胰腺导管腺癌和慢性胰腺炎中18q21杂合性缺失及相关性分析

目的 探讨18q21在人胰腺导管腺癌和慢性胰腺炎中杂合性缺失(LOH)的情况及其相关因素.方法 选择18q21上的位点RP11-729G3和RP11-850A17作为目的 片段,选择接近18号染色体着丝粒的位点RP11-621L6作为参照位点,利用细菌人工染色体(BAC)提取、纯化相应位点的DNA,用切口平移法分别标记生物素和地高辛后制成双色探针,应用荧光原位杂交技术(FISH)检测30例胰腺导管腺癌和10例慢性胰腺炎石蜡包埋组织切片中18q21 LOH情况,并收集、整理相应临床病理资料进行相关性分析.结果 30例胰腺导管腺癌中在RP11-729G3位点有25例(83.3%)有LOH,在RP11-850A17位点26例(86.6%)有LOH,其中25例在RP11-729G3和fuP11-850A17两个位点均有LOH,1例仅在RP11-850A17位点有LOH.10例慢性胰腺炎中均未发现18q21 LOH.经统计学分析发现,18q21 LOH在慢性胰腺炎和胰腺导管腺癌中差异有统计学意义(P<0.01),且RP11-729G3和RP11-850A17两个位点LOH有高度相关性(Phj系数=0.877),但和临床病理各因素间未发现明显相关.结论 18q21 LOH在胰腺导管腺癌中属于高频事件,并且位点RP11-729G3和RP11-850A17的LOH有高度相关性,可能在胰腺导管腺癌发生发展中起重要作用.在临床诊断中18q21LOH也能作为较特异的标记辅助诊断.     

小鼠趋化因子COL19Ig融合蛋白表达载体的构建、表达及鉴定

通过特异引物扩增出去掉终止密码的mCCL19编码序列，经酶切、亚克隆、拼接构建了真核表达载体pcDNA3．1-CCL19Ig，酶切和测序鉴定插入序列；将重组质粒转染CHO细胞进行体外表达，通过RT—PCR、Western blot鉴定目的基因的表达，利用趋化小室法测趋化活性。结果测序证实重组表达载体含mCCL19编码序列和人IgGI Fc段序列，其序列分别与GenBank中公布序列比对一致，IgG1-Fc段读码框未发生改变；Western blot结果证实转染了pcDNA3．1-mCEL19Ig的CHO细胞培养上清中有相对分子质量为38000的融合蛋白mCCL19Ig表达；体外趋化实验表明融合蛋白mCCL19Ig对小鼠脾细胞有趋化活性，且呈剂量依耐关系。     

注意缺陷多动障碍儿童行为问题的对照研究

目的：比较注意缺陷多动障碍（Attention Deficit Hyperactivity Disorder，ADHD）临床亚型和正常儿童的行为问题。方法：将符合DSM—Ⅳ ADHD诊断标准的男童70例分为注意障碍为主型（PI）44例，以多动／冲动为主型（HI）6例、混合型（CT）20例，采用儿童行为量表（Child Behavior Checklist，CBCL）比较各亚型和正常儿童的行为问题。结果：ADHD组行为问题发生率（48．57％）明显高于对照组（12．70％），P〈0．01；ADHD各亚型行为问题发生率存在统计学差异（P〈0．01）。混合型最高；ADHD亚型与对照组CBCL因子分的4组间比较显示分裂性、强迫性、体诉、多动、攻击性、违纪因子及CBCL总分存在统计学差异；分裂性因子PI〉HI，攻击性因子CT，HI〉PI，违纪因子HI〉PI，CT。结论：ADHD男童行为问题发生率高于正常儿童，其中混合型行为问题发生率最高；ADHD临床亚型行为问题特点不同。     

