良性前列腺增生和前列腺癌组织中雄激素受体的表达

目的　探讨雄激素受体 (AR)与良性前列腺增生 (BPH)和前列腺癌 (PCa)的关系。　方法　应用免疫组织化学技术检测 4 0例BPH、4 0例PCa患者及 2 0例正常前列腺组织 (正常对照组 )AR的表达。　结果　BPH组、PCa组、正常对照组AR表达的阳性率分别为 98%、5 3%、75 % ,相互比较差异均有显著性 (P <0 0 5 )。高分化癌、中分化癌、低分化癌的AR表达的阳性率分别为 6 7%、5 6 %、30 % ,高、中分化癌的AR表达的阳性率比低分化癌高 (P <0 0 5 )。早期前列腺癌的AR表达阳性率 (6 9% )比晚期前列腺癌 (4 2 % )高 (P <0 0 5 )。　结论　BPH组织中AR的表达高于正常前列腺组织 ,AR在BPH的发生、发展中起着重要作用 ;PCa组织中AR的表达低于正常前列腺组织。AR的表达与肿瘤分级、分期相关。     

利用噬菌体杀灭巨噬细胞内耻垢分枝杆菌的实验研究

目的探讨噬菌体能否杀灭巨噬细胞内耻垢分枝杆菌,并成为减少细胞内活菌量的手段。方法将体外培养的已感染耻垢分枝杆菌的小鼠腹腔巨噬细胞随机分为4组生理盐水组,噬菌体高剂量组、中剂量组和低剂量组。分别加入生理盐水0.1ml、10#噬菌体2.1×107噬菌斑形成单位(PFU)、2.1×106PFU和2.1×105PFU。通过洗涤去除细胞外的噬菌体与耻垢分枝杆菌,观察加入噬菌体24h后巨噬细胞内耻垢分枝杆菌活菌数量变化情况。并在电子显微镜下观察巨噬细胞吞噬噬菌体前后胞内改变情况。结果24h后生理盐水组巨噬细胞内活菌数的对数值为5.74±0.18,噬菌体高、中、低剂量组的活菌数对数值分别为4.77±0.08、4.97±0.17、5.33±0.13。生理盐水组的活菌数高于噬菌体高、中、低剂量组,其中生理盐水组与噬菌体高、中剂量组之间比较差异有统计学意义(P<0.01)。高、中剂量组间差异无统计学意义(P>0.05),高、低剂量组间差异有统计学意义(P<0.01)。电子显微镜显示噬菌体能感染细胞内的耻垢分枝杆菌,合成子代噬菌体。结论感染了分枝杆菌的巨噬细胞可以同时吞噬10#噬菌体,进入细胞内的噬菌体能感染裂解胞内分枝杆菌使活菌量减少,使噬菌体治疗分枝杆菌感染成为可能。     

应用HIV-1耐药性基因型检测广东部分地区HIV耐药株

目的利用艾滋病病毒1型(HIV-1)耐药性基因型检测法,在HIV-1感染者中监测HIV-1耐药性病毒株,掌握广东省HIV-1感染者在利用抗病毒药物治疗前是否存在耐药突变及其流行情况。方法从未接受高效抗逆转录病毒联合疗法(HAART)治疗的HIV-1感染者血浆中提取病毒RNA,采用套式PCR扩增目的基因片断,并对扩增片断进行序列测定和分析。结果HIV-1耐药性基因型检测法能够从HIV-1感染者血浆病毒载量大于1 000拷贝/ml以上、CD4低于400以下的样本中扩增到目的片断。在广东省50例未治疗对象中,低中度耐药相关突变例数为2例,占4%;高度耐药相关突变例数为0;总耐药相关突变例数为2例,占4%。结论HIV-1耐药性基因型检测法能有效地监测HIV-1感染者血浆中的耐药性病毒株的存在,并且方法提供的结果准确、可靠。对广东省未接受抗病毒治疗的HIV-1感染者中耐药突变的检测表明,HIV-1感染者中存在病毒的耐药性突变,也反应了HIV毒株自然变异情况的存在。     

