转基因内皮细胞的构建及其在复合血管上种植的初步研究

目的:为了解决小口径(直径7mm以下)人造血管术后通畅率低下的问题,利用生物-人工复合血管,结合分子生物学手段,将转入血管内皮生长因子(VEGF165)基因的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)种植于复合血管内腔面,为解决此临床难题提供新的思路和手段。材料方法:构建VEGF165真核表达质粒pCI-neo-VEGF165,获得正确的质粒用于转染HUVEC。从中科院购买HUVEC(代号:ECV-304),用脂质体介导法将pCI-neo-VEGF165转入细胞,经G418筛选后,计数阳性克隆,以比较脂质体和质粒在不同比例情况下转染效率的高低。实验组按质粒和脂质体比例的不同分为4组:1μg/3μl;2μg/6μl;2μg/8μl;3μg/12μl。ELISA检测瞬时转染后HUVEC培养上清中VEGF的表达。再将VEGF165基因瞬时转入HUVEC,利用自己设计的旋转培养装置,将细胞均匀地粘附、种植于复合血管内腔面。复合血管是人工材料(聚酯)和生物材料(成纤维细胞长入,胶原形成)有机结合而成,是将包有聚酯网的硅胶棒埋入绵羊背部皮下组织,3个月后取出,抽去硅胶棒而得到的。结果:脂质体转染效率以2μg/8μl组阳性克隆数最多;ELISA测定瞬时转染后HUVEC培养上清中VEGF的表达量为532·5±43·1pg/ml。使用旋转培养装置的细胞均匀地粘附于复合血管,未使用者细胞积聚于血管腔面下部;转入和未转入VEGF165基因的HUVEC在复合血管内腔面覆盖面积百分比分别为69·9%±3·5%、43·7%±2·5%,有明显改善。结论:转入VEGF后可促进HUVEC在复合血管上生长,旋转培养装置有利于细胞的均匀粘附。     

神经干细胞球生长动力学模型

神经干细胞的体外大规模培养对于细胞移植治疗中枢神经系统受损及各种神经退行性疾病有重大意义。体外呈球状生长的神经干细胞球在长大到一定尺寸之后，有可能在其内部由于养分缺乏而形成坏死细胞，这对于干细胞的有效扩增是极为不利的。因此，模拟神经球的动态生长过程并分析出现坏死细胞的临界神经球尺度对于神经干细胞的大规模扩增有重要意义。本研究采用元胞自动机技术建立了模拟神经球生长的动态模型，并结合神经球内养分的扩散传递模型，求解神经干细胞球内出现坏死细胞的临界神经球尺寸以及坏死细胞的扩大规律。计算结果表明，坏死细胞的出现与体外培养条件有一定关系；坏死细胞的出现主要取决于神经球的尺寸，其外部再好的培养条件也不可能抑制坏死的出现。此外，计算结果还表明，神经球内由于氧缺乏而形成的坏死细胞的出现要早于由于葡萄糖缺乏时的情况，并且坏死细胞一旦出现，其增长速度就非常快，有可能很快使整个神经球成为坏死细胞球。本研究所建立的CA模型及神经球内的传质模型可以很好的模拟神经球的生长过程。     

绿色荧光蛋白、菲立磁体外双标记神经干细胞及其活性的研究

目的探索用绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)重组逆转录病毒和菲立磁(超顺磁性氧化铁,,Superparamagnetic Iron Oxide,SPIO)体外双标记神经干细胞的可行性及其对细胞活力的影响。方法用病毒介导的GFP基因转导大鼠胚胎神经干细胞。用SPIO和Lipofectamine体外磁化标记经GFP标记的胚胎神经干细胞。用荧光显微镜观察双标记神经干细胞,并行普鲁士蓝染色,了解转染成功率。MTT(四甲基偶氮唑蓝)法检测标记神经干细胞的细胞增殖活力。结果双标记神经干细胞分化的细胞荧光显微镜下观察见发出绿色荧光,普鲁士蓝染色呈阳性。而未标记神经干细胞荧光显微镜下观察未见发出绿色荧光,普鲁士蓝染色呈阴性。MTT法检测发现GFP和SPIO双标记神经干细胞的增殖活力与未标记神经干细胞相比无改变。结论绿色荧光蛋白重组逆转录病毒和菲立磁可以有效地标记体外分离培养的大鼠胚胎神经干细胞。双标记神经干细胞的增殖、分化活力与未标记神经干细胞相比无改变。     

泌尿外科见习带教体会

医学生在完成基础课与部分临床课学习之后进入临床见习阶段。临床见习课程是理论同实践相结合的第一步，在医学教学中起着承前启后的作用，主要目的是巩固课堂讲授内容、培养学生独立思考与实际工作的能力。作者在传统见习带教模式中，不断探索新的带教方法，结合泌尿外科学自身特色，坚持“以兴趣为先导，以问题为基础，以学员为主体，以教师为主导”的教学模式，逐渐提高了医学生的学习兴趣，培养了发现问题、解决问题的能力，收到较好效果。     

