Development of specific receptors for N-formylated chemotactic peptides in a human monocyte cell line stimulated with lymphokines

A human monocyte-like cell line, U937, when grown in continuous culture, does not secrete lysosomal enzymes or migrate towards chemotactic factors. When the cells are stimulated by lymphokines, however, they develop the ability both to migrate directionally and to secrete enzymes in response to several types of chemoattractants. The development, by stimulated cells, of chemotactic and secretory responses to one class of chemoattractants, the N- formylated peptides, is accompanied by the appearance on the cells of specific binding sites for these substances. Using tritiated N-formyl- methionyl-leueyl-phenylalanine (fMet-Leu-[(3)H]Phe) as a ligand, it was determined that unstimulated U937 cells possess no detectable binding sites. However, after stimulation with lymphocyte culture supernates for 24, 48, and 72 h, they developed 4,505 (+/-) 1,138, 22,150(+/-) 4,030, and 37,200 (+/-) 8,000 sites/cell, respectively. The dissociation constants for the interaction of fMet-Leu-[SH]Phe with the binding sites were approximately the same regardless of stimulation time and ranged between 15 and 30 nM. The binding of fMet-Leu-[(3)H]Phe by stimulated U937 cells was rapid and readily reversed by the addition of a large excess of unlabeled peptide. The affinity of a series of N-formylated peptides for binding to U937 cells exactly reflected the potency of the peptides in inducing lysosomal enzyme secretion and chemotaxis. The availability of a continuous human monocytic cell line that can be induced to express receptors for N-formylated peptides will provide a useful tool not only for the characterization of such receptors but also for the delineation of regulatory mechanisms involved in cellular differentiation and the chemotactic response.     

Sonourethrography in the evaluation of anterior urethral strictures: Correlation with radiographic urethrography

A total of 30 patients with suspected urethral strictures underwent sonographic and roentgenographic urethrograms. Two patients showed a normal anterior urethra in the sonourethrogram; 29 strictures were diagnosed in the remaining 28 patients, 1 patient showing strictures at two different sites. Sonourethrography was an accurate predictor of stricture length, retrograde urethrography underestimating the stricture length in most of the cases. Periurethral structures, including the urethral wall, corpus spongiosum, corpora cavernosa, bulb, and external urinary sphincter, were seen clearly with sonourethrography. Periurethral fibrosis was seen in 16 patients and graded as mild (n = 5), moderate (n = 2) or severe (n = 9), depending on the depth of involvement of the corpus spongiosum. Sonourethrography was unsatisfactory in the evaluation of membranous strictures, failing to visualize the proximal limit of the stricture. © 1993 John Wiley & Sons, Inc.     

非肿瘤性肩关节损伤与人工肩关节置换

目的:分析假体的选择与手术操作技术对非肿瘤性肩关节损伤人工肩关节置换术治疗的影响。方法:选择2001-04/2006-10在上海长征医院、西藏军区总医院、扬州第一人民医院等进行肩关节置换术患者33例。肱骨急性近端粉碎性骨折28例:行单极人工肩关节置换术17例,双极人工肩关节置换术1例,全肩关节置换术3例。肱骨头缺血坏死2例、骨性关节炎3例,均行全肩关节置换术。术后9个月时22例患者参加随访,18个月时17例参加随访,30个月时5例参加随访。结果:33例患者均进入结果分析。①1例肱骨假体留置过长致肩关节上举运动痛、静止不痛,翻修术后缓解。其余32例完全不疼。②术后患者上举85°～130°,平均(98.7±6.0)°,外旋17°～36°,平均(30.0±5.7)°。内旋75°～101°,平均(82.5±4.8)°。③患者假体置位较好,除1例肱骨假体未完全插入髓腔,翻修后正常。④材料与组织的生物相容性能:符合美国FDA及欧洲CE标准。结论:针对患者的具体情况选用合适的人工肩关节假体,术中假体固定方法的选择以及术后外固定材料的佩戴对肩袖功能有重要影响。     

