早期鼠胚简化双针取样法

为建立早期胚胎活检的动物模型，以安全高效地开展人类的植入前遗传学诊断，应用显微操作技术，对发育到8细胞期的小鼠胚胎进行了透明带溶洞吸取单个卵裂球的研究。结果表明：简化组的胚胎活检时间显著缩短，而胚胎完整率及单个卵裂球的完整率与传统组无明显差别。对照和两实验组胚胎在体外培养过程中均出现不同程度的胚胎发育延迟现象。活检后胚胎桑椹胚的发育率较对照组显著降低，但三组胚胎的出生率和生后三周仔鼠的体重无显著性差别，提示简化组的胚胎活检是安全而高效的，因而为开展人类的早期胚胎活检提供了方法学的参考。     

NMDA受体在正常大鼠颈动脉体的表达

应用免疫组织化学方法观察了离子型谷氨酸受体——NMDA受体的NR1及NR2A亚单位在正常成年雄性SD和Wistar大鼠颈动脉体的表达,并对阳性产物的表达强度进行了灰度分析及统计学处理。结果表明:正常成年SD大鼠及Wistar大鼠的颈动脉体内均存在NMDA NR1免疫反应阳性细胞,从阳性细胞的形态和分布特点判断这些阳性细胞为主细胞,两种大鼠之间无明显差异(P>0.05);而两种大鼠的颈动脉体内几乎不存在NMDA NR2A免疫反应阳性细胞。本实验的结果提示:在正常成年大鼠颈动脉体的主细胞上有NMDA受体的分布,并且该受体的二聚体构成不同于经典受体,这可能与谷氨酸在颈动脉体发挥的特殊功能有关。     

人胎脑神经干细胞的体外培养

目的从人胎脑纹状体中分离培养并鉴定神经干细胞。方法采用包含碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和表皮细胞生长因子(EGF)的无血清培养和单细胞克隆技术,从36周自愿水囊引产人胎脑纹状体中分离出神经干细胞,并观察神经干细胞体外培养、传代、分化潜能。结果从36周人胎脑纹状体中成功分离出具有自我更新和多分化潜能的神经干细胞,在无血清培养时细胞呈悬浮状态生长,形成神经球,该细胞具有连续克隆能力,可传代培养,呈Nestin免疫反应阳性细胞;在含血清培养时诱导神经干细胞分化,分化后的细胞表达神经元细胞、星形胶质细胞和少突胶质细胞的特异性抗原。结论神经干细胞的存活和分裂有赖于EGF和bFGF的共同作用;36周人胎脑纹状体仍能培养出具有自我复制和分化潜能的神经干细胞。     

高原地区护士工作倦怠感调查

工作倦怠感是指个体因为不能有效地应对工作上延续不断的各种压力，而产生的一种长期性反应。本文报道了高原护士群体的工作倦怠感状况。     

双侧六指、趾畸形1例

在局部解剖的过程中,发现1例男性成人尸体标本双侧六指、趾(图1),其发育正常,尸长187cm.,第6小指、趾的皮肤、指(趾)甲完整,色泽正常,指(趾)骨形态结构正常。测量结果如下:     

尺动脉腕背支升支皮瓣的应用解剖学研究

目的　为临床应用尺动脉腕背支升支皮瓣修复手部创面 ,提高治疗效果提供解剖学基础。方法　用新鲜成人男性上肢标本 1 6侧 ,采用显微解剖学技术 ,对尺动脉腕背支升支的起始、走行、分支及分布进行解剖学观察和测量。结果　尺动脉腕背支起始于尺动脉的尺侧 ,距豌豆骨上方 4 2 .6 0± 8.2 0mm ,起始处外径1 .4 6± 0 .32mm ,长 1 1 .4 6± 8.2 0mm。尺动脉腕背支与尺神经手背支伴行 ,穿过尺侧腕屈肌腱的深面 ,从掌侧向后内侧斜行 ,两者成锐角 ,平均 38.6 0± 8.2 0°,行至 1 1 .4 6mm处分为升支与降支。升支穿深筋膜进入皮下组织 ,沿前臂内侧缘上行 1 2 2 .4 0± 1 3.80mm处再分为细小分支 ,升支起始部的外径为 0 .6 2± 0 .2 8mm。结论　尺动脉腕背支升支皮瓣是以尺动脉腕背支升支为蒂 ,可在前臂尺侧设计大面积岛状皮瓣 ,通过转位修复腕部和手部创伤及挛缩瘢痕切除术后的创面 ,不牺牲前臂主要血管 ,手术操作易于掌握     