柴胡加龙骨牡蛎汤治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病合并焦虑抑郁研究进展

冠状动脉粥样硬化性心脏病（CHD）是全球常见的慢性病之一,焦虑和抑郁是其发生不良预后事件的潜在与关键危险因素。柴胡加龙骨牡蛎汤（CLMT）首见于《伤寒论》,为治疗少阳病兼心神逆乱证的经典名方,具备和解少阳、镇惊安神之功效。目前机制研究表明CLMT能通过调控相关信号通路、抑制相关炎症因子表达、改善氧化应激损伤、调节神经递质水平、抑制下丘脑-垂体-肾上腺轴亢进、促进骨髓间充质干细胞动员、抑制血小板活化等多途径对CHD合并焦虑抑郁发挥作用。临床研究表明CLMT对CHD合并焦虑抑郁导致的心绞痛、失眠等症状具有显著改善作用,可有效减轻患者负性情绪、改善中医证候积分、降低炎症因子水平等,且与西医常规治疗相比不良反应少,安全性较高。该文通过归纳整理近15年来中国知网（CNKI）、万方（Wanfang）、维普（VIP）、PubMed等数据库关于CLMT治疗CHD合并焦虑抑郁的文献,对其进行了机制及临床研究的综述,以期为CLMT指导CHD合并焦虑抑郁的进一步研究提供参考。     

2000~2019年4起重症监护病房火灾的分析与思考

重症监护病房(ICU)内易燃物多、高精尖设备多。为了做好其防火工作,文章搜集了2000~2019年我国境内医院ICU的4起火灾,对火灾时间、医院等级、起火部位和直接原因进行统计分析,提出了具体的防范措施。     

2013年-2017年我国血站收入的结构变动情况分析△

目的：对我国不同类型血站的收入状况进行问卷调查和深度访谈,分析近年来我国血站收入结构变动情况及特征,找到影响血站收入结构变动的主要项目,合理优化血站收入结构。方法：2018 年8月采用普查的方法对全国353家（32 家血液中心、321 家中心血站）的收入状况进行问卷调查,同时选取山东省6地市中心血站的负责人进行深度访谈。对收集的血站收入数据,运用结构变动方法进行分析。 结果：2013年-2017年公益一类血站收入的结构变动度为24.22%,财政补助收入、事业收入是构成公益一类血站收入变动的主要来源,其中财政补助收入的贡献率53.20%;2013年-2017年我国公益二类血站收入的结构变动度为16.79%,财政补助收入、事业收入是构成公益二类血站收入变动的主要来源,其中贡献率最大的是事业收入49.99%。结论：财政补助收入、事业收入是影响血站收入结构变动的主要项目,两类血站的日常运营与建设对财政补助收入高度依赖,公益二类经营收入增幅不明显,发展不足。     

南京市15所基层医疗机构软式内镜清洗消毒现状调研

目的：了解南京市15所基层医疗机构内镜中心的医院感染管理和内镜清洗消毒效果的现状,提出行之有效的改进措施。方法：根据《软式内镜清洗消毒技术规范》设计调查表,通过现场调研的方式,对内镜中心的布局设施、清洗消毒（灭菌）流程、监测和记录、培训和职业安全防护四个方面进行评定。同时,现场抽检内镜的清洗消毒质量。结果：15所基层医疗机构中,93.3%的内镜中心配备四槽以上的清洗消毒站,33.3%配备自动清洗消毒机,60.0%每天（或每次）对内镜进行测漏,40.0%每季度开展内镜消毒效果监测,约46.7%为工作人员配备防护用品和开展培训。现场抽检的结果,内镜的消毒质量合格率在80%-90%。结论：目前我市基层医疗机构内镜中心的医院感染管理仍存才诸多问题,需采取多方面的改进策略,以建立完善的管理制度和流程。     

患者安全文化调查问卷HS-OPSC 2.0版的评价与思考

患者安全文化测评有助于评估医疗机构的安全状况。美国医疗健康研究与质量机构（AHRQ）发布的HSOPSC是患者安全文化测评工具的典型代表。2019年,AHRQ根据相关意见和建议修订完成了HSOPSC 2.0版,在保留1.0版优势的基础上精简了维度和条目数量,具有良好的信度和效度,可以作为我国医疗机构患者安全文化测评的有效工具。但由于测量结果的定量特征,建议辅以定性研究对潜在文化价值和更深层次文化假设进行深入分析,同时思考如何将测评结果与干预措施结合起来,以更好地评估干预效果。     

GDM患者脂肪组织中HMGB1表达与产后糖代谢异常的关系

目的研究脂肪组织中高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达增加与妊娠期糖尿病(GDM)患者胰岛素抵抗程度及产后糖代谢异常的关系。方法选择2016年10月至2019年3月期间在海安市中医院诊断为GDM并接受剖宫产的126例患者作为GDM组,选择同期在该院接受剖宫产的健康孕妇150例作为对照组,检测剖宫产当天孕妇血清HMGB1、空腹胰岛素(FINS)的含量及脂肪组织中HMBG1、胰岛素受体底物(IRS)-1、IRS-2的表达水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。随访产后1年内糖代谢异常的发生情况并绘制K-M曲线。结果GDM组患者脂肪组织中HMGB1的表达水平、血清HMGB1含量及FINS、HOMA-IR水平明显高于对照组(t值分别为14.496、16.503、19.068、13.446,P<0.05),脂肪组织中IRS-1、IRS-2的表达水平明显低于对照组(t值分别为11.616、10.596,P<0.05);GDM组患者脂肪组织中HMGB-1的表达水平与血清HMGB1、FINS的含量及HOMA-IR的水平呈正相关(r值分别为0.405、0.358、0.405,P<0.05),与脂肪组织中IRS-1、IRS-2的表达水平呈负相关(r值分别为-0.278、0.255,P<0.05);经K-M曲线分析,与GDM组中脂肪组织HMGB1低表达患者比较,HMGB1高表达患者产后1年糖代谢异常累积发生率明显升高(χ^(2)=3.933,P<0.05)。结论GDM患者脂肪组织中HMGB1表达增加与胰岛素抵抗的加重、产后糖代谢异常的发生有关。