骨髓间充质干细胞向胰岛素分泌细胞诱导分化的动态观察

目的:探讨体外诱导骨髓间充质干细胞向胰岛素分泌细胞分化的可能性,并观察其动态变化。方法:实验于2005-09/2007-03在山东大学齐鲁医院完成。①标本来源:骨髓标本15例来自山东大学齐鲁医院成人骨髓检查结果正常者,均签署捐献同意书。②实验方法:无菌条件下取骨髓2.0～5.0mL,采用percoll分离液和贴壁法获得纯化的成人骨髓间充质干细胞。③实验评估:流式细胞仪行细胞表面抗原检测,在适当的条件下诱导其分化为成骨细胞和脂肪细胞。采用两步法向胰岛素分泌细胞诱导,观察其在碱性成纤维细胞生长因子、活化素A、胰岛素样生长因子、尼克酰胺等因子刺激下向胰岛素分泌细胞分化的动态变化。双硫踪染色鉴定胰岛样细胞团,酶联免疫吸附试验检测细胞分泌胰岛素的情况,RT-PCR检测胰岛细胞特异基因的表达。结果:①骨髓间充质干细胞的生长特性及免疫表型:分离培养获得的贴壁细胞,呈形态均一的梭形,流式细胞仪检测CD34、CD45表达阴性,CD29、CD44表达阳性。②向成骨细胞和脂肪细胞的诱导分化:此类细胞经茜素红染色、油红O染色均呈阳性,可诱导分化为成骨细胞和脂肪细胞。③向胰岛素分泌细胞的诱导分化:第1步诱导后出现细胞簇,双硫腙染色不着色,胰岛素分泌量少,仅检测到PDX-1基因的表达,证实其为胰岛前体细胞。第2步诱导后细胞簇数目逐渐上升,至诱导14d大部分细胞簇经双硫腙染色都呈红色。④诱导后培养上清中胰岛素含量:诱导第3,7,14,21天的胰岛素分泌量分别为(15.3±4.9),(34.1±5.6),(40.4±5.3),(39.8±5.1)mU/L。⑤胰岛细胞特异基因的表达:诱导7d仅检测到PDX-1基因的表达,insulin1、insulin2和Glut2基因均不表达。诱导14,21d检测到insulin2、PDX-1基因表达,insulin1基因弱表达,Glut2基因不表达。结论:体外分离、纯化得到的骨髓间充质干细胞诱导7d可分化出胰岛前体细胞,不具功能性;诱导14d后可成功地分化出成熟的具有功能性的胰岛素分泌细胞。     

国人全膝关节假体置换胫骨近端截骨面至腘血管距离的测量及意义

目的:测量国人全膝关节假体置换术胫骨近端截骨面后缘至腘窝血管之间的距离,以期为临床全膝关节置换术中避免损伤腘窝血管提供参考数据。方法:选择2006-06/12于解放军第二军医大学长征医院体检的50名正常成人(53膝),男29名(31膝),女21名(22膝)。所有观察对象均知情同意,且得到医院伦理道德委员会批准。对所有膝关节进行MRI扫描,在胫骨外侧平台以下10mm水平横断面上辨认腘动静脉,并测量胫骨近端截骨面后缘至腘窝动静脉的距离。结果:53膝全部进入结果分析,无脱落。①男性胫骨近端截骨面后缘至腘动脉、腘静脉平均距离为(6.7±2.5,7.3±2.3)mm,95%可信区间分别为5.8～7.6mm,6.5～8.1mm。②女性胫骨近端截骨面后缘至腘动脉、腘静脉平均距离为(6.6±1.9,7.1±2.7)mm,95%可信区间分别为:5.8～7.4mm,5.9～8.3mm。③不同性别观察对象胫骨近端截骨面后缘至腘血管的距离差异无显著性意义(P>0.05)。结论:腘窝血管紧邻全膝关节假体置换术胫骨近端截骨面后缘,不同性别间无明显差异。全膝关节假体置换术中进行胫骨近端截骨,特别是后方操作时需特别谨慎,以避免损伤腘窝血管。     

