Cell-free fetal DNA and intact fetal cells in maternal blood circulation: implications for first and second trimester non-invasive prenatal diagnosis

Both intact fetal cells as well as cell-free fetal DNA are present in the maternal circulation and can be recovered for non-invasive prenatal genetic diagnosis. Although methods for enrichment and isolation of rare intact fetal cells have been challenging, diagnosis of fetal chromosomal aneuploidy including trisomy 21 in first- and second-trimester pregnancies has been achieved with a 50-75% detection rate. Similarly, cell-free fetal DNA can be reliably recovered from maternal plasma and assessed by quantitative PCR to detect fetal trisomy 21 and paternally derived single gene mutations. Real-time PCR assays are robust in detecting low-level fetal DNA concentrations, with sensitivity of approximately 95-100% and specificity near 100%. Comparing intact fetal cell versus cell-free fetal DNA methods for non-invasive prenatal screening for fetal chromosomal aneuploidy reveals that the latter is at least four times more sensitive. These preliminary results do not support a relationship between frequency of intact fetal cells and concentration of cell-free fetal DNA. The above results imply that the concentration of fetal DNA in maternal plasma may not be dependent on circulating intact fetal cells but rather be a product of growth and cellular turnover during embryonic or fetal development.     

15-脂氧酶-1基因表达调节研究进展

15-脂氧酶-1（15-LOX-1）是脂质过氧化物酶，分别以亚油酸、花生四烯酸为底物氧化生成13-羟基-十八碳二烯酸（13-HODE）、15-羟基-二十碳四烯酸（15-HETE）。15-LOX-1基因表达在转录、翻译、翻译后修饰各个水平都受到多种因素的调节，影响着15-LOX-1的表达量和酶催化活性。本文就15-LOX-1转录、翻译、翻译后修饰各个环节的调节因素作一简要介绍。     

中国Leber遗传性视神经病变G11696A突变两个家系分析

目的对两个中国Leber遗传性视神经病变(Leber’shereditary optic neuropathy,LHON)家系的临床和分子遗传学特征进行分析。方法眼科临床检查发现在这两个家系中只有先证者1人出现视力障碍,发病年龄分别为10岁和17岁。对这两个家系先证者使用24对有部分重叠的引物进行线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)全序列扩增分析。结果没有发现mtDNAG11778A、G3460A和T14484C3个常见的突变位点,而发现了与LHON相关的ND4G11196A同质性突变位点的存在,在167名正常对照只发现1例G11696A突变。结论线粒体DNA全序列分析发现两个家系呈现独特的mtDNA多态性,都属于东亚单体型D4。不完全外显率和正常对照频率(1/167)表明G11696A突变本身不足以导致LHON的发生,说明其它因素在这两个LHON家系的表型表达中也起一定的作用。在这些家系mtDNA中缺乏影响重要功能突变位点的存在,排除了线粒体背景对LHON临床表型的影响。因此,核修饰基因、环境因素可能对两个中国G11696A突变家系的外显率和发病严重程度起促进作用。     

骨髓神经组织定向干细胞的分离培养鉴定

目的:为临床中枢神经系统疾患的细胞移植及组织工程修复周围神经提供一种应用广泛、可来源于自体、无免疫排斥和伦理道德等问题的移植用种子细胞。方法:采用DMEM/F12(1∶1)无血清神经干细胞培养液,通过先贴壁、后悬浮的方法从大鼠骨髓中分离、培养单克隆生长的神经组织定向干细胞(neural tissue-committed stem cells,NTC-SCs),通过免疫细胞化学检测NTCSCs细胞球CXCR4和Nestin蛋白,以及细胞球自然分化后神经元β-TublinⅢ、MAP2ab以及神经胶质细胞CNPase、GFAP等蛋白的表达。结果:NTCSCs细胞球表达神经干细胞标志蛋白Nestin和组织定向干细胞标志蛋白CXCR4;NTCSCs细胞球在含15%胎牛血清的DMEM培养液中可自然分化,免疫荧光显示神经元和神经胶质蛋白β-TublinⅢ、MAP2ab、CNPase、GFAP等标志物阳性。结论:本研究提供了一种操作简便、成本低廉的NTCSCs的分离培养方法,NTCSCs作为种子细胞为脑、脊髓等神经系统疾患和创伤的修复和治疗提供了广阔的应用前景。     

