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目的 表达人血小板衍生生长因子(PDGF)BB蛋白并进行生物学活性鉴定.方法 基因扩增方法获得人PDGF-B基因;原核表达PDGF-BB蛋白,并纯化、复性;免疫印迹分析重组蛋白的免疫原性;应用培养的大鼠成骨细胞对其生物学活性进行鉴定.结果 扩增出327bp目的基因,与预期结果吻合,DNA序列分析正确.SDS-PAGE和免疫印记检测表明获得新生蛋白的分子量及免疫原性均与预期符合.体外细胞学鉴定表明,获得的rhPDGF-BB可明显促进大鼠成骨细胞的增殖和DNA复制,表明重组的PDGF-BB具有较好的生物学活性.结论 PDGF-B成熟肽基因克隆成功并成功地在大肠杆菌中实现了高表达.复性后细胞学MTT和FCM鉴定表明获得的rhPDGF-BB具有较好的生物学活性,为生产活性PDGF-BB蛋白及其在促进骨组织和创伤修复方面的进一步功能研究奠定了基础. 相似文献
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柱前衍生HPLC法结合固相萃取测定血浆中卡托普利 总被引:7,自引:0,他引:7
目的:建立测定血浆中卡托普利浓度的方法,用于卡托普利人体药动学及相对生物利用度研究。方法:以对溴苯甲酸甲基溴为衍生化试剂,固相萃取法从生物样本中提取纯化衍生化产物,以反相高效液相色谱法测定衍生物含量而确定卡托普利血药浓度。结果:卡托普利血药浓度在10~1000ng·mL~(-1)范围内线性良好,相关系数为0.9987,测得平均回收率为98.65%,日内、日间RSD均小于10%。结论:本方法简便、准确、干扰小,适合用于卡托普利血药浓度监测及药动学研究。 相似文献
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目的探讨血浆置换术后联合小剂量激素治疗溶血尿毒综合征(HUS)的疗效。方法回顾性分析近5 a来本院肾内科11例HUS患儿临床资料。男6例,女5例;年龄2~9岁,平均年龄5.2岁。重症10例,轻症1例。其中8例进行血浆置换治疗,每例2、3次,术后应用泼尼松(1.0~1.5 mg.kg-1)或甲泼尼龙(1 mg.kg-1)维持;其中1例联合血液透析治疗,1例联合连续性血液滤过治疗。轻症1例采用大剂量丙种球蛋白(丙球)治疗。1例重症HUS外院进行血液透析1个月余转本院继续血液透析治疗。1例重症HUS外院采用大剂量丙球冲击联合甲泼尼龙治疗后继续甲泼尼龙1 mg.kg-1治疗和肠道透析。结果 19例次血浆置换治疗均顺利实施,无明显并发症;8例血浆置换后联合小剂量激素治疗者中7例肝酶、心肌酶、肾功能恢复正常,尿常规镜下血尿或并轻中度蛋白尿出院,追踪观察2~26个月,复查肾功能均正常,尿蛋白阴性,5例镜下轻微血尿[RBC(9~36)×106L-1],1例感染后轻微镜下血尿,1例尿常规正常。轻症1例出院时尿常规和肾功能均正常,门诊随诊38个月尿常规正常。2例外院治疗的重症HUS患儿转入本科时病程1周~1个月,血小板已恢复正常,Hb无继续下降,尿常规示肉眼血尿和中量蛋白尿,处于肾衰竭期。其中1例血液透析6次,肾功能稍好转、肉眼血尿并中量蛋白尿,放弃治疗出院。1例经肠道透析和口服激素等措施后放弃治疗出院。结论重症HUS患儿宜早期应用血浆置换治疗,血浆置换治疗后联合小剂量激素治疗可改善重症HUS患儿预后,减少后遗症。 相似文献
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目的 :研究表没食子儿茶素没食子酸酯(epigaloctechin-3-gallit,EGCG)对脊髓损伤(spinal cord injury, SCI)大鼠炎症因子的释放及神经营养因子表达的影响。 方法 :建立大鼠脊髓半切SCI模型。SCI大鼠给予EGCG治疗24 h后取血清和受损伤脊髓局部组织。ELISA法测定血清白介素-6(IL-6)、白介素-8(IL-8)含量;Western blot法测定脊髓组织neurotrophin-3(NT-3)、brain-derived neurotrophic factor(BDNF)蛋白表达。 结果 :与模型组比较,EGCG能显著降低SCI大鼠血清炎性因子IL-6、IL-8的浓度,促进脊髓组织内源性NT-3、BDNF表达。 结论 :EGCG可抑制炎症因子释放,增加内源性神经营养因子表达。 相似文献
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目的研究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对体外培养食管癌细胞增殖、凋亡和转移的影响及其分子机制。方法采用CCK-8法和细胞克隆形成法检测EGCG对食管癌细胞增殖的影响;流式细胞法检测细胞凋亡及周期分布;Transwell法检测细胞体外侵袭力的改变;免疫印迹法检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)表达水平。结果 EGCG处理后,食管癌细胞的增殖和侵袭能力明显受到抑制,凋亡率也显著增高,呈量效关系;随着EGCG浓度升高,GRP78蛋白表达水平明显下降。结论 EGCG可对食管癌细胞产生抑制增殖、诱导凋亡、降低侵袭和转移等作用,可能与其下调细胞内GRP78蛋白有关。 相似文献
69.
肾虚不孕中医药研究思路探析 总被引:10,自引:0,他引:10
目的 :分析肾虚型排卵障碍或着床失败引起的不孕的中医药研究的方法和思路。方法 :从卵泡生长发育相关因素如IGF - 1mRNA、EGFmRNA ,卵泡基质崩解相关因素如MMPsmRNA、PAmRNA、PAI- 1mRNA等相关因素 ,以及与着床粘附有关的内膜细胞整合素β3mRNA表达等角度 ,探讨中医药治疗不孕的可能分子机制 ,并且各因素之间存在互动关系。结果 :补肾或补肾化瘀方药可能通过促进卵泡发育成熟 ,并诱发成熟卵泡破裂 ,稳定子宫内膜有利于孕卵着床等角度防治不孕。结论 :中医药治疗排卵障碍或着床失败所致不孕具有传统优势 ,提取分离补肾或补肾化瘀方药有效成分 ,从分子水平探讨中药复方有效成分对各指标互动关系影响作用 ,不孕研究可能取得重要进展。 相似文献
70.
目的 初步调查广西成年人中医体质类型分布情况.方法 采用标准化的《中医体质分类与判定自测表》对到我院治未病中心接受体检以及长期在南宁市、武鸣县、钦州市、贺州市生活的成年人共3000例进行问卷调查、评估.结果 3000例被调查者中,平和质612例(20.4%)、痰湿质504例(16.8%)、阳虚质431例(14.3%)、气虚质422例(14.1%)、湿热质353例(11.8%)、阴虚质348例(11.6%)、气郁质159例(5.3%)、血瘀质100例(3.3%)、特禀质71例(2.4%).结论 9种体质在人群中均存在,平和质所占比例较高,男性以痰湿质、湿热质多见,女性以阳虚质、气郁质、阴虚质和气虚质为主. 相似文献