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101.
102.
目的:建立一种简单、稳定、可靠的PON1基因多态性分析法。方法:取外周静脉血100μl,用ROSE法提取基因组DNA,用两对引物:P192F 5′-TAT TGT TGC TGT GGG ACC TGA G-3′,P192R 5′-CAC GCT AAA CCC AAA TAC ATC TC-3′;P55F 5′-GAA GAG TGA TGT ATA GCC CCA G-3′,P55R 5′-TTT AAT CCA GAG CTA ATG AAA GCC-3分别进行PCR扩增,用限制性内切酶AlwI,NlaⅢ对两种PCR产物分别进行酶切,3%琼脂糖凝胶电泳。结果:扩增的两个PCR产物在192、55多态性位点大小分别为99bp、170bp。Alw I酶切后,凝胶电脉得到完全酶切(66bp,33bp),部分酶切(99bp、66bp、33bp),未被酶切(99bp)三种类型DNA片段(RR,QR,QQ基因型);NlaⅢ酶切后,凝胶电脉得到部分酶切(170bp,126bp,44bp),未被酶切(170bp)两种类型DNA片段(LM,LL基因型)。经双盲重复检测,结果一致。应用此方法对胃癌患者血样标本检测,发现其PON1基因多态性在192位点频率较高。结论:采用一步PCR-RFLP技术可以建立简单、稳定、可靠的PON1基因多态性分析法。 相似文献
103.
ELISA法检测可溶性人类白细胞抗原—I及广东人参考值的测定 总被引:3,自引:0,他引:3
OBJECTIVE: To explore a method for quantitative detection of soluble human leukocyte antigen class I(HLA-I) antigens, with the assistance of which we attempt to define the reference value of the antigen in the population of Guangdong Province. METHODS: Sandwich enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was employed with W6/32 monoclonal antibody serving as the solid phase antibody and beta2 microglobulin antibody as the first antibody. HRP-labeled second antibody and the substrate were added for enzyme-catalyzed coloring. On the basis of the standard curve obtained by sHLA-I standard reagent in serial dilution, the concentration of sHLA-I antigens in the samples of 60 normal subjects from the population of Guangdong province was detected. RESULTS: The sensitivity of this assay was 2.84 ng/ml with variation coefficients of 5.80% within the same batch and 9.00% between batches. The recovery rate ranged from 98.57% to 100.15%. The level of sHLA-I antigens in normal individuals was 699.54+/-360.10 ng/ml. CONCLUSION: Sandwich ELISA is sensitive, specific and stable in the detection of sHLA-I. 相似文献
104.
目的:为了解谷胱甘肽S-转移酶及其同工酶在原发性肝癌患者中的表达情况。方法:采用免疫组化方法对不同分化程度肝癌组织32例和肝硬化组织11例行GSTs和GST-π表达的研究,并以γ-GT作为对照;同时对128例不同肝病患者血清中GSTs活性作检测。结果:GSTs、GST-π及γ-GT的表达与肿瘤的分化程度有关,分化越差,阳性率越低,反之亦然;GST-π在分化良好组阳性表达率明显高于肝为后肝硬化组(P<0.05);血清GSTs活性检测肝癌组与正常对照组相比没有显著性差异(P>0.05)。结论:GST-π是优于γ-GT的肝癌标志酶,尤其在分化程度良好的肝癌,对临床区分肝癌的分化程度有一定的意义。 相似文献
105.
硒对紫外线诱导HLF细胞凋亡的保护作用 总被引:3,自引:1,他引:2
目的:探讨紫外线诱导人HLF细胞凋亡时DNA降解特点,以及硒对紫外线诱导细胞凋亡的保护作用。方法:紫外线分别照射体外培养的人肺成纤维细胞3min和5min,同时添加亚硒酸钠(8ng/ml),设立对照组。利用吖啶橙荧光染料染色鉴定凋亡细胞,利用琼脂糖凝胶电泳检测DNA ladder。结果:紫外线可以诱导人肺成纤维细胞(28代)凋亡,作用存在时间效应关系。紫外线诱导人肺成纤维细胞凋亡时,未出现典型的DNA ladder现象。硒对于紫外线诱导的细胞凋亡有显著的抑制作用。结论:DNA ladder不能作为细胞凋亡的唯一的标志,紫外线诱导的细胞凋亡与DNA ladder的出现并不总是一致的。硒具有拮抗紫外线诱导的细胞凋亡作用。 相似文献
106.