不同相对分子质量玻璃酸钠对膝关节镜术后关节功能恢复的作用比较

目的:观察关节腔内留置不同相对分子质量玻璃酸钠对膝关节镜术后早期疼痛及功能恢复的影响。方法:于2005-11/2006-05选择北京大学人民医院骨关节科收治的行膝关节镜手术患者60例。关节镜手术中根据不同诊断分别行半月板成形术、游离体取出术以及软骨成形术。60例患者按随机数字表法分为3个实验组,分别为Mr1.5×106～2.5×106玻璃酸钠组,Mr3×106玻璃酸钠组,Mr6×106玻璃酸钠组。术后关节腔内注入不同相对分子质量玻璃酸钠2.0～2.5mL,并被动屈伸膝关节20次,使玻璃酸钠均匀分布于关节内。术后第1天开始股四头肌力量锻炼,坐在床边屈膝活动,并可下床。术后1周拆除缝线,术后6周门诊复查。分别于术前、术后1,2,3d,1,6周采用同一评分量表进行自觉疼痛程度、日常生活活动能力、膝关节屈曲角度测评,评分越高,功能恢复越好。结果:纳入患者60例,均进入结果分析。①自觉疼痛程度测定:术后6周Mr1.5×106～2.5×106,3×106,6×106玻璃酸钠组自觉疼痛程度评分均高于术前[分别为(8.5±1.3),(7.3±2.2)分;(8.5±1.3),(7.3±2.2)分;(8.5±1.3),(7.3±2.2)分]。②日常生活活动能力测定:术后6周Mr1.5×106～2.5×106,3×106,6×106玻璃酸钠组日常生活活动能力评分均高于术前[分别为(60.5±8.4),(59.3±7.0)分;(63.4±8.2),(59.4±8.3)分;(66.9±3.8),(53.8±19.0)分]。③膝关节屈曲角度评分:术后6周Mr1.5×106～2.5×106,3×106,6×106玻璃酸钠组膝关节屈曲角度评分均高于术前[分别为(9.1±1.4),(5.8±2.7)分;(8.1±3.1),(7.2±3.5)分;(6.3±3.8),(5.5±3.1)分]。④综合评分:术后6周Mr1.5×106～2.5×106,3×106,6×106玻璃酸钠组综合评分均高于术前[分别为(88.1±7.7),(79.8±11.1)分;(91.4±6.8),(84.9±13.7)分;(91.2±10.7),(73.5±23.7)分]。关节腔内留置3种不同相对分子质量玻璃酸钠在膝关节镜术后近期各项评分差异均无显著性意义(P>0.05)。结论:关节腔内留置不同相对分子质量玻璃酸钠在膝关节镜术后近期康复中具有相似的效果。     

应用三维有限元法评估聚甲基丙烯酸甲酯和磷酸钙骨水泥铸件的力学特征

目的:聚甲基丙烯酸甲酯和磷酸钙骨水泥作为经皮椎体后凸成形术填充物,应用三维有限元分析法比较两种材料治疗骨质疏松性椎体压缩骨折的生物学效应。方法:实验于2003-03/09在南通医学院第一附属医院骨科和上海大学上海生物力学工程研究所合作完成。①利用WD-5型万能材料机测量聚甲基丙烯酸甲酯和磷酸钙骨水泥铸件力学性质。②选取骨质疏松患者1例(患者知情同意),排除其他疾患,应用CT扫描技术、图形数字化方法获取胸腰段的三维坐标,利用ANSYS5.0有限元分析软件等工具建立骨质疏松患者胸腰段的三维有限元模型。③模拟L1经皮椎体后凸成形术,对其和相邻椎体及椎间盘的负荷传递、应力、位移等进行分析。结果:①获取了精确的T11￣L3的多排螺旋CT扫描断层影像数据,经ANSYS5.0软件处理后得到4718个节点,1642个薄极单元,4495个八节点等参单元的骨质疏松患者胸腰段三维有限元力学模型。②采用聚甲基丙烯酸甲酯作为经皮椎体后凸成形术的填充物,比骨质疏松椎体应力增加了近15%。后部结构的应力平均增加13.2%,其中椎弓根增加5.9%,峡部增加6.25%,关节点增加27.6%。聚甲基丙烯酸甲酯在稳定椎体、恢复强度和刚度的同时,可能使其后部结构及相邻腰椎出现应力集中现象。③采用磷酸钙骨水泥作为椎体成形术填充物,比骨质疏松椎体应力平均增加了7%,应力集中现象明显小于聚甲基丙烯酸甲酯。结论:三维有限元力学分析表明两种材料均提高了椎体的抗变形能力,有利于椎体功能的重建。与聚甲基丙烯酸甲酯相比,磷酸钙骨水泥能减少成形椎体和相邻椎体之间的应力梯度,从长远看,能减少椎体退变和相邻椎体骨折的机会。     

