Expression, purification and molecular modeling of recombinant fibrinogenase [IV], a metalloproteinase from Deinakistrodon acutus venom.

A novel metalloproteinase, recombinant fibrinogenase IV (rFIV(a)), was expressed and purified from Deinakistrodon acutus venom. It was a single chain protein with an apparent molecular weight 27 kDa and an isoeletric point of pH 7.1. RFIV(a) cleaved preferentially the Aalpha-chain and also cleaved Bbeta, gamma-chains of fibrinogen when the incubation time was prolonged. The proteolytic activity was inhibited by EDTA, l-cysteine, and DTT, indicating rFIV(a) was a metalloproteinase requiring disulfide bonds for its activity. It kept above 85% of the initial activity from pH 4.5-11, showed an equal maximum activity at the temperature range from 30 to 50 degrees C, and was inactivated by Zn2+, Cu2+ and Cd2+. Homology modeling of rFIV(a) showed that two highly conserved disulfide bonds (Cys159-Cys164 and Cys117-Cys197) was maintained from its structure, and it exhibited the characteristic conserved motif H142E143XXH146XXGXXH152, whose three histidine residues were involved in binding of the catalytically essential zinc ion. This work demonstrates the expression, purification and characterization of recombinant fibrinogenase IV, which belongs to class P-I metalloproteinase from D. acutus venom.     

慢性心力衰竭的CT表现

目的:探讨慢性心力衰竭的CT表现。材料和方法:回顾性分析28例慢性心力衰竭的CT表现。结果:左心室增大16例、右心室增大8例、左心房增大6例、右心房增大4例,左、右心房增大3例,肺水肿24例、胸腔积液25例、肺动脉扩张3例、升主动脉扩张5例和冠状动脉钙化7例。左心衰CT示肺水肿、左心室扩大和胸腔积液。右心衰CT示右心室扩大、主肺动脉扩张和胸腔积液。全心衰竭CT示左右心室扩大,肺水肿和双侧胸腔积液。结论:CT可显示心脏各房室扩大、大动脉扩张、肺水肿、胸腔和心包积液以及冠状动脉钙化,为诊断原发心脏疾病及慢性心力衰竭提供重要依据。     

腹壁会阴切口子宫内膜异位症30例临床分析

目的探讨腹壁子宫内膜异位症(内异症)的发病机制、诊断和治疗。方法回顾性分析我院1987年-2003年收治的30例腹壁会阴切口内异症的临床特点、治疗方法。结果30例患者中,腹壁内异症患者22例,均有剖宫产手术史,会阴EP切口内异症8例。均有典型周期性腹痛,肿块,手术切除均取得良好效果,未有复发。结论子宫内膜异位种植是本症的主要发病机制。根据典型的症状、体征,结合B超可正确诊断。彻底手术是唯一确实有效的治疗方法。     

细胞内游离Ca2+在发育中大鼠皮层神经元无镁诱导惊厥性损伤中的作用

目的: 观察细胞内游离Ca2+([Ca2+]i)在培养的不同发育阶段皮层神经元无镁诱导惊厥性损伤中的作用,探讨惊厥性脑损伤年龄依赖性的可能机制.方法:体外培养6 d、17 d的胚胎大鼠皮层神经元用无镁细胞外液处理3 h,或于无镁处理前用NMDA(N-甲基-D-门冬氨酸)受体拮抗剂或Ca2+通道阻滞剂预处理,用MTT代谢率测定的方法检测神经元损伤,以Fluo-3作标记用激光共聚焦显微镜扫描的方法检测[Ca2+]i.结果:体外培养6 d、17 d的神经元单纯无镁组MTT代谢率较同期对照组降低.应用MK-801 10 μmol*L-1、AP-5 50 μmol*L-1、尼莫地平10 μmol*L-1预处理后再给无镁处理,培养6 d、17 d的神经元MTT代谢率均不同程度高于同期单纯无镁组.培养6 d、17 d的神经元相对荧光强度之间差异有显著性,两者与基线荧光强度比较差异亦有显著性.应用上述各种拮抗剂后,[Ca2+]i改变的峰值均明显低于同期单纯无镁组.结论: 在体外不同发育阶段的神经元,短暂无镁处理诱导惊厥样放电所引起的神经元线粒体功能损伤以及[Ca2+]i改变程度不同.这种[Ca2+]i改变的年龄依赖性可能是惊厥导致神经元损伤的年龄依赖性的机制之一.NMDA受体-Ca2+通道激活是导致这种[Ca2+]i改变及神经元损伤的关键环节.     

