全文获取类型
收费全文 | 13056篇 |
免费 | 1208篇 |
国内免费 | 637篇 |
专业分类
耳鼻咽喉 | 176篇 |
儿科学 | 176篇 |
妇产科学 | 121篇 |
基础医学 | 1088篇 |
口腔科学 | 195篇 |
临床医学 | 1685篇 |
内科学 | 1338篇 |
皮肤病学 | 272篇 |
神经病学 | 276篇 |
特种医学 | 405篇 |
外国民族医学 | 2篇 |
外科学 | 1001篇 |
综合类 | 3229篇 |
现状与发展 | 4篇 |
一般理论 | 1篇 |
预防医学 | 1384篇 |
眼科学 | 171篇 |
药学 | 1569篇 |
15篇 | |
中国医学 | 1274篇 |
肿瘤学 | 519篇 |
出版年
2024年 | 35篇 |
2023年 | 150篇 |
2022年 | 465篇 |
2021年 | 611篇 |
2020年 | 485篇 |
2019年 | 285篇 |
2018年 | 286篇 |
2017年 | 390篇 |
2016年 | 265篇 |
2015年 | 548篇 |
2014年 | 703篇 |
2013年 | 822篇 |
2012年 | 1197篇 |
2011年 | 1292篇 |
2010年 | 1164篇 |
2009年 | 921篇 |
2008年 | 892篇 |
2007年 | 805篇 |
2006年 | 714篇 |
2005年 | 610篇 |
2004年 | 489篇 |
2003年 | 339篇 |
2002年 | 304篇 |
2001年 | 238篇 |
2000年 | 175篇 |
1999年 | 123篇 |
1998年 | 68篇 |
1997年 | 69篇 |
1996年 | 48篇 |
1995年 | 51篇 |
1994年 | 38篇 |
1993年 | 23篇 |
1992年 | 34篇 |
1991年 | 34篇 |
1990年 | 29篇 |
1989年 | 29篇 |
1988年 | 19篇 |
1987年 | 25篇 |
1986年 | 18篇 |
1985年 | 10篇 |
1984年 | 7篇 |
1983年 | 9篇 |
1979年 | 5篇 |
1978年 | 6篇 |
1976年 | 5篇 |
1975年 | 7篇 |
1974年 | 4篇 |
1973年 | 5篇 |
1972年 | 7篇 |
1971年 | 7篇 |
排序方式: 共有10000条查询结果,搜索用时 31 毫秒
71.
人癌胚抗原重组痘苗病毒转染树突状细胞体外诱导的抗肿瘤免疫 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:研究人癌胚抗原重组痘苗病毒(rV-CEA)转染外周血树突状细胞(DC)后在外体诱导的抗CEA分泌性肿瘤免疫。方法:分离晚期结肠癌患者的外周血单核细胞,在体外用人重组粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)及白细胞介素4(IL-4)培养成DC,再用rV-CEA转染DC后激发自体T细胞,观察其体外激发自体T细胞的增殖能力及其诱导的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对自体CEA分泌性肿瘤细胞的杀伤活性,并与野生型痘苗病毒(W-VV)及无病毒转染的DC所激发的T细胞进行比较。结果:经rV-CEA转染的DC能显著刺激自体T细胞的增殖,其激活的T细胞对CEA分泌性自体肿瘤细胞具有特异性杀伤作用。结论:rV-CEA转染的DC可以诱导体CEA分泌性肿瘤免疫。 相似文献
72.
目的 研究1个Crouzon综合征家系及1例散发的Crouzon综合征患者的成纤维生长因子受体2(fibroblast growth factors receptor 2,FGFR2)基因突变情况.方法 在1个Crouzon综合征家系的10名成员,和另一例散发者的外周血提取基因组DNA,PCR扩增FGFR2基因的第8和10外显子(部分家族成员仅扩增第8外显子),产物纯化后直接进行DNA测序检测突变.结果 家系中3名成员及另1例散发者FGFR2基因第8外显子的833位核苷酸发生G→T的转换突变,该突变为错义突变,使该位点所编码的氨基酸由半胱氨酸变为苯丙氨酸(C278F).该突变为杂合子突变.结论 FGFR2基因突变是Crouzon综合征致病原因. 相似文献
73.
