聚合酶链反应标记轮状病毒地高辛素探针的初步应用

目的为探讨聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术标记的地高辛素（ＤＩＧ）探针的特异性和敏感性。方法用聚合酶链反应技术制备地高辛素标记的人类轮状病毒（ＨＲＶ）ｃＤＮＡ探针，经ｃＤＮＡ－ＲＮＡ斑点杂交。结果该探针具ＨＲＶ特异性，可检出１０ｐｇ的ＲＮＡ。应用该项技术检测了１２０份婴幼儿腹泻粪样标本，其阳性率为６５％，明显高于ＰＡＧＥ方法（４９．１％）的阳性率。结论ＰＣＲ方法直接制备地高辛素标记的ｃＤＮＡ探针方便、快速、特异性好、标记率高。     

湖南省两地区成瘾物质使用状况调查报告：使用率及相关因素

本文采用整群抽样的方法，对湖南两地区城乡共２３７７人（１５岁以上）的成瘾物质使用状况进行调查，其中男１１７９（４９．６％）人，女１１９９（５０．４％人），平均年龄男女分别为４１．２（ＳＤ＝１７．５）和４３．４（ＳＤ＝１８．６）。结果表明，饮酒率男性为５７．５％，女性为１７．３％，吸烟率男女分别为６８．２％和１１．７％；饮酒者多集中在每月饮１次左右的人群中（男５７．９％，女７７．９％），但吸烟者多集中在每日吸２０支及以上（男５２．４％，女４２．９％）的人群中。除解热镇痛剂外，男性各种精神活性物质的使用频率及剂量皆男高于女性，开始使用的年龄及成瘾的年龄男性低于女性；性别、使用频度、最早使用的年龄、婚姻与饮酒、吸烟量关系最为密切。有１４人使用过鸦片类物质，４人使用过兴奋剂。作者讨论了我国成瘾物质使用的特点，指出经济水平、社会文化背景等因素与我国社会性成瘾物质的使用有密切关系。     

Dipeptidyl peptidase 9 sets a threshold for CARD8 inflammasome formation by sequestering its active C-terminal fragment

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Expression of matrix Gla protein and osteonectin mRNA by human aortic smooth muscle cells.

BACKGROUND: Recent data indicate that matrix proteins such as matrix Gla protein (MGP) and osteonectin (ON) influence not only mineralization of vasculature but smooth muscle cell (SMC) differentiation. METHODS: We examined whether MGP and ON are expressed by human aortic SMCs in vivo using Northern blotting, in situ hybridization and immunohistochemistry. RESULTS: MGP and ON mRNAs were strongly expressed in the aorta without atherosclerosis from newborn and four young subjects up to 10 years old. In the aorta from 15 adult cases, MGP and ON mRNAs were decreased as atherosclerosis developed. We determined cell type and distribution of the MGP- and ON mRNA-expressing cells by in situ hybridization and immunohistochemistry. In the aorta obtained from newborn and young subjects, SMCs in the media and thin intima expressed MGP mRNA and, to a lesser extent, ON mRNA. In the adult aorta with fibrous thickening, MGP mRNA was expressed by intimal SMCs and subpopulation of medial SMCs. Osteonectin mRNA was expressed mainly by intimal SMCs and few medial SMCs. Double immunohistochemical staining revealed that both MGP- and ON protein-expressing cells were positive for anti-alpha-smooth muscle actin antibody, aortic SMCs. CONCLUSIONS: These results suggested that MGP and ON expression by aortic SMCs might be regulated by the degree of atherosclerosis and SMC differentiation in human aorta.     

后路经皮内窥镜下颈椎椎间盘切除术的解剖学研究及临床意义

目的　探讨后路经皮内窥镜下颈椎椎间盘切除术的安全范围。 方法　选取20具成人颈椎标本，分别测量C3/C4至C6/C7各节段左右两侧V点与硬脊膜外侧距离、V点与椎动脉水平及垂直距离、小关节面宽度，并进行统计学比较。 结果　V点与硬脊膜外侧距离为：左（1.31±0.32）~（2.46±0.60） mm，右（1.29±0.35）~（2.75±0.45） mm，各节段间差别有统计学意义，同一水平左右差别无统计学意义；V点与椎动脉水平距离为：左（2.17±0.42）~（5.10±0.93） mm，右（1.99±0.39）~（5.00±0.71） mm，各节段间差别有统计学意义，同一水平左右差别无统计学意义；V点与椎动脉垂直距离为：左（11.05±1.06）~（13.47±1.12）mm，右（11.33±1.20）~（13.61±1.01）mm，同一水平左右侧差别有统计学意义，节段间比较C3/C4与C4 /C5无明显差异，其余节段间差别均有统计学意义；小关节面宽度为：左（10.79±0.93）~（12.66±0.88） mm，右（10.86±0.68）~（12.54±0.70）mm。 结论　后路经皮内窥镜下颈椎椎间盘切除术的安全范围宜控制在距V点内侧C₃/C₄至C₆/C₇各水平1.20~2.00 mm；磨除范围距V点外侧C₃/C₄至C₆/C₇各水平超过2.00~5.00 mm时可能到达椎动脉体表投影处，因此需注意此时的手术进入深度宜控制在：C₃/C₄~C₆/C₇各节段距V点11.00~14.00 mm。     

