抑制聚ADP核糖聚合酶1活性的短发夹RNA载体构建

目的构建抑制人聚ADP核糖聚合酶1(hPARP1)活性的短发夹RNA(shorthairpinRNA,shRNA)表达载体。方法化学合成2对编码短发夹RNA序列的、靶向hPARP1基因的寡核苷酸,各69对碱基,退火,然后利用BamHⅡ及EcoRⅠ与pSIRENRetroQ载体连接。用EcoRⅠ及BglⅡ切取其中U6启动子及下游的shRNA部分,与pEGFPC1载体重组构建pEGFPC1shRNA载体。结果重组构建的pEGFPC1P1、pEGFPC1P2、pEGFPC1N载体经双酶切电泳分析及插入基因片段序列分析,结果表明330个碱基成功插入到预计位点。结论载体的成功构建,为进一步研究聚ADP核糖聚合酶在DNA修复过程中的功能打下基础。     

Cox模型影响点识别诊断统计量的模拟研究

目的 探讨Cox比例风险模型影响点的有效识别方法 .方法 通过Monte-Carlo模拟研究,比较了六种诊断统计量及相应诊断图对影响点的诊断效能.结果 模拟研究表明,加权score残差、似然距离和最大影响曲率及其诊断图可从模型拟合不同角度有效识别影响点.结论 影响分析应是Cox模型分析的一个重要组成部分,加权score残差、似然距离和最大影响曲率是有效识别影响点的诊断统计量.     

改良分子信标-实时PCR快速检测产单核李斯特菌

目的：建立改良分子信标-实时PCR检测产单核李斯特菌（LMO）的快速方法，应用于食品中LMO的污染状况调查及食物中毒快速诊断。方法：根据GenBank公布的LMO hlyA基因的保守序列，设计引物和改良分子信标探针，建立改良分子信标-实时PCR检测体系，应用于食品中LMO检测。结果：改良分子信标-实时PCR反应体系DNA灵敏度为110fg，菌液灵敏度为99cfu／ml或4cfu／PCR反应体系，无交叉反应。以此反应体系检测28株LMO，均出现特异的荧光信号。上述方法可将检测时问由原来的至少4d缩短至1d。对228份食品进行LMO检测，8份增菌液LMO实时荧光PCR阳性，其中6份1310细菌培养阳性。结论：改良分子信标-实时PCR反应体系快速、灵敏度高，特异性强．能提高LMO的检出率和准确性，可应用于LMO食品污染状况调查及食物中毒的快速诊断。     

反义EGFR寡核苷酸对血管紧张素Ⅱ促VSMC增殖的影响

目的探讨脂质体介导的反义表皮生长因子受体寡核苷酸基因转染对血管紧张素Ⅱ促大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响．方法用反义表皮生长因子受体寡核苷酸脂质体复合物转染Sprague—Dawley大鼠血管平滑肌细胞，通过RT—PCR、Western—Bloting分别检测转染后EGFRmRNA及蛋白的表达情况，用^3H—Tdr掺入率实验检测经反义表皮生长因子受体寡核苷酸转染再用血管紧张素Ⅱ刺激的血管平滑肌细胞的增殖情况，结果反义表皮生长因子受体寡核苷酸转染大鼠血管平滑肌细胞后，EGFRmRNA及蛋白的表达较正义组及对照组明显减少（P〈0．05）；用血管紧张素Ⅱ刺激后，反义组细胞的^3H—Tdr掺入较正义组及对照组明显降低，经方差分析两者有显著差异（P〈0．05），结论脂质体介导的反义表皮生长因子受体寡核苷酸转染减弱了血管紧张素Ⅱ的促血管平滑肌细胞增殖效应，证明了表皮生长因子受体在血管紧张素Ⅱ促血管平滑肌细胞增殖中起重要作用．     

急性心肌梗死不同溶栓药物疗效探讨

目的在急诊科比较尿激酶(UK)、链激酶(SK)和重组组织型纤溶酶原激活剂(r-tPA)对急性心肌梗死患者进行静脉溶栓治疗的临床疗效。方法随机分为三组,UK组222例,SK组205例,r-tPA组201例。给予三种溶栓药物静脉输入,观察血管再通的临床指标,同时观察有无出血、心衰、休克等并发症。结果三组的再通率分别为:r-tPA组为81.3%,SK组为66.1%,UK组为58.7%。而病死率则反之,即r-tPA组为8.7%,SK组为9·2%,UK组为10.3%。r-tPA组重度出血发生率明显高于SK组和UK组(6.2%,1.5%,0.6%),而轻度出血以SK组和UK组多见。血管再通后,病死率、休克、心力衰竭、严重心律失常及再缺血等并发症明显低于血管未通组。结论r-tPA再通率高,溶栓疗效好。但对高血压及老年患者应慎重,以防重度出血的发生。     