人乳头瘤病毒18型L1-E6、L1-E7嵌合基因表达载体的构建及表达 总被引:6,自引:1,他引:6
目的 构建HPV 18 L1-E6,L1-E7嵌合基因的表达载体,并在CHO细胞中表达。方法 克隆HPV18 L1-E6和L1-E7基因,插入中介载体pGEMT-Easy中并测序鉴定。采用PCR定点突变法,突变L1-E6,L1-E7基因序列中与转化作用相关的位点,分别与L1基因连接后插入真核表达载体pVAX1,构建真核表达质粒pVAX-1L1 E6Mxx,L1E7Mxx。用磷酸钙沉淀法,转染CHO细胞,以抗HPV-18L1,抗E6和抗E7特异性单克隆抗体(mAb)做ELISA和免疫细胞化学法检测。结果 ELISA检测显示,转染各种pVAX1-LIE6Mxx-L1E7Mxx融合蛋白表达质粒的细胞提取物的P-N值均>2.1;免疫细胞化学检测,在胞浆,胞核可见棕黄色颗粒。结论 我建的pVAX1-L1E6Mxx-E7Mxx融合蛋白质表达质粒,可在转当细胞内表达相应的L1-E6Mxx和L1-E7Mxx蛋白,为今后进行DNA疫苗的研究奠定了基础。 相似文献
74.
ADA活性紫外吸收测定法的改良及复感儿淋巴细胞该酶活性的检测 总被引:2,自引:0,他引:2
检测了42例健康儿童和17例反复上呼吸道感染患儿(复感儿)的血淋巴细胞腺苷脱氨酶(ADA)活性,结果表明:复感儿的血淋巴细胞中ADA活性较健康儿童低下,且大多同样伴有不同程度的免疫功能低下;从复感儿组中筛选了两侧ADA活性和免疫功能明显低下的患儿,拟采用这两例患儿的血淋巴细胞进行ADA-SCID基因治疗的实验研究。 相似文献
75.
妊娠17~37周胎儿可溶性白介素2受体和NK细胞含量的变化 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:探讨妊娠17~37周正常和宫内感染时胎儿外周血可溶性白介素2受体(Soluble interleuldn-2 receptor,sIL-2R)和自然杀伤细胞(Natural killer,NK)含量的变化。方法:超声引导下行脐带穿刺术,收集129例胎儿外周血,包括97例正常对照组胎儿血,32例宫内感染组(单纯疱疹病毒感染、弓形虫感染、风疹病毒感染)胎儿血,采用双色免疫荧光标记流式细胞仪技术测定胎JLPF周血NK细胞百分率,双抗体夹心酶联免疫吸附试验测定胎JLPF周血中sIL-2R的含量,分析生理状态下胎儿外周血NK细胞、sIL-2R的状况和宫内感染时NK细胞和sIL-2R含量的变化。结果:妊娠17—37周胎儿外周血NK细胞、sIL-2R含量不随孕周改变,r(NK)=-0.03,P〉0.05;r(sIL-2R)=0.167,P〉0.05,宫内感染时NK细胞含量减少,sIL-2R含量增多,与正常对照组相比差异有显著意义;t(NK)=4.29,P〈0.01;t(sIL-2R)=-5.833,P〈0.01。结论:妊娠17—37周胎儿外周血有一定量的NK细胞和sIL-2R存在,但机体免疫功能仍不完善,宫内感染时机体容易出现免疫抑制状态。 相似文献
76.
目的 探讨IL-2/Fc融合表达后对HBVpreS2S基因疫苗诱导免疫反应的佐剂效应.方法 采用HBV preS2S DNA疫苗作为基础免疫,重组质粒pcDNA3.1IL-2/Fc作为佐剂加强免疫BALB/c小鼠,采用0、2、4周的方案接种,检测各次接种后抗体水平.初次免疫后7周,测定免疫脾细胞的杀伤活性、增殖活性和细胞因子的分泌水平.结果 pcDNA3.1IL-2/Fc作为佐剂在HBV preS2S注射3 d后免疫组小鼠抗体滴度、免疫脾细胞的杀伤活性和增殖活性、TH1型细胞因子的分泌水平,均比各对照组明显增强.结论 IL-2/Fc是有效的HBV preS2S DNA疫苗佐剂之一. 相似文献
77.