北京市三所高校大学生SARS流行期的心理状态现况调查

目的 :了解SARS流行时期大学生在封闭式管理下的心理状况。方法 :采用症状自评量表、ZUNG氏焦虑自评量表、ZUNG氏抑郁自评量表和一般状况调查表 ,以分层整群抽样的方法 ,对北京市三所重点大学 62 80名在校本科大学生和研究生进行了心理状况自评问卷调查。结果 :症状自评量表的因子阳性检出率为 7 3 % ,各因子得分均明显低于既往北京市大学生调查结果 ;除恐怖因子和精神病性因子外 ,各因子得分均低于或接近国内常模 (t=2 17-5 3 65 ,P <0 0 5 )。焦虑症状阳性检出率为 9 5 % ,抑郁症状阳性检出率为 2 9 6%。结论 :北京市SARS流行期间大学生存在焦虑、抑郁症状 ;采取了有效的传染病防治和健康教育等措施后大学生群体的心理健康状况良好。     

潮汕地区汉族人群20个Y染色体短串联重复序列基因座复合扩增及遗传多态性

目的获得20个Y染色体短串联重复序列（Yshort tandemrepeats,Y-STR）基因座及其单倍型在潮汕地区汉族人群中的遗传多态性分布情况,评估其法医学应用价值。方法通过建立3组Y-STR荧光标记复合扩增系统（MultiplexⅠ：DYS434,Y-GATA-A10,DYS438,DYS439,DYS531,DYS557,DYS448,DYS456,DYS444;MultiplexⅡ：DYS458,DYS460,DYS443,DYS447,DYS446,DYS709;MultiplexⅢ：DYS622,DYS635,Y-GATA-H4,DYS520,DYS630）,对潮汕地区汉族158名无关男性个体进行20个STR基因座的复合扩增,用ABI310基因分析仪对扩增产物进行检测,统计20个Y-STR基因座的群体遗传学参数。结果3组复合扩增系统均可成功进行分型,基因多样性（gene diversity,GD）值最低为0.2506（DYS434）,最高为0.8034（DYS447）;20个Y-STR基因座共同构成的单倍型157种,其中156种为唯一的,单倍型多样性为0.999998。另对30个父性家系调查显示：同一家系成员20个Y-STR基因座单倍型一致,未观察到基因突变。结论20个Y-STR基因座具有丰富的遗传多态性,父系遗传稳定,建立的3组Y-STR荧光标记复合扩增系统分型可靠,可用于法医学个体识别和亲权鉴定。     

Identification of MEN1 gene mutations in sporadic carcinoid tumors of the lung

Lung carcinoids occur sporadically and rarely in association with multiple endocrine neoplasia type 1 (MEN1). There are no well defined genetic abnormalities known to occur in these tumors. We studied 11 sporadic lung carcinoids for loss of heterozygosity (LOH) at the locus of the MEN1 gene on chromosome 11q13, and for mutations of the MEN1 gene using dideoxy fingerprinting. Additionally, a lung carcinoid from a MEN1 patient was studied. In four of 11 (36%) sporadic tumors, both copies of the MEN1 gene were inactivated. All four tumors showed the presence of a MEN1 gene mutation and loss of the other allele. Observed mutations included a 1 bp insertion, a 1 bp deletion, a 13 bp deletion and a single nucleotide substitution affecting a donor splice site. Each mutation predicts truncation or potentially complete loss of menin. The remaining seven tumors showed neither the presence of a MEN1 gene mutation nor 11q13 LOH. The tumor from the MEN1 patient showed LOH at chromosome 11q13 and a complex germline MEN1 gene mutation. The data implicate the MEN1 gene in the pathogenesis of sporadic lung carcinoids, representing the first defined genetic alteration in these tumors.      

