冬凌草甲素诱导肝癌细胞凋亡中Bcl-2及端粒酶变化的研究

目的：探讨冬凌草甲素诱导人肝癌细胞BEL-7402凋亡中Bcl-2表达及端粒酶活性的变化。方法：以8,16,24,32 μmol·L^-1不同浓度的冬凌草甲素作用于体外培养的BEL-7402细胞,应用流式细胞仪检测细胞凋亡,Hoechst 33258荧光染色法。Western blot 观察Bcl-2 ,Bax 表达变化。应用PCR-ELISA及RT-PCR法检测细胞凋亡前后端粒酶活性及端粒酶hTERT mRNA表达水平的变化。结果：冬凌草甲素可诱导肝癌细胞BEL-7402发生细胞凋亡, 具有明显的量-效与时-效关系。冬凌草甲素作用60 h后,在Hoechst 33258荧光染色图片上可见核浓缩及核碎裂等典型的细胞凋亡特征。凋亡过程中Bcl-2蛋白表达的降低和 Bax蛋白上调,同时端粒酶hTERT mRNA的表达水平及端粒酶活性均明显降低。结论：冬凌草甲素在诱导肝癌细胞BEL-7402发生细胞凋亡过程中,能降低端粒酶hTERT mRNA的表达水平和端粒酶活性,同时抗凋亡蛋白Bcl-2表达的降低和促凋亡蛋白 Bax上调。     

出血性中风急性期证候分布及变化规律分析

目的探讨出血性中风急性期证候分布及动态变化规律。方法将530例出血性中风急性期患者分为风证、火热证、痰证、血瘀证、气虚证、阴虚阳亢证、瘀热证7个基本证候,分别于入院时及入院后第3、5、7、11、21天共6个时间点进行证候调查,研究证候的分布、变化规律。结果出血性中风急性期证候分布呈现一定的规律性,各时间点瘀热证始终占据第一位,风证、火热证基本保持不变,随着时间延长,痰证比例下降,血瘀、气虚比例上升,阴虚阳亢证始终处于最后一位。将各证候例数按时间点进行纵向比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论瘀热证是出血性中风急性期的主要证候,火热证、风证为常见证候,呈现出向血瘀、气虚演变的趋势。     

濒危野生药材岩黄连人工栽培技术

岩黄连Corydalis saxicolaBunting为石山地区特有的多年生草本药用植物,在桂西北地区常用于消炎止痛、拔毒、治疗疥疮中毒,亦是治疗乙型肝炎、肝硬化、肝癌等疾病的中草药。目前,岩黄连的野生资源日渐减少,已无法满足生产之急需。文章总结了作者十多年来对岩黄连进行引种驯化与人工栽培繁殖试验的研究成果,对岩黄连的生态生物学特性以及种植栽培、田间管理、病虫害防治、采收加工等种植栽培过程中的关键技术进行了总结,为开展岩黄连的中药材生产质量管理规范(GAP)种植提供了重要的参考。     

两色金鸡菊醇提物对自发性高血压大鼠血压和血浆ET,AngⅡ,CGRP的影响

目的：观察新疆两色金鸡菊醇提物对自发性高血压大鼠（SHR）血压、心肌重构和血浆内皮素（ET）、血管紧张素（Ang）Ⅱ和降钙素基因相关肽（CGRP）含量的影响。方法：将SHR分为模型组、两色金鸡菊醇提物高、中、低剂量组（3.2,1.6,0.8 g·kg^-1）、卡托普利组（4 mg·kg^-1）及杜仲平压片组（187.5 mg·kg^-1）,连续ig给药4周。采用无创血压计观察其对血压的影响;计算各组大鼠左心室质量指数（LVWI）和心脏指数;采用放射免疫法测量血浆中ET,AngⅡ,CGRP含量的变化。结果：干预4周后,各给药组大鼠血压均明显下降（P<0.01）;与模型组相比各组大鼠LVWI均下降,其中两色金鸡菊醇提物高剂量组和卡托普利组的下降存在显著差异（P<0.01）,且高剂量组和卡托普利组心脏指数降低 （P<0.05）;与模型组相比,两色金鸡菊醇提物高、中剂量和卡托普利可明显减少血浆中ET和AngⅡ的含量（P<0.01）,同时血浆中CGRP的含量有增加的趋势。结论：两色金鸡菊醇提物具有一定的降压作用,可以改善SHR心室肥厚情况,其作用机制与抑制体内肾素-血管紧张素系统和改善内皮功能有关。     

基于CDDP标记的重楼属种质资源鉴定及遗传多样性分析

目的研究重楼属植物遗传多样性,并为其种质资源的快速鉴定提供有效方法。方法采用CDDP分子标记方法对13份不同的重楼种质资源的遗传多样性进行分析,并按照CODE128条形码编码规则为重楼属植物进行编码。结果 11条引物共扩增了80个条带,其中多态性条带73个,多态性比率91.25%,等位基因数(Na)为1.912 5,有效等位基因数(Ne)为1.589 6,Nei’s遗传多样性指数(H)为0.342 3,Shannon信息指数(I)为0.507 0。UPGMA聚类分析表明,重楼属植物遗传多样性丰富。在CDDP分子标记的基础上依据CODE128条形码编码规则为重楼属植物构建了条形码分子身份证。结论重楼属资源遗传多样性丰富,CDDP分子标记可用于重楼属种质资源的鉴定及遗传多样性分析,且构建的条形码分子身份证检测灵敏、快捷,可用于相关科研工作和工业生产中重楼属植物的鉴定。     

