细胞共培养技术在医药研究中的应用

细胞共培养由于能更好地模拟体内环境,便于更好的观察细胞与细胞、细胞与培养环境之间的相互作用以及探讨药物的作用机制和可能的作用靶点,填补了单层细胞培养与整体动物实验研究的鸿沟,近年来倍受医药领域的关注,成为药物研发、生物制药领域的研究热点.细胞共培养方法包括直接共培养和间接共培养,主要用于疾病病理基础、新型治疗手段以及药物活性筛选的研究.现有的细胞共培养技术主要用于单一药物的药效学研究,用于联合药物相互作用的研究甚少.中药复方之间协同配伍,减毒增效.细胞共培养技术符合中药多成分、多靶点的作用特点,这对于未来探讨中药联合用药对机体的作用及机制的研究具有一定参考价值,为中药及复方研究提供了一种新的手段.该文就细胞共培养技术的方法与运用进行了概述,并对该技术运用于中药及复方的研究进行了展望.     

不同种除草剂在半夏种植中的初步筛选及其应用研究

目的研究如何减轻半夏Pinellia ternata(Thunb.)B re it种植中所遇到的杂草危害,为大规模田间种植的高产稳产提供保证,以降低投入,实现利润最大化。方法利用完全随机实验设计研究不同种除草剂的除草效果、产生的药害,提出合理除草优化组合。结果乙草胺在禾本科杂草除草效果上有显著优势,药害较低;乐邦综合除草有效率接近90%,效果好时间长;克无踪除草迅速但产生药害也很大。结论前1年生地除草使用克无踪,第2年春播后喷施乙草胺,杂草多发地点施用1次施田补,第1次倒苗后喷洒乐邦。熟地春季使用1次乙草胺,夏季使用1次乐邦即可。     

戊二酰辅酶A脱氢酶基因沉默及高浓度赖氨酸对BRL肝细胞活性的影响

目的探讨戊二酰辅酶A脱氢酶(GCDH)基因沉默和赖氨酸代谢物蓄积对肝细胞活性的影响。方法将BRL肝细胞分为正常对照组、阴性对照组和GCDH沉默组。构建含靶向沉默GCDH基因的sh RNA慢病毒载体,分别用该病毒和阴性对照病毒感染GCDH沉默组和阴性对照组BRL肝细胞。感染后细胞再用含5 mmol/L赖氨酸培养基培养。免疫荧光技术检测慢病毒感染效率;Western blot法检测GCDH蛋白表达水平;MTT法检测细胞活性,Hoechest 33342染色检测细胞凋亡,Western blot法检测细胞凋亡的经典指标Caspase3水平。结果构建的慢病毒可有效沉默肝细胞GCDH表达(P0.01)。MTT及Hoechest 33342染色检测各组间细胞活性及细胞凋亡比较差异无统计学意义(P0.05)。Caspase3蛋白表达在各组间比较差异亦无统计学意义(P0.05)。结论 GCDH基因沉默和赖氨酸代谢物蓄积对肝细胞无明显损伤作用。     

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近年来,随着儿科内分泌遗传代谢病专业不断壮大以及与国外学术交流的增多,国内儿科内分泌遗传代谢病领域的研究进展不断创新。2011年10月13-16日第11届全国儿科内分泌遗传代谢病学术会议在山东烟台隆重举行,来自全国各地的450名正式代表出席了会议,会议收到论文168篇,基本反映了我国儿科内分泌遗传代谢病诊治及研究的整体水平。现就2011年国内儿科内分泌遗传代谢     