成都市猪肉源沙门菌优势血清型及耐药性研究

目的 了解成都市2020年猪肉源沙门菌优势血清型分离株的耐药表型及耐药基因携带情况,为成都市食品安全市场监管提供数据支撑。方法 对2020年成都市202株猪肉源沙门菌分离株用微量肉汤稀释法对临床常用的15种抗生素进行药敏实验,并开展全基因组测序,对分离株进行血清型预测、耐药基因注释。结果 202株沙门菌共包含17种血清型,优势血清型为罗森31.68%（64/202）、伦敦18.81 %（38/202）、德尔比18.32 %（37/202）血清型,耐药率分别为96.88%、89.47%、97.30%;三种沙门菌均对四环素耐药率最高,分别为92.19%、89.47%、94.59%;三种沙门菌多重耐药严重、耐药谱复杂;三种沙门菌共检出7大类49种耐药基因,以氨基糖苷类携带率最高（98.44%、97.37%、94.59%）且种类最多（19种）,大环内酯类携带率最低（12.50%、39.47%、8.11%）且种类最少（3种）,其余抗生素耐药基因携带情况各有差异。结论 成都市猪肉源沙门菌优势血清型对常用抗生素耐药较为严重,耐药谱复杂,耐药基因携带率高。     

糖尿病患者药物治疗认知、态度与依从性研究

目的 了解糖尿病患者药物治疗依从性现状及其影响因素,探讨药物治疗认知、态度与依从性之间的关系,为改善药物治疗依从性提供参考。方法 采用分层抽样方法,在山东省东中西部地区选取900名纳入基本公共卫生服务的糖尿病患者进行问卷调查,对842份有效问卷进行描述性分析、χ2检验以及多因素logistic回归分析。结果 842名糖尿病患者中,52.7%的患者药物治疗依从性较好。年龄越大的患者药物治疗依从性越差（OR = 0.66,95%CI:0.46～0.94,P = 0.022;OR = 0.46,95%CI:0.30～0.71,P＜0.001）;病程5～10年的患者比小于5年的患者药物治疗依从性更好（OR = 1.43,95%CI:1.03～1.98,P = 0.034）;药物治疗认知水平越高的患者药物治疗依从性越好（OR = 2.78,95%CI:1.21～6.38,P = 0.016;OR = 2.89,95%CI:1.27～6.58,P = 0.012）;药物治疗态度较好的患者比较差的患者药物治疗依从性更好（OR = 2.58,95%CI:1.28～5.18,P = 0.008）。结论 糖尿病患者的药物治疗依从性仍有待提升;提高患者的药物治疗认知水平与治疗态度有助于提高药物治疗依从性;应加强对糖尿病患者的健康知识教育,转变患者的药物治疗态度。     

2018—2021年北京市沙门菌血清型及喹诺酮类耐药表型和基因型分析

目的 分析2018—2021年北京市肠道门诊哨点医院分离到的沙门菌血清型及喹诺酮类药物耐药表型和耐药基因的流行情况。方法 采用玻片凝集法鉴定血清型;微量肉汤稀释法测定药物敏感性;全基因组测序数据通过与MLST和ResFinder数据库比对,查询ST型别和耐药基因。结果 228株沙门菌共检出42种血清型,51种ST型。其中肯塔基沙门菌、肠炎沙门菌和黄金海岸沙门菌等9种血清型比较常见。77株沙门菌（33.8%）对萘啶酸耐药;40株（17.5%）对环丙沙星和左氧氟沙星耐药;38株（16.7%）对吉米沙星耐药。不同血清型对喹诺酮类药物的耐药性不同。228株沙门菌共筛选出5种喹诺酮耐药基因:qnrS（23.7%）、aac(6’)-Ib-cr（8.3%）、qnrB（6.6%）、OqxAB（1.3%）和qepA（0.4%）;喹诺酮耐药决定区存在gyrA和parC的7种氨基酸突变:以parC:T57S（70.2%）最常见,其次是gyrA:D87N（14.9%）、parC:S80I（14.5%）、gyrA:S83F（14.5%）、gyrA:D87Y（7.9%）、gyrA:D87G（5.3%）和gyrA:S83Y（1.8%）。在组合突变中,以parC:S80I-gyrA:D87N-gyrA:S83F三突变,并伴随parC:T57S最多。耐药基因和突变位点在9种常见血清型中的检出率存在差异。结论 北京市沙门菌血清型及ST型种类繁多,携带喹诺酮耐药基因以qnrS、aac(6’)-Ib-cr和 qnrB为主,存在gyrA和parC多个位点突变并协同作用。应持续监测血清型和耐药性,以指导临床有针对性合理用药。