墓头回提取物作用白血病K562细胞蛋白双向电泳方法的建立

目的建立适用于体外培养的K562细胞总蛋白的双向电泳图谱,提高电泳分辨率和重复性,以进一步了解中药墓头回作用于白血病细胞的新机制。方法采用标准裂解法提取K562细胞总蛋白,后续进行丙酮沉淀和三氯乙酸/丙酮沉淀,分别比较一步裂解法所得蛋白和丙酮沉淀法、三氯乙酸/丙酮沉淀法所得蛋白的双向电泳图谱,优选最佳的样品制备方法。此外在等电聚焦时,聚焦电压在传统聚焦条件上进行优化。结果 丙酮沉淀法不仅能减少蛋白降解,而且增加蛋白的溶解性,因此丙酮沉淀法所得蛋白的双向电泳图谱显示出更好的溶解性和重复性,在聚焦条件上对传统聚焦条件的优化使横向和纵向拖尾有明显改善,所得图谱蛋白点更清晰,分离更完全,能获得分辨率较高的双向电泳图谱。结论 在标准裂解液提取蛋白基础上结合丙酮沉淀法更适于制备K562细胞的双向电泳样品,等电聚焦(IEF)电泳时适当延长除盐时间能更有效的分离K562细胞全蛋白,而且后续实验证明此方法同样成功建立了墓头回作用白血病K562细胞蛋白和肿瘤组织蛋白2-DE图谱。     

美味猕猴桃根的化学成分

目的：研究美味猕猴桃（A.deliciosa）根中的化学成分。方法：采用柱色谱分离,通过理化常数和光谱分析确定化合物的结构。结果：从醋酸乙酯部分分离得到12个化合物,经鉴定分别为β-谷甾醇（1）,正十八烷酸（2）,异莨菪亭（3）,2,2-dimethyl-6-chromancarboxylic acid（4）,秦皮素（5）,七叶内酯（6）,伞形花内酯（7）,香草酸（8）,原儿茶酸（9）,香草酸4-O-β-D-葡萄糖苷（10）,5,7-二羟基色原酮（11）,tachioside（12）。结论：化合物2-11为首次从该属植物中分离得到。     

血必净注射液对重症脓毒症患者Toll样受体4及下游细胞因子的影响

目的:探讨血必净注射液对重症脓毒症患者Toll样受体4(TLR4)及下游细胞因子的影响。方法:将40例严重脓毒症患者随机分为常规治疗组(20例)和血必净治疗组(20例);以同期20例健康志愿者作为健康对照组。常规治疗组按严重脓毒症治疗指南进行治疗;血必净治疗组在常规治疗组的基础上加用血必净注射液100mL静脉滴注,q12h,连续7天。健康对照组于清晨取血一次。常规治疗组与血必净治疗组于治疗前、治疗后第1、3、7天清晨取血。采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α),流式细胞仪检测单核细胞膜表面TLR4蛋白表达,半定量逆转录-聚合酶链式反应法(RT-PCR)检测单核细胞TLR4 mRNA表达。结果两组患者之间治疗前IL-6、TNF-a、TLR4蛋白和TLR4mRNA的表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05),但均明显高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。两组患者治疗后IL-6、TNF-a、TLR4蛋白和TLR4mRNA的表达水平与本组治疗前比较均明显下降,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),且血必净治疗组下降幅度大于常规治疗组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:重症脓毒症患者IL-6、TNF-a、TLR4蛋白和TLR4mRNA的表达水平均升高;血必净可能通过下调TRL4蛋白及TRL4mRNA水平抑制下游细胞因子的释放。     

732型阳离子交换树脂分离猫豆中的猫豆胍

目的 考察732型阳离子交换树脂分离猫豆中猫豆胍(MDG)的工艺参数.方法 以猫豆胍洗脱率为考察指标,运用正交实验法考察了洗脱液浓度、用量和洗脱速度对洗脱效果的影响.结果 在考察范围内,最佳分离条件为:150倍量1%氨水,洗脱速度5.0 ml/min.在优化条件下,洗脱率为60.94%.结论 该工艺方法简单,成本低廉,适于工业大生产.     

4种人工牛黄的X衍射Fourier谱分析

目的 为弥补珍贵中药材天然牛黄之奇缺,应用粉末Ｘ衍射Ｆｏｕｒｉｅｒ谱,分析建立人工牛黄的Ｘ衍射特征标记峰,并对其进行鉴定。方法 应用粉末Ｘ衍射分析法对４种人工牛黄样品及猪去氧胆酸、胆酸的Ｘ衍射Ｆｏｕｒｉｅｒ谱进行分析计算。结果 获得人工牛黄的Ｘ衍射特征标记峰与图形振扑规律,并确证猪去氧胆酸、胆酸的存在。结论 Ｘ衍射分析法是鉴定与识别中药复方制剂一种可行方法。