Graves病患者外周血IL-6、TNF-α水平表达的变化及意义

目的：探讨IL-6、TNF-α与Graves病（GD）发病之间的联系及其意义。方法：采用ELISA法测定83例GD患者治疗前后外周血IL-6、TNF-α水平变化，并与，13、T4、HT3、FT4、TSH作多元相关性分析。结果：（1）GD患者IL-6、TNF-α水平显著高于正常人（P〈0．0001），且两者间呈正相关（P〈0．001）。（2）IL-6、TNF-α与，13、T4、HT3、FT4均呈正相关（P〈0．001），而与TSH呈负相关（P〈0．001）。（3）经治疗后IL-6、TNF-α．水平明显下降（P〈0．001），但仍高于对照组（P〈0．01）。结论：推测IL-6、TNF异常升高可能与GD免疫学发病机制有关，经治疗后IL-6、TNF-α水平明显下降，提示抗甲状腺药物可能具有一定的免疫调节作用。     

变异链球菌葡聚糖结合蛋白D基因失活菌株的构建和鉴定

目的利用基因打靶技术构建变异链球菌葡聚糖结合蛋白D基因（gbpD）失活株,用于葡聚糖结合蛋白D基因功能的研究.方法体外培养变异链球菌UA159菌株并以其基因组为模板,对gbpD基因内部序列进行PCR扩增,连接自杀载体pVA8912,分别用酶切及PCR鉴定;转化变异链球菌UA159株,用PCR及Western blot鉴定.结果经鉴定PCR产物及插入片段大小与预期值相符,且为所需目的基因片段,成功构建了自杀质粒pVA8912-gbpD;经PCR鉴定及Western blot鉴定,gbpD基因失活株基因组中gbpD基因内部成功插入目的片段,且该菌株不表达GbpD蛋白.结论成功构建了用于变异链球菌gbpD基因打靶的自杀质粒和gbpD基因失活株,为该基因功能的研究奠定了基础.     

1例罕见桡侧腕伸肌变异与文献复习

作者于2004年在指导学生对一具90岁男性尸体标本进行解剖时,见其左前臂桡侧腕伸肌区存在有桡侧腕伸副肌(extensor carpi radialis accessorius,ECRA)合并桡侧腕长、短伸肌之间出现两条副肌腱并相互交叉连接的一种罕见的复合变异。     

禽流感H9亚型血凝素单克隆抗体的研制和初步应用

目的：获得特异针对禽流感H9亚型血凝素单克隆抗体。方法：以H9N2亚型病毒制成疫苗免疫BALB／c小鼠，取脾细胞与SP2／0细胞融合，取细胞上清用HI筛选。结果：共获得9株稳定分泌针对血凝素蛋白抗体的杂交瘤细胞；经广谱性和特异性鉴定，所有单抗株均能与所有检测的82株不同年代不同地方不同禽源H9亚型流感病毒大部分分离株反应，且所有单抗株均不与非AIV-H9病毒反应，而其中一株（8E6）能与所有检测的H9亚型病毒株反应。进行Western blot分析显示，其中8株单抗能与AIV的Mr为75000处反应，表明是针对AIVH9HA的单抗。结论：本试验获得9株广谱性特异性很好的单抗，特别是8E6株；这些单抗株为以后作病毒抗原性位点分析、临床检测和流行病学调查提供了良好试剂。     

低营养及低氧状态下NIH3T3细胞增殖及细胞周期的变化及对bFGF的影响

目的： 体外模拟慢性创面缺氧、低营养环境，观察成纤维细胞在该状态下增殖及细胞周期的变化及对外源性生长因子（bFGF）的反应,探讨低氧、低营养条件下成纤维细胞的病理生理变化。方法: 单纯缺氧环境采用厌氧培养箱，通入混合气，氧分压（PO₂）分为27 mmHg和44 mmHg 2个水平；低营养环境则控制培养液新生牛血清（NCS）浓度。用MTT法检测细胞活性以及其对外源性生长因子的反应，用流式细胞仪检测细胞周期。结果: PO₂ 44 mmHg时细胞增殖速度较同期对照组无明显差异；PO₂ 27 mmHg时，细胞增殖速度较同期对照组明显减慢（P<0.01），细胞被阻滞于G₀期，S期细胞比例明显减少，bFGF未显示促增殖作用。NCS浓度为0.5%的低营养状态下细胞增殖速度较同期对照组明显减慢（P<0.01），细胞被阻滞于G₀-G₁期（P<0.01）；bFGF能明显改善低营养状态下的增殖减慢（P<0.01），使G₂-M期细胞比例增加（P<0.05）。结论: 27 mmHg PO₂或NCS浓度为0.5%的低营养环境使细胞阻滞于G₀-G₁期，影响成纤维细胞增殖；bFGF可以改善低营养条件下细胞增殖减慢的状态，但对极度缺氧条件下的成纤维细胞增殖障碍无明显作用。