目的 筛选和鉴定幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)中性粒细胞激活蛋白(neutrophil-activating protein,NAP)的有效抗原表位,为Hp疫苗的研制提供基础.方法 以抗NAP的单克隆抗体作为固相筛选分子,经3轮吸附-洗脱-扩增免疫,筛选噬菌体随机7肽库,随机挑选噬菌体克隆,经噬菌体酶联免疫吸附试验(ELISA)、交叉反应试验及竞争抑制试验鉴定阳性克隆,测定阳性克隆所携带DNA序列并进行计算机辅助分析.以制备的阳性噬菌体克隆短肽液免疫小鼠,免疫血清与NAP经Western blot分析,以验证NAP的模拟表位.结果 经3轮免疫筛选后挑选到45个阳性克隆,经ELISA鉴定有12个阳性克隆,测序结果显示5种表位,其中P17噬菌体展示肽FAHLATQ与NAP氨基酸序列(137~143)高度同源,位于NAP高抗原区域(118~140),免疫血清可识别NAP.结论 用噬菌体随机7肽库成功筛选到了NAP的模拟表位,为基于NAP的诊断和疫苗的研制提供了基础. 相似文献
78.
我们观察了幼年小白鼠腘淋巴结淋巴窦的超微结构,窦壁由腔面向外一般出3层构成:(1)一层连续的内皮;(2)由一薄层细胞间质构成的基膜;(3)一层外膜网状细胞及其扁平的突起。内皮细胞核扁圆,异染色质细小,核仁不明显,胞质极薄,含粗面内质网极少,而有大量的吞饮小泡。细胞邻接处相互重叠或嵌合,有20nm宽的间隙相隔。有的地方可见不发达的细胞连接。当巨噬细胞或淋巴细胞穿越内皮时,可出现临时性间隙,内皮边缘与穿越细胞相贴。基膜由电子透明的无定形基质及细的胶原原纤维构成。外膜网状细胞的核异染色质较多,核仁明显,胞质丰富,含许多粗面内质网而很少吞饮小泡。外膜网状细胞之间常见0.5μm宽的间隙。在窦腔内有巨噬细胞、淋巴细胞及星状的网状细胞等。由于小白鼠腘淋巴结的淋巴窦小,故窦内星形的网状细胞很少,其超微结构特点,与外膜网状细胞及淋巴组织内的网状细胞相似,在突起的切面上,常见包有小束的胶原原纤维。巨噬细胞较多,形态不规则,常贴附于内皮细胞表面,核椭圆,常有凹陷,胞质丰富,含许多溶酶体。在取材前1h,于足垫注射中国墨汁的小鼠,巨噬细胞吞噬了大量粗的墨汁颗粒。本文认为,淋巴窦壁可能具有一定的屏障作用。 相似文献
79.
槲皮素对U937细胞系抑制增殖和诱导凋亡作用的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 探讨黄酮类化合物槲皮素(Que)对人类单核细胞白血病U937细胞系的抑制增殖和诱导凋亡的作用。方法 应用MTT法检测不同浓度槲皮素对U937细胞的增殖抑制作用;AO/PI荧光染色后倒置荧光显微镜下观察细胞形态学变化;琼脂糖凝胶电泳测定细胞DNA的片段化;应用流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期分布。结果槲皮素能明显抑制U937细胞增殖,并存在剂量-效应关系和时间-效应关系;诱导U937细胞出现凋亡所具有的形态学和生化特征;随着槲皮素浓度升高,凋亡细胞和坏死细胞比例增加;将细胞特异性地阻滞在S期,出现凋亡峰。结论 槲皮素能抑制U937细胞增殖,诱导细胞凋亡,并具有细胞周期特异性。 相似文献
80.
Wai-Ping Fung-Leung Valerie A. Wallace Dawn Gray William C. Sha Hanspeter Pircher Hung-Sia Teh Dennis Y. Loh Tak W. Mak 《European journal of immunology》1993,23(1):212-216
During thymic development, immature thymocytes expressing major histocompatibility complex (MHC) class I-restricted T cell receptors (TcR) differentiate into CD8+ T cells with cytolytic functions. To evaluate the role of CD8 in positive and negative selection during thymic ontogeny, mice rendered CD8-null by gene targeting were bred with three lines of transgenic mice expressing unique MHC class I-restricted TcR. In all three instances CD8 was required for positive selection of MHC class I-restricted transgenic T cells. The efficiency of positive selection decreased in accordance with a reduced level of CD8 expression on thymocytes. Surprisingly, there was a differential requirement for CD8 expression in negative selection of MHC class I-restricted thymocytes, depending on the antigen specificity of TcR. These observations show that CD8 is essential for positive selection but is differentially required for negative selection of MHC class I-restricted T cells. Thus thymic selection, at least for negative selection, can occur in the absence of the CD8 accessory molecule. 相似文献