TRH、EGF及地塞米松促进未成熟胎肺组织分化及表面活性物质合成的研究 总被引:5,自引:3,他引:2
目的 比较TRH、EGF与地塞米松对未成熟胎肺形态发育及表面活性物质水平的影响。方法 在兔妊娠第22-24d或第24-26d分别用TRH、EGF或地塞米松母体静脉注射治病,通过光镜、图像分析及电镜等技术观察胎肺的形态结构,并检测胎肺的磷脂水平。结果 光镜下,TRH、EGF与地塞米松治疗组第25d及27d胎肺肺泡腔、肺泡间隔发育均明显好于对照组;EGF、TRH与地塞米松治疗组第27d胎肺的肺泡腔与肺泡间隔的面积比无明显差异。但EGF和TRH治疗组第25d胎肺的肺泡腔与肺泡间隔之比明显小于地塞米松治疗组。电镜下,三个治疗组第27d胎肺内含有板层体的Ⅱ型上皮细胞数量明显多于对照组,但各治疗组及对照组第25d的胎肺Ⅱ型上皮细胞胞浆内几乎未见明显板层体,相反胞浆内糖原含量却非常丰富。此外,三个治疗组27d胎肺的磷脂水平均明显高于对照组。结论 EGF、TRH及地塞米松在兔妊娠第24-26d母体治疗均能促进胎肺的形态发育和表面活性物质的合成,三种治疗方法对胎肺的影响程序无明显不同;在妊娠第22-24d治疗,地塞米松对胎肺形态结构的促进作用较EGF和TRH更明显,但三者对Ⅱ型上皮细胞分化及表面活性物质的合成均无明显影响。 相似文献
107.
三尖杉酯碱诱导慢性髓系白血病K-562细胞凋亡的实验研究 总被引:4,自引:0,他引:4
目的阐明三尖杉酯碱(HT)作用于K562细胞的机制。方法应用细胞形态、DNA凝胶电泳和流式细胞仪等检测,观察HT对K562细胞株的作用方式,进一步用RT-PCR方法研究bcr/abl基因在转录水平的改变。结果0.01~100.00μg/ml浓度HT可诱导K562细胞凋亡,并呈时间和剂量依赖性。随着药物作用时间的延长,bcr/abl基因的转录下调。结论低浓度HT就可通过抑制bcr/abl基因的表达,诱导K562细胞凋亡。 相似文献
108.
大鼠内毒素血症时外周血及肺泡内中性粒细胞死亡方式及呼吸爆发 总被引:2,自引:0,他引:2
本研究观察大鼠内毒素血症时肺组织中及外周血多形核中性粒细胞(PMN)凋亡,坏死及功能改变的差异。采用Wistar大鼠20只。腹腔注射LPS(O55B5,5mg/kg)造成内毒素血症,给予LPS后2,4,8,12小时(每组5只动物)取血及支气管肺泡灌洗,密度梯度法分离PMN,用流式细胞仪测定凋亡和坏死比例以及呼吸爆发功能的改变,同时采用5只大鼠作为正常对照。结果显示,内毒素血症时外周血和支气管肺泡灌洗液中PMN凋亡细胞比例相似。但与对照相比,外周血PMN坏死比例明显增加,呼吸爆发能力明显受抑,而支气管肺泡灌洗液PMN坏死比例显减少,呼吸爆发能力显增强。结论:在内毒素血症时,扣押于肺组织中的PMN在凋亡和坏死上表现出与比例显减少,呼吸爆发能力显增强,结论:在内毒素血症时,扣押于肺组织中的PMN在凋亡和坏死上表现出与外周血PMN不同的改变,其结果是组织中PMN存活增加,并持续处于活化状态,这与PMN造成组织损伤有关。 相似文献
109.
目的 探讨在多柔比星 (阿霉素 )肾病综合征 (NS)幼年大鼠肾损伤过程中核因子 (NF) κB和血管紧张素ATⅠ、ATⅡ的表达及其相关性。方法 4周龄雄性Wistar大鼠单侧肾切除加腹腔注射阿霉素造成NS模型 ,分别以免疫组织化学和原位杂交检测ATⅠ、ATⅡ和NF κB。结果 肾病组随着病变时间的延长 ,NF κB和ATⅠ、ATⅡ表达的强度和部位均呈增强趋势 ,治疗组在相同时间点则两者都有不同程度下调 (P <0 .0 5 )。结论 在阿霉素肾病损伤过程中NF κB和ATⅠ、ATⅡ起着介导作用。 相似文献
110.
目的:探讨杏贝冲剂对哮喘气道炎症关键物质磷脂酶A2(PLA2)的影响。方法:以卵蛋白激发造成豚鼠哮喘模型,观察杏贝冲剂作用下PLA2及其介导的支气管-肺泡灌洗液(BALF)中炎细胞成分、血浆炎性介质血栓素B2(TXB2)、6-酮-前列腺素F1α(6-K-PGF1α)的变化,并对哮喘症状加以分析。结果:杏贝冲剂治疗组PLA2、TXB2水平降低,BALF中嗜酸细胞成分明显减少,哮喘激发时间和症状改善。结论:杏贝冲剂通过对PLA2的影响,起到抗炎控制哮喘的作用。 相似文献