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目的 构建BAG-1、Bcl-2双靶区反义RNA重组载体并初步探讨其对SGC-7901细胞增殖活性的影响.方法 从SGC-7901细胞总RNA中逆转录扩增包括全部编码序列的BAG-1和Bcl-2 cDNA,利用生物工程技术,反向插入真核细胞双表达载体pVITR02的多克隆位点中,转染SGC-7901细胞,MTT法检测对细胞增殖的影响,RT-PCR法观察对细胞BAG-1和Bcl-2 mRNA表达水平的变化,流式细胞术检测对细胞周期的影响.结果 限制性内切酶和测序分析表明,双表达质粒pVlTR02-AsBAG-1-Bcl-2构建成功.MTT法检测显示pVITR02-AsBAG-1-Bcl-2载体抑制SGC-7901细胞增殖,并旱时间依赖性,其中以72 h转染组抑制作用最显著(P<0.01);与对照组比较,pVITR02-AsBAG-1-Bcl-2组BAG-1和Bcl-2mRNA表达水平下降(P<0.05),细胞捌亡比例升高(P<0.01).结论 成功构建反义双靶区重组载体pVITR02-AsBAG-1-Bcl-2,并发现其能抑制SGC-7901细胞增殖并引起细胞凋亡. 相似文献
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目的 利用拉曼光谱法建立硫酸软骨素滴眼液定性和定量快速分析模型,并研究提高模型预测能力。方法 以硫酸软骨素标准拉曼光谱为参考光谱,在RFDI软件中设置干扰光谱、谱段范围、预处理方式等参数,建立定性分析模型;选取代表性样品23批作为参考光谱,关联硫酸软骨素含量测定数据以交叉检验方式建立定量分析模型。结果 利用所建定性模型测试硫酸软骨素滴眼液样品,其中39批单方样品为通过,4批复方样品为不通过;得到定量模型结果交叉验证均方根误差为1.43 mg·mL-1、相关系数为0.985 4;浓度范围为26.19~35.85 mg·mL-1。结论 利用拉曼光谱法可建立硫酸软骨素滴眼液定性模型,准确性高,分析速度快;依据可靠的实验室含量分析数据,可以建立硫酸软骨素滴眼液定量模型快速分析主成分硫酸软骨素的含量,在现场快速检测样品中得到实际应用。 相似文献
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目的 利用生物信息学的方法分析肿瘤缺氧微环境对多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)转录组的影响,筛选差异基因,为探索细胞耐受缺氧环境的分子机制提供信息。方法 从GEO数据库获得缺氧培养下的MM细胞株以及患者骨髓来源CD38阳性细胞的表达谱芯片,利用Limma包分析缺氧环境下一致性较好的差异基因,对这些差异基因进行GO和KEGG分析,并用TCGA数据库研究其表达水平与MM患者生存的关系。最后利用差异基因预测抑制缺氧微环境的潜在药物。结果 针对2种数据集共筛选得到28个一致性较好的差异基因,这些基因主要参与细胞代谢途径、线粒体结构、自噬等,这可能与MM的缺氧耐受有关。生存分析显示: ANXA1、CLU、DPYSL3、CEP128、DDIT4、HMGCS1基因的高表达导致MM患者预后变差。CMAP分析提示PARP抑制剂可抑制缺氧相关信号通路。结论 本研究利用生物信息学手段筛选得到了缺氧影响MM的差异基因,发现其中部分基因的高表达可导致MM患者预后变差,这可能与缺氧环境导致肿瘤细胞生存增强有关。PARP抑制剂可能成为缺氧抑制剂,与其他化疗药物联合使用实现更好的治疗效果。 相似文献
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目的 制备载阿霉素(doxorubicin,DOX)的TPGS修饰的羧甲基壳聚糖-大黄酸(TPGS-CR)偶联物胶束(DOX/TPGS-CR胶束),考察其体外对人乳腺癌MCF-7细胞的毒性。方法 以TPGS-CR偶联物为载体材料,利用透析法制备DOX/TPGS-CR胶束,使用动态激光粒径测定仪测定其粒径,紫外分光光度法测定载药量和包封率;在pH 7.4的PBS中进行了体外释放研究,计算了DOX的累计释放率,绘制了累计释放曲线;MTT法检测其对人乳腺癌MCF-7细胞毒作用,计算细胞的存活率。结果 DOX/TPGS-CR胶束的平均粒径为(151.3±1.8)nm,PDI为0.129±0.020,电位为(-26.9±0.8)mV,载药量为(23.16±0.01)%,包封率为(55.00±0.04)%。DOX/TPGS-CR胶束在pH 7.4的PBS中,24 h时累计释放DOX仅有(35.73±2.21)%,而游离DOX·HCl在6 h时累计释放达到了(90.25±6.20)%;DOX/TPGS-CR胶束浓度在5~20 μg·mL-1内,尤其在48 h时,对MCF-7细胞杀伤能力强于DOX·HCl。结论 DOX/TPGS-CR胶束载药量良好,粒径小,分布均匀,具有缓释特征;载体材料TPGS-CR偶联物毒性小,安全性高,DOX/TPGS-CR胶束对MCF-7细胞有较强的杀伤作用。 相似文献
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医院感染是住院病人在医院内获得的感染,也包括医院工作人员在医院内获得的感染。检验科院感管理本身并不存在民营与公立之分,但是在不同体制下还是有其特别之处,该文从医院管理层及检验科实际出发,对院感管理存在的问题及改进措施进行探讨。 相似文献
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痕量氟化物快速测定方法建立 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 建立准确、快速、经济、实用的微量、痕量氟化物检测方法。方法 采用酶标仪-氟试剂分光光度法,测定生物、食品、环境等样品或其消化处理液中的氟化物含量,并以3水平4因素正交设计对该法的试剂浓度、比例、用量进行多因素分析,以优化最佳实验条件;以重现性、加标回收率和检出限评价方法的精密度、准确度及灵敏度。结果 最佳实验条件为氟试剂与硝酸镧比例为1:1,稳定剂为丙酮-乙酰丙酮,缓冲液3.5 mol/L;利用该方法可精确测定微量氟(氟含量>0.06μg/mL),痕量氟(氟含量≤0.06μg/mL);r为0.998 6~0.999 1,检出限为0.000 9μg,检测精度可达0.001μg,回收率为97.6%~100.1%,变异系数<2.65%。结论 将酶标仪引入氟化物的检测,分析速度快,检出限低,且具有较高的精密度、准确度。 相似文献