儿童肾癌的临床及CT和病理特点分析

目的 探讨儿童肾癌的临床、CT及病理特点,积累其临床诊治经验.方法 回顾性分析2014年至2016年单中心收治的7例儿童肾癌患儿的临床、CT、病理资料,并随访其生存情况.就诊时年龄5～12岁,女4例,男3例,左侧5例,右侧2例.临床表现多为血尿(4/7)、腹部包块(3/7)、腰痛(1/7).CT平扫肿瘤呈低密度,多位于上下极,可见钙化(6/7)及坏死区,增强特点多为“快进快出”(4/7),部分为“快进慢出”(2/7).结果 7例患儿全部获得随访,随访时间8～35个月.1例肿瘤位于左腹膜后,确诊时已发生腹膜后及颈部淋巴结转移,行肿瘤部分切除活检,术后5个月死亡.1例为复发性肾癌,行肾窝肿瘤切除加腹膜后淋巴结清扫,术后5个月出现淋巴结转移,予放化疗后带瘤生存.余5例患儿均行根治性肾切除加淋巴结清扫,术后均无瘤生存.病理多为肾透明细胞(5/7)及乳头状肾细胞癌(2/7),癌细胞呈巢团状、乳头状、腺管样结构分布,可见砂粒体(6/7),核级多为3～4级.4例患儿淋巴结转移,共清扫出60枚淋巴结,淋巴结阳性率为16.7％.5例加做免疫组化,TFE3 (4/5)、CD10 (5/5)、Kb67 (4/5)、E-cardherin (4/5)、Vinentin (3/5)、CK(3/5)阳性率较高,4例确诊为MiT家族异位性肾癌.结论 儿童肾癌多发生于年长患儿,有其特有的临床、CT及病理特点,MiT家族异位性肾癌常见,病理及免疫组化是确诊和分型的主要手段.     

养阴和络中药对早期2型糖尿病游离脂肪酸的影响

目的 观察养阴和络中药对早期2型糖尿病游离脂肪酸(FFA)的影响.方法 将101例早期2型糖尿病患者随机分为2组.治疗组50例予银杏叶片和六味地黄软胶囊口服,对照组51例子银杏叶片安慰剂和六味地黄软胶囊安慰剂,2组均改善生活方式及予降血糖、降血压等基础治疗措施.2组均连续治疗6个月后观察FFA变化情况.结果 2组治疗前后FFA比较差异均有统计学意义(p＜0.01,P＜0.05),2组治疗后比较差异无统计学意义(P＞0.05).以治疗6个月时糖化血红蛋白(HbAlc)分层,HbAlc≤6.5%的患者.治疗组治疗前后FFA比较差异有统计学意义(P＜0.01),但2组治疗前后差值比较差异无统计学意义(P＞0.05);以治疗前甘油三酯(TG)分层,TG＞1.7 mmol/L 的患者,治疗组治疗前后FFA比较差异有统计学意义(P＜0.01),但2组治疗前后差值比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 改善生活方式加西医基础治疗可使FFA下降,对治疗6个月时HbAlc≤6.5%的患者,即治疗后总体血糖水平控制达标的患者,加用养阴和络中药治疗能使FFA下降;对治疗前TG＞1.7 mmol/L的患者,即治疗前TG较高、符合代谢综合征脂代谢异常的患者,加用养阴和络中药治疗可降低FFA.     

Elucidating the mechanism of nucleation inhibition of pathology crystallization of gout based on the evidence from amorphous form and in solution

The first gout attack in a hyperuricaemic patient may be regarded as a nucleation event which is caused by monosodium urate monohydrate (MSUM) deposition in the synovial fluid. The effect of Tailor-Made Inhibition (TMI) may be effective as drugs for the prevention of aberrant nucleation and crystallization. Therefore, the understanding of the underlying mechanisms in inhibiting the MSUM nucleation by TMI has proven to be of great significance. Yet most of the published studies about nucleation inhibition have tended to focus on simpler molecular models with a hydrogen-bonded acceptor and donor, which may be not suitable for the uric acid molecule with multiple hydrogen-bonded acceptors and donors under physiological conditions. Herein, the mechanisms of nucleation inhibition of MSUM were explored in a simulated biological environment (0.15 M Na⁺ and pH 7.40) in the presence and absence of TMI. And the evidence of nucleation inhibition by TMI in solution and the amorphous form of MSUM was investigated by HNMR, IR, Raman, PXRD, Dynamic light scattering (DLS), induction time measurements, and density functional theory (DFT) calculations. Results showed that the inhibition comes from a combination of kinetic and thermodynamic effects, with an impact of kinetics as the TMI inhibition effects far exceeded what could be accounted for by changes in usual factors of classical nucleation theory. The data demonstrated that the complex between urate and TMI disturbed the formation of two-dimensional sheets of sodion and purine rings parallel to the (011) plane and further impeded the formation of a three-dimensional structure with aromatic stacking interactions in solution. To our knowledge, the nucleation inhibition of TMI is achieved by suppressing interplanar stacking, which is a mechanism proposed for the first time.

