地塞米松对大鼠生长板软骨细胞TGF-β1表达的影响

目的观察药理剂量地塞米松对大鼠生长板软骨细胞TGF-β1表达的影响，探讨地塞米松抑制大鼠骨骼生长的机制。方法3周龄清洁级纯系雄性SD大鼠，随机分为实验组12只和对照组8只。实验组大鼠腹腔注射地塞米松（200μg／100g，10d）处理，对照组注射等容积的生理盐水。胫骨切片做TGF-β1免疫组化分析。结果对照组大鼠生长板TGF-β1免疫组织化学染色切片肥大带软骨细胞呈现免疫阳性反应。地塞米松处理使大鼠生长板肥大软骨细胞TGF-β1表达增加。结论药理剂量地塞米松促进肥大带软骨细胞表达TGF-β1，从而抑制骨骼纵向生长。     

内脂素在MIN6胰岛β细胞的表达及葡萄糖和棕榈酸对其表达的影响

Visfatin was expressed in rat anti mouse islets,as well as in MIN6 cells. The visfatin expression was affected by various concentrations of environmental glucose (5.5 and 33.3 mmoL/L) and palmitate(0.5 mmol/L). As compared with low-level glucose medium (5.5 mmol/L, 1.0±0.11) , visfatin expression increased in media with high glucose and palmitate (1.32 ±0. 18, 1. 33±0. 15,1.72±0.27, all P<0. 05). The result suggests that visfatin seems to be involved in the regulation of insulin secretion.     

皮(肌)瓣治疗小腿长段骨坏死实验研究与临床应用

[目的] 探讨皮（肌）瓣治疗骨坏死的可行性。[方法]应用新西兰大白兔48只，随机分为对照组、实验组。按实验方法将胫骨制成骨坏死模型。对照组用游离皮片覆盖坏死骨；实验组用腓肠肌皮瓣覆盖坏死骨。术后2、4、8、12周行ECT、X线片、骨钙素（BGT）、组织切片检查。临床应用436例。[结果]ECT显示实验组动脉相放射摄入值及延迟相放射摄入值明显高于对照组（P〈0．02）；血清BGP水平实验组各时段均比对照组高（P〈0．001）；组织学检查4周实验组髓腔中可见增生的血管，大量骨细胞；X线片12周实验组的胫前皮质骨接近正常骨，而对照组皮质骨仍为坏死、骨质硬化。临床应用小腿外观好，足部肿胀消退，创面感染治愈，坏死骨成活，骨髓腔再通。[结论]用血运丰富的皮（肌）瓣覆盖坏死胫骨段后，血运改善，坏死骨可以成活。     

妊娠期妇女外阴阴道念珠菌病的病原学和治疗研究

目的 调查孕妇外阴阴道念珠菌病(vulvovaginal candidiasis，VVC)的发病率，对检出的VVC进行病原学和治疗研究。方法 连续对产科门诊1000例孕妇进行VVC发病情况调查。对分离的念珠菌进行体外抗真菌药物敏感试验。对66例VVC患者应用咪康唑栓治疗，400mg／d，6d为一疗程。结果 孕妇VVC的发病率为12．7％(127／1000)。37．4％(374／1000)的孕妇以往有VVC病史，0．6％的孕妇为复发性VVc。127例VVC中，白念珠菌、光滑念珠菌、热带念珠菌和克柔念珠菌分别占87．1％、9．9％、1．5％和1．5％。有4例患者同时感染2种念珠菌。114株白念珠菌对咪康唑、克霉唑、氟康唑、伊曲康唑、制霉菌素耐药率依次为10．5％、2．6％、6．1％、7．9％和0。13株光滑念珠菌对咪康唑和制霉菌素均敏感，对克霉唑、伊曲康唑和氟康唑均敏感或剂量依赖敏感。应用咪康唑栓治疗的患者在治疗完成后1～2周及4～6周的病原学治愈率分别为84．8％和80．3％。结论 VVC是孕妇的常见病，白念珠菌仍然是主要致病菌，其次为光滑念珠菌。常用抗真菌药物对引起VVC的念珠菌存在不同程度的耐药率，应用咪康唑栓治疗孕妇VVC效果满意。     