含质子泵抑制剂的铋剂四联方案根除幽门螺杆菌的成本-效果分析

目的分析比较几种铋剂四联疗法根除幽门螺杆菌的经济性。方法选取2017年1月至2019年1月在我院接受幽门螺杆菌根除治疗的患者进行回顾性分析,并进行药物经济学评价。结果四组治疗方案的疗效比较差异无统计学意义。"艾司奥美拉唑(20 mg)+阿莫西林(1000 mg)+呋喃唑酮(100 mg)+枸橼酸铋钾(220 mg),bid,14 d"成本-效果比最低,优于其他方案。四组治疗方案的敏感性分析结果与成本-效果分析结果一致。结论铋剂四联疗法可有效根除幽门螺杆菌,其中"艾司奥美拉唑(20 mg)+阿莫西林(1000 mg)+呋喃唑酮(100 mg)+枸橼酸铋钾(220 mg),bid,14 d"治疗效果较好,且具有更高的药物经济性。     

扬子鳄大脑胚后发育中脑源性神经营养因子和神经营养因子-3的表达

目的 探讨脑源性神经营养因子(BDNF)和神经营养因子3(NT-3)在扬子鳄大脑胚后发育中的时序表达。方法 用免疫组织化学染色和
Western blotting法观察BDNF和NT-3在0岁、1岁和2岁的扬子鳄大脑皮质中的定位和含量变化。结果 免疫组织化学显示,0岁扬子鳄大脑皮质
区内4层均可见BDNF阳性细胞,随着年龄增加,BDNF阳性细胞数量逐渐增多,到2岁时BDNF阳性细胞胞体增大,突起增多,主要集中在细胞层和
外网状层移行区。这与Western blotting检测结果一致。0岁扬子鳄大脑皮质区内可见NT-3阳性细胞,主要集中在细胞层和外网状层。到1岁时,
NT-3阳性细胞逐渐增多,在外网状层可见大量密集的阳性细胞。2岁时,外侧的分子层中NT-3阳性细胞增多,且细胞突起随着年龄增加而出现
增多。这一结果与Western blotting检测一致。结论 BDNF和NT-3参与了扬子鳄胚后2年内大脑皮质区神经细胞的生长发育。     

干扰FGF4表达可抑制口腔鳞状细胞癌细胞增殖、迁移及侵袭能力

目的 探索干扰成纤维细胞生长因子4(fibroblast growth factor 4,FGF4)表达对口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响.方法 培养5株OSCC细胞株并检测FGF4 DNA拷贝数及mRNA的表达变化;转染siRNA干扰FGF4表达并进行验证;干扰FGF4表达后,采用CCK-8检测OSCC细胞株HSC-3、H314细胞增殖能力的变化,采用Transwell方法检测细胞迁移及侵袭能力的变化.结果 同对照组相比,干扰FGF4表达后,HSC-3、H314细胞增殖能力明显下降(P<0.05).在HSC-3中,FGF4 siRNA-002组及siRNA-003组迁移细胞数分别下降了64.52％、66.81％;在H314细胞系中,FGF4 siRNA-002组及siRNA-003组迁移细胞数下降了66.81％、82.01％.同对照组相比,在HSC-3中,FGF4 siRNA-002组及siRNA-003侵袭细胞数分别下降了52.34％、49.89％.在H314中,FGF4 siRNA-002组及siRNA-003侵袭细胞数分别下降了75.3％、90.63％.结论 在OSCC细胞中,干扰FGF4表达可抑制OSCC细胞的增殖、迁移及侵袭能力.     

38例泥巴样胆囊结石红外光谱分析报告

目的分析泥巴样胆囊结石的成分并探讨其形成机制。方法 2009年11月-2013年7月对38例患者的泥巴样胆囊结石进行研究,傅里叶变换红外光谱法(FTIR)分析结石成分;光学显微镜观察并分析结石的微观形态。结果 38例患者B超检查结果显示:30例为胆囊结石(78.95%),6例为胆泥(15.79%),2例为泥沙样结石(5.26%)。38例泥巴样胆囊结石FTIR分析判定为碳酸钙结石;其中28例(73.68%)为文石型,6例(15.79%)为方解石型,4例(10.53%)为方解石-文石混合型。光镜下主要见各种形态的碳酸钙结晶;其中有15例检出华支睾吸虫卵,检出率为39.47%。结论泥巴样胆囊结石是一种碳酸钙型结石。     