Xanthine, a tailor-made inhibitor, could suppress nucleation in the crystallization of gout pathology by blocking the dominant interplanar accumulation in a solution.     

SKY椎体后凸成形术与PVP对骨质疏松多椎体压缩骨折责任椎体选择性治疗的比较

目的探讨SKY椎体后凸成形术与PVP对骨质疏松多椎体压缩骨折责任椎体选择性治疗的疗效对比,评价治疗骨质疏松多椎体压缩骨折责任椎体的有效方法。方法分别于术前、术后2周、术后6月、18个月进行疼痛强度视觉类比评分,观察患者的疼痛症状及生活治疗改善程度。结果 52例手术均成功完成,每个椎体的骨水泥灌注量为3-6mL。两组手术方法术前、术后VAS评分P值分别<0.05,余比较不具统计学意义,两组手术方法术前、术后SF-36评分P值分别<0.05,余比较不具统计学意义。结论无论是SKY椎体后凸成形术或PVP对骨质疏松多椎体压缩骨折选择性治疗均可取得良好的效果,相比PVP,SKY椎体后凸成形术更具优势,但价格昂贵,限制了它的使用。     

NO对石斛类原球茎生长及继代培养的影响

为提高组织培养的药用石斛生物碱含量,利用一氧化氮(NO)的供体硝普钠(SNP)处理霍山杂交石斛液体悬浮培养的类原球茎。结果表明,NO对类原球茎生长有一定的抑制作用,但有利于生物碱的积累。NO处理的类原球茎在生物碱积累高峰期45 d前,发生活性氧迸发,过氧化氢抗氧化酶(CAT)活性提高明显。类原球茎继代培养表明,不经NO诱导的S0、S00、S0003代类原球茎的蛋白质SDS电泳条带和POD同工酶条带基本一致,NO处理使蛋白质条带和POD同工酶条带出现差异性。NO处理后类原球茎生物碱含量的提高不能在继代培养中得到保持。     

腕管镜及改良小切口松解法治疗糖尿病腕管综合征的疗效分析

目的 探讨腕管镜腕管松解术和改良小切口腕管松解术治疗糖尿病腕管综合征的临床疗效和安全性差异.方法 回顾性分析腕管综合征合并糖尿病患者86例,其中43例患者行双孔道腕管镜腕管松解术(A组),43例患者行改良小切口腕管松解术(B组),随访10 ～ 24个月,统计两组患者的手术时间、住院时间、恢复工作时间、术后并发症和临床疗效.结果 A组和B组患者的优良率分别为93.02％和90.70％,两组的优良率比较差异无统计学意义(P＞0.05);A组患者的住院时间[(5.5±2.7)vs(6.8±2.9)d]及术后恢复工作时间[(19.3±3.1)vs(21.5±3.3)d]少于B组,差异有统计学意义(P＜0.05),而两组患者的手术时间、术后并发症发生率比较均差异无统计学意义(P＞0.05).结论 腕管镜腕管松解法和改良小切口腕管松解法均是治疗糖尿病腕管综合征的有效且安全的手术方法,腕管镜腕管减压术患者住院时间短、术后恢复快,对于机体修补能力较差的糖尿病患者更为适合.