脑转移瘤同期加量混合调强放疗与调强放疗的剂量学比较

目的:探讨同时运用三维适形与调强的混合调强放疗（Hybrid-IMRT）与调强放疗（IMRT）用于脑转移瘤同期加量的剂量学差异。方法:选取20例进行头颅放疗的患者，分别设计Hybrid-IMRT计划和IMRT计划。Hybrid-IMRT计划包括全脑行三维适形（两野对穿）3 600 cGy/20 F、脑转移灶行IMRT同期加量至5 000 cGy/20 F；IMRT计划全程运用IMRT给予全脑照射3 600 cGy/20 F、脑转移灶5 000 cGy/20 F。在满足临床要求的前提下，比较两组计划靶区的均匀性指数、适形度指数、平均剂量和机器跳数，危及器官脑干、视神经、晶体、视交叉、眼球的最大剂量和平均剂量。结果:两种计划均能满足临床要求。Hybrid-IMRT计划的PGTV均匀性优于IMRT计划（P<0.001）；Hybrid-IMRT计划的脑干、视交叉、左右晶体的最大剂量与平均剂量，左右眼球的平均剂量以及左右视神经的最大剂量均低于IMRT计划（P<0.05）；Hybrid-IMRT计划的机器跳数比IMRT计划减少了约70%（P<0.001）。结论:两种计划均能满足临床要求，Hybrid-IMRT计划相较IMRT计划靶区剂量更加均匀，治疗时间缩短，也能更好地保护危及器官。     

全髋关节置换术均衡双下肢长度的探讨

目的探讨全髋关节置换术均衡双下肢长度的临床意义和手术设计。方法回顾分析2000-2004年获得随访的单侧全髋关节置换手术病例48例,采用骨水泥型假体12髋,混合型假体36髋,术前双下肢等长30例(含股骨颈骨折患者),10例患肢长度短缩1.0-2.0cm,6例短缩2.0-4.0cm,2例短缩4.0-6.0cm。通过术前肢体长度测量及X片测量制定手术方案,选择假体、预估颈长和截骨平面;术中正确磨削髋臼,寻找最佳旋转中心,结合透视及特殊试验修正截骨平面,调节假体颈长,达到均衡双下肢长度的目的。结果全部病例采用Harris评分,优30例,良12例,中4例,差2例。术前等长30例巾术后出现5例手术侧延长1.0-2.0cm,1例延长2.5cm。术前不等长的18例中,术后恢复等长10例,6例手术侧延长1.0-2.0cm,2例术前重度短缩的先天性髋关节发育不良病人术后仍然短缩2.0-3.0cm。术后肢体等长35例Harris评分平均92.3分,术后肢体不等长13例Harris评分平均88.6分。结论全髋关节置换术的手术设计。手术技巧以及假体设计等诸多因素影响下肢长度,术后肢体不等长降低了患者的满意度。应重视术前测量及术中综合评价方法的运用,重视软组织平衡技术和肢长调节,掌握全髋置换术中均衡下肢长度的手术技术,进一步改善手术效果。     

Cytokines transduced bone marrow stromal cell lines promote immunohematopoietic reconstitution in mice after allogeneic bone marrow transplantation

Impaired immune reconstitution following allogeneic T-cell depleted bone marrow transplantation (allo-TCD-BMT) is a major obstacle to its clinical application. Stromal cell line QXMSC1, established from bone marrow cells of BALB/c(H-2d), was transfected with murine IL-3 and/ or IL-2 gene, and injected into lethally irradiated C57BL/6(H2b) mice. We evaluated its effects on immunologic and hematopoietic reconstitution after allo-TCD-BMT. The results showed that QXMSC1-IL-3 + IL-2 could significantly increase the numbers of hematopoietic primitive progenitors (CFU-S), committed progenitors (CFU-GM, and BFU-E), and lymphocytes (CD8+ cells, CD4+ cells, and B cells). Similarly, immune functions of recipient mice were significantly enhanced in the QXMSC1-IL-3 + IL-2 group. In addition, QXMSC1-IL-3 or QXMSC1-IL-2 also exerted apparent effects on accelerating immune reconstitution, but these effects were far less than that of QXMSC1-IL-3 + IL-2. Our results demonstrated that stromal cell-mediated IL-3 and IL-2 gene therapy may be a potent approach in promoting immunologic and hematopoietic reconstitution after allo-TCD-BMT.     