鼠抗人OX40功能性单克隆抗体的研制及其生物学特性的鉴定

目的：研制功能性鼠抗人OX40单克隆抗体。方法：以转人OX40的转基因细胞L929-OX40为免疫原，常规免疫6—8周龄的雌性BALB／c小鼠；采用B淋巴细胞融合技术，将免疫小鼠脾脏细胞与SP2／0融合，以L929-OX40转基因细胞及PHA活化的T细胞为抗体筛选阳性细胞，经免疫荧光标记分析对杂交瘤进行反复筛选和多次的克隆化培养；采用快速定性试纸法及竞争抑制结合试验分析了该单抗的亚类及抗原识别位点；采用MTT法分析单抗在体外对T细胞的促增殖效应以及ELISA分析活化T细胞分泌的细胞因子。结果：获得1株持续、稳定分泌鼠抗人OX40单克隆抗体的杂交瘤细胞株(命名为7E11)，该单抗能特异性地识别人OX40分子和介导有效的共刺激信号，体外促进活化的T细胞增殖和细胞因子的分泌。结论：成功研制成一株能分泌功能性鼠抗人OX40单克隆抗体的杂交瘤，该抗体特异性地识别人OX40分子并具有在体外协同刺激T细胞的作用。     

音猬因子的功能受体斑片在培养神经干细胞中的表达

目的　观察在培养的神经干细胞内是否有发育调控分子———音猬因子 (sonichedgehog)功能受体———斑片 (patched)表达。　方法　神经干细胞克隆在体外培养传代后 ,用patched的特异性引物对培养的神经干细胞进行RT PCR分析 ,PCR产物经克隆测序后 ,用地高辛标记克隆的探针 ,对神经干细胞进行原位杂交分析。　结果　神经干细胞克隆内大量的细胞均可表达sonichedgehog的功能受体patched ,patched阳性细胞间未见明显差别 ,克隆边缘与中央的patched分布也未见明显差别。　结论　sonichedgehog信号传导路可能在神经干细胞的增殖与分化过程中起重要作用。     

神经干细胞球生长动力学模型

神经干细胞的体外大规模培养对于细胞移植治疗中枢神经系统受损及各种神经退行性疾病有重大意义。体外呈球状生长的神经干细胞球在长大到一定尺寸之后，有可能在其内部由于养分缺乏而形成坏死细胞，这对于干细胞的有效扩增是极为不利的。因此，模拟神经球的动态生长过程并分析出现坏死细胞的临界神经球尺度对于神经干细胞的大规模扩增有重要意义。本研究采用元胞自动机技术建立了模拟神经球生长的动态模型，并结合神经球内养分的扩散传递模型，求解神经干细胞球内出现坏死细胞的临界神经球尺寸以及坏死细胞的扩大规律。计算结果表明，坏死细胞的出现与体外培养条件有一定关系；坏死细胞的出现主要取决于神经球的尺寸，其外部再好的培养条件也不可能抑制坏死的出现。此外，计算结果还表明，神经球内由于氧缺乏而形成的坏死细胞的出现要早于由于葡萄糖缺乏时的情况，并且坏死细胞一旦出现，其增长速度就非常快，有可能很快使整个神经球成为坏死细胞球。本研究所建立的CA模型及神经球内的传质模型可以很好的模拟神经球的生长过程。     

卵巢癌及癌旁正常卵巢组织中USP2、USP14和UBE4A的差异表达

目的:探讨泛素特异性蛋白酶(USP)2、14和泛素因子E4A(UBE4A)在卵巢浆液性囊腺癌及癌旁正常卵巢组织间的表达差异。方法:采用RFDD-PCR、半定量RT-PCR和免疫组织化学染色方法检测USP2、USP14和UBE4A在40例卵巢浆液性囊腺癌患者卵巢癌组织及其癌旁正常卵巢组织上的表达差异。结果:泛素特异性蛋白酶USP2、USP14和UBE4A在卵巢浆液性囊腺癌组织中高表达,而在正常卵巢组织中无表达或低表达。结论:USP2、USP14和UBE4A在卵巢癌组织中表达上调,提示卵巢癌中泛素-蛋白酶体系统活动明显增强。