三氧化二砷-碘油化疗栓塞对兔肝移植瘤转移及与血管形成关系的研究

目的观察三氧化二砷（ As2O3）-碘油经肝动脉化疗栓塞对兔VX2肝移植瘤生长及转移的影响及与血管形成的关系。方法 48只家兔肝内肿瘤种植后2周，完全随机法分为4组，经肝动脉插管分别给予不同处理，实验设生理盐水灌注组、单纯碘油栓塞组、阿霉素．碘油栓塞组及 As2O3-碘油栓塞组。治疗后1周，免疫组织化学测定肿瘤区的微血管密度（MVD），治疗后3周，测量计算肝移植瘤的体积、坏死面积，观察肝内、双肺及其他器官肿瘤转移的发生率。结果 治疗后1周，各组MVD分别为（21．8±5．3）、（23．4±3．9）、（22．4±4．50）、（14．3±3．4）条／400倍视野（F=11．246，P=0．000）， As2O3-碘油栓塞治疗组与其他组相比差异有统计学意义；肿瘤植入后5周，各处理组肿瘤体积分别为（35．5±7．1）、（21．2±8．3）、（20．7±9．1）、（11．8±3．7）cm^3（F=21．203，P=0．000）。单纯碘油栓塞组、阿霉素一碘油栓塞组及 As2O3-碘油栓塞组与生理盐水灌注组相比差异有统计学意义（q值分别为6．723、6．940、11．119，P〈0．05）， As2O3-碘油栓塞组与单纯碘油栓塞及阿霉素-碘油栓塞组相比差异有统计学意义（g值分别为4．398、4．178，P值均〈0．05）；各组肿瘤坏死面积间差异无统计学意义（F=1．284，P=0．292）； As2O3-碘油栓塞治疗组双肺转移结节数目少于其他组（H=14．983，P=0．002），结节直径小于其他组（F=4．580，P=0．007），差异有统计学意义。腹腔转移淋巴结记分显示 As2O3-碘油栓塞治疗组腹腔淋巴结转移少于其他组（H=9．148，P=0．027）。双肺转移结节的数目、直径及腹腔转移淋巴结与肿瘤的微血管密度呈正相关（P〈0．05）。结论 As2O3-碘油联合经肝动脉栓塞治疗，抑制兔肝移植瘤的生长，抑制肿瘤的肺及腹腔淋巴结转移，其抑制转移的机制可能与抑制肿瘤血管形成有关。     

儿茶酚胺类药物对感染性休克兔胃肠灌注的影响

Objective To assess the effects of dopamine,dobutamine and norepinephrine on the P(g-a)CO2 and superior mesenteric blood flow in septic shock.Methods Rabbit septic shock model was established by challenging with intravenous injection of lipopolysaccharides from Escherichia coil(2 mg/kg).The rabbits with septic shock were randomly assigned to 3 groups-dopamine group(n = 8),dobutamine group(n = 8) and norepinephrine group(n = 8).Apart from volume resuscitation with normal saline solution [20 ml/(kg· h)]，dopamine[5μg/(kg·min)],dobutamine[(5μg/(kg·min)]and norepinephrine [(1μg/(kg·min)]were infused in dopamine group,dobutamine group and norepinephrine group respeclively.Cardiac index(CI) and superior mesenteric blood flow index(SMBFI) were continuously monitored by doppler flowrneter.Gastric mucosal PCO2 was evaluated by gas tonometry every 10 min.Arterial and venous blood gas analyses and lactate levels were measured every 1 h.Results MAP,CI,and SMBFI significandy decreased and P(g-a) CO2 increased after lipopolysaccharides infusion in three groups.After 2-hour treatment,MAP in norepinephrine group[(70 +3) mm Hg]was higher than that of dopamine group[(66±4) mm Hg]and dobutamine group[(65±4) mm Hg](P ＜0.05).SMBFI in norepinephrine group [(18.7±2.9) ml/(kg·min)]was higher than that of dopamine group[(16.2±1.6) ml/(kg·min)]and dobutamine group[(15.8±1.9) ml/(kg·min)](P＜0.05).P(g-a) CO2 in norepinephrine group [(30±6) mm Hg]was lower than that of dobutamine group[(23±5)mm Hg](P＜0.05).Condnsion As an adjuvant therapy of volume resuscitation,norepinephrine is more effective than low dose dopamine and dobutamine in improving splanchnic perfusion.     