小鼠成牙关键调控基因的筛选与功能验证实验研究

  目的  筛选小鼠成牙关键基因,并验证关键基因对羊膜上皮细胞（WISH）成牙诱导分化的能力。  方法  通过免疫组化染色、实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测骨形成蛋白4（BMP4）、成纤维细胞生长因子8（FGF8）、音猬因子（SHH）、淋巴增强因子（LEF1）4种分子蛋白和基因在小鼠早期牙胚发育过程〔小鼠胚胎发育第10.5天(E10.5)、E11.5、E14.5〕中的时空差异化表达,筛选可能的成牙关键基因;非牙源性上皮WISH成骨诱导培养3周,采用茜素红（ALZ）染色与RT-qPCR检测碱性磷酸酶（ALP）观察骨向分化能力;通过胚层重组实验进行组织重组,将BMP4蛋白加入重组组织块,并移植于小鼠肾被膜下,观察验证关键基因的蛋白能否诱导非牙源性上皮成牙分化。  结果  免疫组化染色和RT-qPCR结果证实E10.5胎鼠BMP4蛋白和基因在第一、第二腮弓上皮存在差异性表达,且从E10.5~E14.5其表达与成牙能力从上皮向间充质的转移一致;FGF8蛋白和基因虽在第一、第二腮弓上皮存在差异性表达,但其表达与成牙能力的转移不一致;LEF1、SHH蛋白和基因在第一、二腮弓上皮不存在差异表达,且与成牙能力的转移不一致,因此,筛选出BMP4基因为可能的成牙关键基因。WISH成骨诱导3周,ALZ染色阳性,并形成钙结节,RT-qPCR检测ALP mRNA表达升高;胚层重组实验结果显示,加入外源性的BMP4蛋白可使第二腮弓间充质分别与第二腮弓上皮及WISH均有牙齿样结构形成。  结论  BMP4、FGF8、SHH、LEF1的蛋白和基因在小鼠牙胚早期发育过程中呈时空特异性表达;BMP4的蛋白和基因在第一、二腮弓上皮差异表达,且其蛋白可使与第二腮弓间充质重组的非牙源性上皮获得成牙能力。BMP4为可能的成牙关键基因。     

广地龙特异性引物序列的设计及其混伪品的鉴别

目的?通过设计特异性引物来鉴定广地龙及其混伪品。方法?提取广地龙及其混伪品的DNA。利用通用引物COⅠ序列对广地龙及其混伪品进行PCR扩增,并对扩增产物进行双向测序。通过比对广地龙及其混伪品的COⅠ序列,找出广地龙的变异位点,设计出广地龙的特异性引物,用于广地龙及其混伪品的鉴定。对PCR反应条件退火温度、循环次数、DNA模板量和Taq酶用量进行适应性考察。结果?COⅠ序列不存在特异性,不同物种、不同品种的动物药均可扩增出750?bp大小的片段,无法鉴定广地龙及其混伪品。通过比对广地龙及其混伪品的COⅠ序列,设计出广地龙的特异性引物PA-f/PA-r。在建立的PCR反应体系中,只有广地龙可以获得574?bp的基因片段,其他混伪品未扩增出相应条带。结论?设计的广地龙特异性引物可以准确、成功鉴别广地龙,与其他混伪品区分,为广地龙的品种鉴别提供了有效的方法。      

CYP2E1RsaⅠ/PstⅠ位点多态性与口腔癌易感性的Meta分析

目的:运用Meta的分析方法研究CYP2E1 Rsa Ⅰ/Pst Ⅰ多态性与口腔癌易感性的相互关系.方法:检索VIP,CNKI和PubMed数据库中有关CYP2E1 Rsa Ⅰ/Pst Ⅰ多态性与口腔癌易感性关联研究的文献,以OR值和95％的可信区间为效应指标,应用Rev Man 4.2软件进行Meta分析,并使用STATA 11.0软件对发表偏倚进行检验.结果:纳入12个病例对照研究,共计1259例口腔癌患者和2262例正常对照,Meta分析结果显示,总人群中c1 /c2 vs.c1/c1(OR=1.30,95％CI=1.04～1.62),c1/c2+c2/c2 vs.c1/c1 (0R=1.32,95％CI=1.07-1.64).结论:CYP2E1突变基因型c2可能会增加口腔癌发生的风险.