制定预防和控制宫颈癌以及HR-HPV感染的措施时要因地制宜。     

Ki-67与乳腺癌临床病理特征及新辅助化疗疗效的相关性

目的：分析Ki-67与乳腺癌临床病理特征对新辅助化疗（neoadjuvant chemotherapy,NCT）疗效和预后的影响,探讨NCT疗效的预测因素。方法用免疫组化法检测320例局部晚期乳腺癌患者癌组织中ER、PR、HER-2及Ki-67表达状况。进行NCT 4～6个周期后手术。分析临床病理特征与病理完全缓解率（patho-logic complete response,pCR）之间的关系。临床病理参数与疗效分析用χ2检验,影响预后因素用Cox多因素回归分析。结果 Ki-67表达与ER（r=－0.174,P=0.002）和PR（r=－0.132,P=0.019）呈负相关,与HER2（r=0.140, P=0.012）和乳腺肿瘤大小（r=0.132,P=0.019）呈正相关;ER阴性组pCR率显著高于ER阳性组（26.9%vs 7.4%,χ2=22.761,P=0.000）;PR阴性组pCR率显著高于阳性组（22.7%vs 10.9%,χ2=7.950,P=0.005）;Ki-67高表达组pCR率18.0%（41/228）优于Ki-67低表达组8.6%（8/92）（χ2=4.552,P=0.033）;化疗后Ki-67表达下降组pCR率19.8%（48/243）优于未下降组1.3%（1/77）（χ2=15.356,P=0.000）;各分子亚型间化疗疗效差异显著,Luminal A型pCR率为1.4%（1/71）,Luminal B型pCR率为15.3%（25/163）,HER2过表达型pCR率为31.3%（14/45）,三阴性型pCR率为22.0%（9/41）（χ2=20.639,P=0.000）;用Kaplan-Meier法进行生存分析,Ki-67低表达组无病生存时间（DFS）和总生存时间（OS）均优于Ki-67高表达组,两者均为P=0.034。结论 Ki-67高表达患者对化疗更敏感,但预后较差。化疗前Ki-67的表达和化疗后Ki-67变化是影响DFS独立的预后因素。ER、PR、Ki-67指数及分子分型可以作为NCT疗效的预测指标,Ki-67指数与ER、PR、HER2之间存在相关性。     

99m^Tc-MIBI显像对甲状腺单发结节的诊断价值

目的：探讨99m^Tc-MIBI显像对甲状腺单发结节鉴别诊断的临床价值。方法：对甲状腺99m^TcO4-核素显像为单个＂冷结节＂的患者进行99m^Tc-MIBI显像,采集15min、30min及2h三时相的静态图像,将显像结果进行定量分析并与病理结果比较。结果：甲状腺癌组三时相的99m^Tc-MIBI摄取比值皆高于良性病变组（P〈0.001）;RI无显著性差异（P〉0.05）;T/N1组与T/N2组摄取比值无显著性差异（P〉0.05）。以甲状腺癌组摄取比值的（-x±s）为判断阈值,99m^Tc-MIBI显像对甲状腺癌诊断的灵敏度为75.00%-100.00%,特异性为81.25%-93.75%,准确性为84.09%-93.18%。T/N1组与T/N2组定量分析的灵敏度、特异性与准确性无显著性差异（P〉0.05）。结论：99m^Tc-MIBI显像对甲状腺单发结节良恶性鉴别诊断有较大的临床应用价值。     

鼻咽癌2008分期的临床应用研究

目的:从鼻咽癌2008分期临床应用的角度探讨其合理性,指出不足,完善分期.方法:收集我科收治的经病理确诊、无远处转移的初诊鼻咽癌患者100例,按各个分期标准中提及的所有解剖结构进行阅片,按2008分期、2002年UICC及'92分期的标准分别进行分期.结果:斜坡受侵比例最高为85%(85/100),翼内肌为37%(37/100),鼻腔为16%(16/100),口咽为3%(3/100).淋巴结最大径＞3 cm11例,仅依据淋巴结＞3 cm而诊断为N2的只有1例.3种分期中T3及N0、N2数量有一定差别,但临床总分期基本一致.结论:鼻腔、口咽等解剖结构的定义过于局限,蝶骨大翼的定义及跨区淋巴结的归属需明确,颅神经受侵的MR诊断部位和标准需要完善,翼内肌的合理性有待研究,可制定出锁骨上区的影像学边界,淋巴结大小作为N参数可保留.