非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝脏内毒素受体表达上调

目的观察大鼠非酒精性脂肪性肝炎(NASH)伴肝纤维化模型形成过程中,肝脏内毒素受体表达的动态变化,以探讨NASH的发病机制。方法 45只雄性SD大鼠以高脂饮食喂养,分批于实验 8,12、16、24周处死。免疫组织化学法观察CD14表达,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法观察4型toll 样受体(TLR4)mRNA表达,RT-PCR法和酶联免疫吸附法分别测定肝脏和血清肿瘤坏死因子a(TNF a) 表达。同期正常饮食饲养大鼠作对照。结果实验8周大鼠单纯性脂肪肝阶段肝脏CD14和TLR4的表达就较正常对照上调(25．9±11．9对12．4 5．7、1．75±0．81对O．98±0．33,P<0．01和P<0．05),12周随着脂肪性肝炎的出现进行性增高(61．8±21．9和1．88±0．72,P值均<0．05),于16周达高峰(71．5±21．3 对5．64±0．87,P值均<0．01),24周略有回落(67．7±16．6和4．98±0．72,P值均<0.01)。肝脏和血清 TNF a表达也从8周开始上调,此后一直维持高水平表达。结论大鼠NASH形成过程中,肝脏内毒素受体CD14和TLR4表达逐渐上调。这可能是NASH大鼠内毒素肝损伤敏感性增强的原因之一,在NASH的发病中起了重要作用。     

肝病患者血清诱导间充质干细胞表达肝细胞特异性标志物的实验研究

目的：观察重型肝病患者血清对人骨髓间充质干细胞（MSCs）的诱导分化作用，探讨人MSCs分离培养、体外扩增的条件和方法。方法：从肋骨分离、培养人骨髓MSCs、体外扩增培养、鉴定，并采用重型肝病患者血清诱导培养，分别在诱导培养0、7、14、21、28天时留取细胞，并采用免疫细胞化学方法检测肝特异性标志物（AFP、Alb、CK-18）、用PAS进行糖原染色实验。结果：诱导后5天、MSCs表现为肝细胞样细胞，随着诱导培养时间的延长，肝特异性标志物逐渐出现和成熟。AFP在7天时表达水平最高，培养14、21、28天时表达逐渐减弱；Alb、CK- 18和糖原随着诱导时间的延长，表达逐渐增强。结论：密度梯度离心，贴壁培养和消化时间控制相结合，是一种较为有效的分离纯化方法。重型肝病患者血清能诱导骨髓MSCs表达肝细胞的特异性标志物。     

血清瘦素在男生青春发育期的动态观察

目的 探讨血清瘦素在男生青春期发育中的作用。方法 健康男生170名，调查首次遗精时间，测定血清瘦素、睾酮、促卵泡成熟激素、黄体生成激素水平，采用多元Logistic回归模型分析男生青春期发育的影响因素；同时，连续两年观察，分析血清瘦素在青春期的动态变化。结果 末次研究已遗精组血清瘦素、睾酮、促卵泡成熟激素、黄体生成激素水平均明显高于未遗精组。多因素分析显示血清瘦素、睾酮、促卵泡成熟激素、体重为男生青春期发育的独立影响因素。初次资料分析，遗精前组血清瘦素、睾酮明显高于未遗精组。结论 血清瘦素、睾酮、促卵泡成熟激素、体重为男生青春期发育的独立影响因素，男生遗精前期血清瘦素、睾酮已有明显改变。     

兔关节软骨细胞的分离、培养和形态学特征

[目的]探讨兔关节软骨细胞的分离、培养方法,观察单层高浓度培养时细胞表型表达情况.[方法]无菌条件下,从 2周龄新西兰白兔的颞颌关节及四肢关节髁突面削取软骨片,采用机械-酶消化法分离软骨细胞,经台盼蓝拒染计数,将细胞按 1× 106个 /孔接种于 6孔培养板,传代培养,描绘生长曲线.利用相差显微镜及透射电镜观察细胞形态.应用甲苯胺蓝及Ⅱ型胶原免疫组化对细胞进行鉴定.[结果]每克软骨能获取 1 5× 106个软骨细胞,活性率为 95%.培养 2～ 3 d,细胞贴壁、变形,呈多角形; 8 d左右,细胞融合成层.透射电镜观察显示细胞核圆形,有丰富的粗面内质网、高尔基体及分泌的基质成分.甲苯胺蓝及Ⅱ型胶原染色阳性.细胞传至 5代后,出现"成纤维细胞样".[结论]本研究建立了简单易行的软骨细胞分离、培养方法;初代、第 2代细胞生长良好,适合于实验研究;软骨细胞 5代培养后,细胞表型发生改变.