槲皮素对NB4,HL—60细胞形态、PML mRNA及蛋白表达的影响

目的 探讨槲皮素对NB4,HL-60细胞的形态、PML mRNA及蛋白的表达影响。方法 以NB4,HL-60细胞为研究对象,细胞形态学观察采用Wright′s染色法及荧光染色法;PML蛋白细胞内分布定位采用免疫荧光技术;PML mRNA表达采用RT-PCR法。结果 1）经槲皮素处理后,各组细胞形态学上均出现凋亡特征性改变。2）槲皮素处理后NB4细胞内融合蛋白降解,PML聚积于POD结构,随后降解;在HL-60细胞,PML发生相似改变。3）槲皮素处理后各组细胞PML mRNA表达均无显著影响。结论 在槲皮素诱导下,PML在蛋白水平参与诱导白血病细胞凋亡机制;槲皮素能诱导,NB4,HL-60细胞凋亡,抑制白血病细胞生长。     

新型免疫抑制剂霉酚酸酯治疗狼疮性肾炎

目的观察新型免疫抑制剂霉酚酸酯(M.MF)治疗狼疮性肾炎的临床疗效和安全性。方法经肾活检证实的20例狼疮性肾炎,给予糖皮质激素联合MMF治疗。MMF初始剂量1.0～1.5g/d,治疗时间321个月,平均(10.9±6.2)个月。结果MMF治疗后24h尿蛋白定量从治疗前的平均5.55g下降至1.54g;d清白蛋白治疗前平均26.87g升至39g;6/8例肾功能不全患者3个月内Scr恢复正常;d清自身抗体产生明显减少,补体上升,其中ANA转阴率3个月达63％,6个月达81％;抗ds-DNA由治疗前23.77IU／ml下降至9.19IU／ml;2例重复活检,肾小球活动性病变明显减轻。MMF治疗的不良反应较少,偶有白细胞减少、感染、带状疱疹等。结论MMF对于各型狼疮性肾炎,尤其是Ⅳ型重症狼疮,经传统治疗无效者均有较好疗效,且长期应用不良反应少。     

DNA拓扑异构酶I与肿瘤化疗

DNA拓扑异构酶 (topoisomerase ,TOPO )是一种基本的核酶 ,催化超螺旋结构的双链 DNA中某一条链的断裂和再接反应 ,从而改变 DNA的拓扑学状态 ,参与细胞DNA的复制和转录。TOPO 抑制剂是一类以 TOPO 为靶点的抗肿瘤药物 ,肿瘤细胞对 TOPO 抑制剂的耐药机制是复杂多样的 ,其中最主要的是 TOPO 基因突变和 TOPO 表达水平下降以及 TOPO 酶活性降低。笔者就近年来关于这方面的研究作一文献综述。1　 TOPO 及其抑制剂的作用机制人的 TOPO 是由 2 0号染色体上单拷贝基因编码的、分子量为 10 0 k Da的蛋白质。TOPO 催化 DN…     

大鼠原生殖细胞的形态学及分化特性

目的 研究大鼠胚胎原生殖细胞（Primordial germ cells, PGCs）的形态及其分化特性。方法 取受精后10.5 d的大鼠胚胎作HE染色,取受精后11.0~12.5 d的大鼠胚胎生殖嵴进行PGCs原代培养,光、电镜观察PGCs及其分化细胞的微细结构,碱性磷酸酶 (ALP) 染色检测细胞的分化程度。结果 大鼠PGCs位于卵黄囊内胚层深部的间充质内,体积大,呈椭圆形或不规则形;核大,染色质细密,含1~2个核仁。体外培养可见PGCs大而圆,散在分布,或聚集成团,胞质中含有椭圆形的线粒体和丰富的核糖体,ALP反应呈阳性;培养4~5 d,PGCs形态不规则,有伪足,ALP反应减弱,进一步分化可形成神经元样细胞、表皮细胞、心肌细胞、分泌细胞以及类似血管、心脏的管腔样结构等。由PGCs分化来的细胞ALP反应均呈阴性。结论 大鼠生殖嵴来源的PGCs是一种具有发育全能的、可分化形成3个胚层衍生物的胚胎多能干细胞。     

卡氏乳香中1个新的降二萜

目的 研究卡氏乳香Boswellia carterii中的化学成分及其抗骨质疏松活性。方法 运用硅胶柱色谱、ODS柱色谱和制备高效液相色谱等方法进行化学成分分离,通过波谱数据及文献对比对其进行结构解析。结果 卡氏乳香的95%乙醇提取物中分离得到11个化合物,分别鉴定为 (1R,2E,8S,9R)-1,9-环氧-8-乙酰氧基-4,5-二氧代降西松烷型-2-烯（1）、rel(1S,3R,7E,11S,12R)-1,12-epoxy-4-methylenecembr-7-ene-3,11-diol（2）、boscartin F（3）、boscartene K（4）、fidmansumbin-13(17)-en-3,16-diene（5）、3α-acetoxyl-7-oxo-tirucalla-8,24-dien-21-oic acid（6）、boscartene N（7）、3β-hydroxy-tirucallic acid（8）、α-boswellic acid（9）、boscarterol O（10）、boscarterol F（11）。结论 化合物1是新化合物,命名为卡氏乳香素,化合物5为首次从乳香中分离得到,化合物2和10首次从该属植物中分离得到。对11个化合物进行抗骨质疏松活性筛选,发现化合物1、3、6和10具有良好的抑制破骨细胞活性。     