颈动脉血管重构特征在自发性高血压大鼠体内的表现

目的:血管重构是高血压的重要病理变化,是高血压导致器官损害的结构基础。实验观察自发性高血压大鼠颈动脉中层组织学的相关变化,以验证血管重构的特点。方法:实验于2006-06/2007-03在福建医科大学附属协和医院心血管内科实验室完成。①实验材料及分组:12周龄雄性自发性高血压大鼠10只,同性别周龄的WKY大鼠10只为对照,喂养18周后终止实验。②实验过程及评估:开始及每2周测鼠尾收缩压。实验结束后,麻醉后取颈动脉,行苏木精-伊红、苦味酸-天狼星红、弹力纤维和胶原纤维的双重染色(P/VB法),利用计算机辅助成像系统测算颈动脉中膜厚度、腔径、血管中膜厚/腔径、中膜横截面积、中膜细胞平均核面积及中膜的胶原面积百分比、弹性纤维面积百分比、弹性纤维面积与胶原面积的比值。SP免疫组织化学染色检测α-平滑肌肌动蛋白、增殖细胞核抗原、纤维粘连蛋白、层粘连蛋白等抗原在颈动脉壁的表达,并计算颈动脉中膜细胞增殖指数;以原位末端标记法标记血管壁的凋亡细胞,计算颈动脉中膜细胞凋亡指数。结果:20只大鼠全部进入结果分析。①自发性高血压大鼠实验开始和结束前的收缩压均>150mmHg,高于WKY大鼠(P<0.01)。②自发性高血压大鼠颈动脉中膜厚度、腔径、中膜厚度/腔径、中膜横截面积、中膜胶原面积百分比均高于WKY大鼠(P<0.01),而中膜弹性纤维面积百分比、弹性纤维面积与胶原面积比值均低于WKY大鼠(P<0.01)。③α-平滑肌肌动蛋白在两组大鼠颈动脉中膜均可表达,提示中膜细胞为血管平滑肌细胞。④自发性高血压大鼠中膜血管平滑肌细胞平均核面积大于WKY大鼠(P<0.01),中膜细胞增殖指数与WKY大鼠差异无显著性(P>0.05),中膜细胞凋亡指数显著低于WKY大鼠(P<0.01)。⑤自发性高血压大鼠颈动脉中膜纤维粘连蛋白、层粘连蛋白的光密度值(IA值)及染色阳性面积百分比高于WKY大鼠(P<0.01)。⑥颈动脉中膜血管平滑肌细胞凋亡指数与中膜横截面积呈显著负相关(r=-0.872,P<0.01);纤维连接蛋白表达的吸光度值与中膜横截面积呈显著正相关(r=0.954,P<0.01)。结论:自发性高血压大鼠颈动脉存在明显的重构,其特点为中膜肥厚、平滑肌细胞肥大、凋亡减少及胶原、纤维粘连蛋白、层粘连蛋白的过度沉积。     

Prophylactic defibrotide in allogeneic stem cell transplantation: minimal morbidity and zero mortality from veno-occlusive disease

Veno-occlusive disease (VOD) is a common and high-risk complication of allogeneic stem cell transplantation (SCT). Defibrotide has recently been used successfully to treat the disorder. We report on 58 patients who received defibrotide prophylaxis without concurrent heparin. No patients fulfilled the Baltimore criteria for VOD or died of the condition within 100 days of SCT. None of this group developed haemorrhagic complications secondary to defibrotide. These observations suggest that prophylaxis with defibrotide alone may reduce the incidence of VOD post-SCT although a randomised controlled trial is warranted to further evaluate its role.