闭合性肾损伤的诊断和治疗

目的探讨闭合性肾损伤的诊断与治疗方法。方法对205例闭合性肾损伤的临床资料进行回顾性分析。结果205例闭合性肾损伤中,肾挫伤113例,肾裂伤67例,肾碎裂伤31例,肾蒂血管伤12例,合并伤81例(39.5%)。血尿18例(91.7%),血尿是主要的临床症状。B 超检查199例,其中165例(82.9%)有异常表现;CT 检查80例,均显示肾损伤(100%)。保守治疗153例(74.6%);手术治疗52例,死亡5例(3.5%);超选择性肾动脉栓塞术29例。结论 B 超和 CT 检查是诊断肾损伤的有效方法。严格掌握手术时机是治疗闭合性肾损伤的关键。     

栀子提取液对大鼠急性胰腺炎时TNF-α和IL-6改变的影响

目的：探讨急性胰腺炎时血清TNF-α和IL-6的变化以及栀子提取液对其的影响。方法：SD大鼠造模后口服给予栀子提取液进行药物治疗，24h后呆血测淀粉酶、TNF-α和IL-6，并分组对比，取胰腺组织做病理学检查。结果：急性胰腺炎时血淀粉酶、TNF-α和IL-6水平显著升高，镜下见大量炎细胞浸润，栀子提取液可改善上述变化。结论：栀子提取液对大鼠急性胰腺炎有治疗作用。     

霍奇金淋巴瘤组织中H／RS细胞与其背景细胞的微切割及其IgH基因重排检测

目的 从基因水平探讨霍奇金淋巴瘤(HL)组织中H／RS细胞(Hodgkin and Reed-Sternberg cells)是否起源于B细胞、H／RS细胞的克隆性以及与背景淋巴细胞的相互关系。方法 对33例经典霍奇金淋巴瘤(cHL)石蜡刮片组织进行IgH基因重排分析，并对其中6例重排阳性的病例经B细胞特异性激活蛋白(BSAP)免疫标记，将标记阳性的H／RS细胞和背景淋巴细胞进行微切割后进一步行IgH基因重排分析。结果 16例石蜡刮片组织IgH基因重排阳性。对6例经BSAP标记的cHL成功进行了微切割，其中19管H／RS细胞中，有14管出现重排阳性，细胞数目不同的各管阳性率无显著性差异(P=0．290)；12管背景淋巴细胞有2管出现重排阳性，H／RS细胞与背景淋巴细胞的阳性率有显著性差异(P=0．002)。结论 支持H／RS细胞来源于B细胞的理论，认为部分背景淋巴细胞可能具有瘤性增生活性，参与H／RS细胞的前体细胞组成。     

对诊断PADAM的血清游离睾酮界限值的初探

目的探寻诊断中老年男子部分雄激素缺乏综合征(PADAM)血清游离睾酮(FT)的界限值。方法根据60例45岁以上健康男性完成伊斯坦布尔症状量表(ISS)与视听性刺激(AVSS)时阴茎勃起监测结果进行分组,计算AVSS勃起功能正常组推算的游离睾酮(CFT)值的参考范围。结果AVSS勃起功能正常组CFT的中位数为0．37(0．20～0．52)nmol/L,异常组的中位数为0．25(0．12～0．40)nmol/L,z=2．25,P＜0．05,差别有显著性意义。两组性功能症状的差别也有极显著性意义(P＜0．01)。CFT的界限值是0．20nmol/L。结论研究用ISS和AVSS勃起功能正常对象的血清FT值,可为诊断PADAM建立界限值。     

Nucleus24型人工耳蜗植入后的电极有效性

目的：随访耳蜗植入后出现蜗外电极或坏损电极的情况，评价人工耳蜗植入后电极的有效性。方法：1998年6月至2002年8月53例Nucleus CI24M型耳蜗植入者，在术中及术后映射调图时进行电极阻抗测试，确定有无电极坏损及其坏损时间。开机时拍摄耳蜗位X线平片，确定电极是否完全植入。分析手术过程和术者经验对电极有效性的影响。结果：电极出现坏损的比例为13．2％，电极在术中插拔两次以上而造成电极坏损的危险度为0．4656。4年累积生存率达96．2％。不完全植入的比例为15．1％，其中又以耳蜗形态异常者居多(7／11)。结论：Nucleus CI24M型植入体在开机1～4年内的可靠性较高。电极序列在术中插拔两次以上，是导致电极坏损的主要原因。患者耳蜗的纤维化、畸形以及术者经验等因素可能导致电极不完全插入。     

创伤性睾丸脱位5例报告

目的 探讨创伤性睾丸脱位的诊断和治疗。方法 对所收治的5例患的诊治情况进行分析研究，并结合复习有关献。结果 1例手法复位成功，4例行手术复位．1例发生睾丸萎缩后切除患睾。结论 创伤性睾丸脱位临床少见，漏误诊率较高。对骨盆部、会阴部、阴囊部外伤患应警惕本病；详细检查阴囊及睾丸．确诊后尽早行手法或手术复位固定．定期随访。