加味双柏凝胶贴膏质量研究及安全性考察

目的：建立加味双柏凝胶贴膏中黄柏、冰片、大黄的薄层色谱法（TLC）,对其质量稳定性进行考察,并初步评价加味双柏凝胶贴膏敷贴的用药安全性。方法：通过TLC对加味双柏凝胶贴膏处方中的黄柏、冰片、大黄进行鉴别,采用加速试验、长期试验和影响因素试验考察其稳定性,试验以新西兰兔为模型进行多次皮肤刺激试验,以Hartley豚鼠为模型进行主动皮肤过敏试验和豚鼠Buehler试验,观察凝胶贴膏的皮肤刺激作用和致敏作用。结果：TLC中色谱斑点清晰、特征明显且阴性对照无干扰。3批产品在长期试验和加速试验中均具有较好的稳定性,加味双柏凝胶贴膏对新西兰兔皮肤无刺激性,对豚鼠皮肤无过敏性。结论：建立的TLC可作为加味双柏凝胶贴膏的质量控制方法,加味双柏凝胶贴膏是一种较安全的新型外用制剂且制剂质量稳定可控。     

伴有不可切除肝转移的结直肠癌的治疗进展

结直肠癌是我国常见恶性肿瘤,发病率为27.47/10万,死亡率为13.27/10万[1]。肝脏与消化道在解剖学上关系密切,是结直肠癌最常见的转移靶器官,14%~18%患者发现结直肠癌时即可发现肝转移[2]。不接受任何治疗的肝转移患者中位生存期仅为4~21个月[3]。原位肿瘤根治性切除及肝转移瘤切除是有效的治疗手段,5年生存率为24%~40%,中位生存时间为28~46个月[4]。但是只有10%~20%患者可以进行手术切除[5]。对于不符合手术条件的患者,需要综合应用多种有效及可靠的治疗方式,最大程度延长患者生存时间,改善预后。     

不同b值条件下心脏体素内不相干运动成像相关参数的一致性

目的观察不同b值条件下心脏体素内不相干运动(IVIM)成像相关参数的一致性。方法对30名健康志愿者行左心室中间部IVIM扫描,以双指数模型获取IVIM参数值慢速表观弥散系数(ADCslow)、快速ADC(ADCfast)及灌注分数f。比较9个b值(0、20、50、80、100、120、200、300、500 s/mm^2)与7个b值(0、20、80、100、200、300、500 s/mm^2)条件下所测参数值的差异,采用组内相关系数(ICC)分析2名医师测量参数结果的一致性,以Bland-Altman检验分析不同b值条件下所测参数的一致性。结果9个与7个b值条件下ADCslow、ADCfast及f差异均无统计学意义(P均>0.05),且2名医师测量IVIM参数的组内及组间一致性均较好(ICC均≥0.66,P均<0.05)。Bland-Altman图显示,9个与7个b值时ADCslow的平均偏差为-0.07×10-3 mm^2/s,一致性界限(-1.87,1.73);ADCfast的平均偏差1.57×10-3 mm^2/s,一致性界限(-72.64,75.77);f的平均偏差1.17%,一致性界限(-13.45,15.79)。结论9个与7个b值条件下心脏IVIM成像各参数值的一致性较好。     

臀上动脉深上支髂骨骺移植的解剖学研究

目的 :为带血供的髂骨骺移植提供解剖学依据。方法 :在 40侧经动脉灌注红色乳胶的成人臀部标本以及 2侧儿童标本上 ,观测臀上动脉深上支的行程、分支及滋养支 ;选用 5 0块髋骨 ,观察髂骨嵴前外侧部的滋养孔。结果 :儿童臀上动脉深上支的分支、分布与成人相似 ,位于臀中肌深面和臀小肌上缘 (相当臀前线 ) ,循髂骨嵴弓形向前 ,达髂前上嵴 ,沿途分出平均 (4 .2± 1.1)支外径 0 .5～ 1.1mm的髂嵴支 ,分布髂嵴骨膜 ,并发细小分支进入滋养孔。从髂前上棘至结节区 ,在距髂嵴缘下方 2cm范围内 ,平均有(2 2 .4± 6.7)个滋养孔。结论 :以臀上动脉深上支及其分支为蒂 ,在髂嵴前部可切取带骺骨瓣 ,以修复长管骨骨骺缺损。     

多发性骨髓瘤负性相关基因DAZAP2蛋白高效表达和纯化

目的在前期的研究中，DAZAP2基因在多发性骨髓瘤（Multiple myeloma，MM）患者中表达明显下调，可能为MM的负性基因．须进一步获得DAZAP2蛋白，制备抗体，从而在蛋白水平上研究DAZAP2的表达、结构和功能．方法将原核重组质粒pQE30－DAZAP2转化大肠杆菌，阳性菌株经1 mmol／LIPTG诱导表达目的蛋白，再经过纯化和透析结果IPTG诱导4hr时，得到大量重组目的蛋白，占可溶蛋白的20％左右，经过Ni—NTA层析柱纯化。获得分子量为17kD的DAZAP2蛋白浓度为0．97mg／m1．结论DAZAP2蛋白获得高效表达，并且建立快速简便的纯化方法，目的蛋白可以用于下一步的实验．