脑出血后的病理改变与T淋巴细胞反应

目的:探讨脑出血血肿周围局部病理改变及细胞免疫机制。方法:用免疫组化方法及组织HE染色法观察20只大鼠尾壳核脑出血24 h,3天、7天血肿周围区域的组织病变及CD3 、CD8 T淋巴细胞的分布形式和表达时程。结果:①在脑出血后24 h血肿周围即可见明显血管源性水肿,大量炎性细胞浸润,以中性粒细胞为主,少量散在淋巴细胞、小胶质细胞、星形细胞、少突胶质细胞弥漫浸润;出血3天、7天以淋巴细胞、巨噬细胞浸润为主,小胶质细胞、星形细胞、少突胶质细胞增生明显,双侧半球皮层下和血管周围出现小胶质细胞结节;②出血灶周围CD3 和CD8 T淋巴细胞浸润在出血后24 h已可见,出血后3天组和出血后7天组,CD3 和CD8 阳性细胞数明显高于出血后24 h组。结论:①脑出血期以中性粒细胞反应为主,以后以淋巴细胞反应为主,胶质细胞反应在出血后24 h已发生,持续一周以上;②CD3 、CD8 阳性细胞的出现提示它们参与了出血后脑损伤的病理过程,在出血7天内, CD3 和CD8-阳性细胞反应呈增强趋势。     

NO及NO合成酶与感染性休克

感染性休克病理生理学过程十分复杂。NO在其中的作用既具有有害的一面，同时也存在有利的一面。受内毒素、细胞因子等诱导，iNOS表达上调并产生大量NO，引起循环衰竭、组织细胞损伤以及通过调节炎症介质基因表达扩大全身炎症反应。另一方面，eNOS所产生的NO对机体具有保护作用。然而，感染性休克时，eNOS蛋白质合成及其功能受到损害，反而成为血管内皮功能失常、诱发多器官功能障碍的重要原因。     

79例广东汉族人群HLA-Cw及其KIR分析

目的：了解HLA—Cw与相应刺激性KIR（杀伤细胞免疫球蛋白样受体）和抑制性KIR在广东汉族人群中的分布。方法：对79例广东汉族骨髓移植供者，以DNA技术检测HLA-Cw和KIR表型。根据对KIR识别的特异性，将HLA-Cw分为HLA-Cw^lys.HLA-Cw^asn，分析个体HLA-Cw与相应刺激性或抑制性KIR的识别情况。结果：本组人群中，HLA-Cw^lys、HLA-Cw^asn的频率分别为26．6％、97．5％。表达KIR2DL1而无栩应配体者62．0％，表达2DS1而无相应配体者15．1％。27．8％表达HLA-Cw^asn而不表达相应KIR。25．3％、55．6％有抑制性HLA-Cw^lys或HLA-Cw^asn配体受体对，1．3％和14．0％的个体单独表达刺激性HLA-Cw^lys扣或HLA-Cw^asn配体受体对。15．1％的个体表达KIR2DS1而不表达HLA-Cw^lys。结论：在广东汉族人群中，存在KIR表型与自身HIA表型分离现象。抑制性HIA-Cw-KIR配对表达高于刺激性配对，约1／5单独表达刺激性HLA-Cw—KIR配对。     

肝素化胶原/壳聚糖多孔支架的制备及其血管化的研究

本研究旨在构建一种能快速血管化的人工真皮替代物。用冻干法制备了胶原／壳聚糖多孔支架，并对其进行肝素化，观察此支架的结构特征、亲水性、体外降解性和组织相容性，同时将血管生成素引入到此支架，对复合有血管生成素的肝素化支架的体内血管化进行了初步研究。结果表明，肝素化胶原／壳聚糖多孔支架具有合适的三维多孔结构、良好的吸水性和较理想的酶解稳定性，体内实验表明，此支架具有良好的组织相容性，血管生成素可加快支架的血管化。