下腔静脉后输尿管合并上尿路结石的诊治体会

目的:探讨下腔静脉后输尿管合并上尿路结石的诊断与治疗。方法:回顾性分析下腔静脉后输尿管合并上尿路结石病例9例的临床诊治经过,总结了诊断和治疗方法。结果:9例经静脉尿路造影、逆行尿路造影及CT确诊,7例行输尿管切断再吻合手术治愈。2例接受右肾切除手术。结论:静脉尿路造影、逆行尿路造影及CT扫描是主要诊断方法,取净上尿路结石后行输尿管切断再吻合手术是主要治疗手段。     

腰麻联合硬膜外麻醉应用于分娩镇痛的临床研究

目的：探讨腰麻联合硬膜外麻醉用于分娩镇痛的优势。方法：对20例产妇分娩时实施腰麻联合硬膜外麻醉（观察组），并与20例实施连续硬膜外阻滞（对照组）进行比较。结果：两组镇痛效果比较两组产妇给药后均可达0级，但A组疗效时间及达0级时间明显短于B组。A组第一产程结束镇痛效果略强于B组，但无显著性差异A组罗哌卡因总用量明显少于B组两组产后出血、剖宫产率无明显差异，两组产程活跃期及第二产程均在正常范围，无组间差别。结论：腰麻硬膜外联合阻滞用于分娩镇痛，起效快、镇痛完全，并且有硬膜外阻滞的可延续性和缩短诱导时间，同时能减少硬膜外用药量并使阻滞欠佳率降低，产妇满意度增高，从而大大提高了分娩镇痛水平，具有较大的应用前途。     

腺苷三磷酸结合盒转运体A1基因1883M多态与冠心病的相关性研究

目的探讨腺苷三磷酸结合盒转运体A1（ABCA1）基因1883M多态性与冠心病（CHD）的关系。方法采用PCR-RFLP技术检测264例CHD惠者和278名健康个体ABCA1基因1883M多态性，并结合临床和生化的指标探讨该多态与CHD的关系。结果1883M等位基因及基因型频率分布在患者组与对照组问均无显著性差异；1883M等位基因及基因型频率在非心肌梗死组和心肌梗死组比较差异亦无显著性；女性患者中．MM基因型个体血策HDL-C水平显著高于IM基因型个体。结论ABCA1基因1883M多态与汉族人群CHD无明显的相关性。     

槲皮素对系膜细胞增殖、凋亡及细胞外基质的影响

目的观察槲皮素对系膜细胞增殖、凋亡及细胞外基质的影响。方法用MTT法检测细胞增殖．流式细胞仪检测细胞周期及凋亡，ELISA法测量纤雏连接蛋白（FN），Ⅳ型胶原（ColⅣ）在培养上清中的含量。结果在5-20μmol／L浓度范围内槲皮素能时间、剂量依赖性地抑制系膜细胞增殖，可使G0—G1期细胞增多，S期细胞减少，而较高浓度的槲皮素能剂量依赖性诱导系膜细胞的凋亡。同时槲皮素能减少系膜细胞在AngⅡ诱导下的FN和Col-Ⅳ的分泌。结论槲皮素可显著抑制系膜细胞增殖，使系膜细胞阻滞于G0-G1期；并且高浓度槲皮素有诱导系膜细胞凋亡的作用，并能减少系膜细胞在AngⅡ诱导下的细胞外基质的分泌。     

贵州南部地区苗族、畲族和汉族头面部形态特征调查

目的:了解贵州南部地区苗族、畲族、汉族人群头面部形态特征。方法:采取整群抽样方法,对苗族548人(男290人,女258人),畲族332人(男173人,女159人),汉族528人(男290人,女238人)的头面部28项指标进行活体观察和比较。结果:三个民族的头面部形态特征既有许多相同之处,又有各自不同的特点。结论:贵州南部地区苗族、畲族、汉族人群头面部形态特征具有丰富的多样性,这些特征对探讨贵州少数民族起源及其渊源关系具有重要意义。