携带小鼠 KLF4 基因重组慢病毒的构建及对 RAW264.7 细胞增殖的影响

目的 构建小鼠 Krüppel 样因子 4（KLF4）慢病毒表达载体,并建立 KLF4 过表达小鼠腹腔巨噬细胞 RAW264.7 细胞株。方法 采用聚合酶链式反应（PCR）技术扩增目的基因 KLF4 后,构建重组质粒 pLVX-KLF4,并 通过 PCR、双酶切和测序方法对其进行鉴定。重组质粒与 pSPAX2、pMD2.G 辅助质粒通过 Lipofectamine® 3000 共转 染 293T 细胞,包装病毒并测定病毒滴度。将获得的慢病毒感染 RAW264.7 细胞,实时定量 PCR 法检测 KLF4 mRNA 的表达。分选流式细胞仪分选 GFP 阳性 RAW264.7 细胞。流式细胞术检测 KLF4 对 RAW264.7 细胞周期的影响。 EdU 法检测 KLF4 对 RAW264.7 细胞增殖的影响。结果 经 PCR、双酶切鉴定和测序证实,成功构建了包含小鼠 KLF4 基因的慢病毒穿梭质粒,RT-PCR 证实 Lenti-KLF4 感染的 RAW264.7 细胞中 KLF4 mRNA 表达高于未感染的 对照组 RAW264.7 细胞（P＜0.05）。初次浓缩后测定小鼠 KLF4 基因重组慢病毒的滴度为 2.05×108 TU/mL。分选出 KLF4 过表达的 RAW264.7 细胞。KLF4 过表达的 RAW264.7 细胞周期变化显示为 S 期延长,G0/G1 期缩短。EdU 检 测显示 KLF4 过表达的 RAW264.7 细胞增殖活性增高。结论 成功构建了 KLF4 的慢病毒表达载体,并建立 KLF4 过表达的 RAW264.7 细胞株,KLF4 过表达促进了 RAW264.7 细胞的增殖。     

甲氨蝶呤及其代谢物血药浓度分析中细节问题的探讨

甲氨蝶呤（MTX）被广泛用于治疗骨肉瘤、急性淋巴细胞白血病、恶性淋巴瘤、类风湿性关节炎和炎性肠道疾病等。由于MTX个体差异大和不良反应较严重,同时其在体内代谢迅速,主要以多聚谷氨酸化代谢物的形式长期存在,因此,监测MTX及其代谢物的血药浓度显得尤为重要。本文对已发表的相关文献进行了分析,结合笔者在临床药物浓度监测实践中的经验和体会,从样品采集、样品保存、样品前处理方法、分离条件、检测方法等方面,探讨了MTX及其代谢物血药浓度测定中的细节问题,以期实现MTX的精准医疗,确保其用药安全性。     

妇科肿瘤化疗防治恶心呕吐药物的应用评价

对妇科恶性肿瘤化疗防治恶心呕吐药物应用的合理性评价。收集本院妇科2018年4月接受化疗的住院患者病历111份,根据国内外肿瘤相关的恶心呕吐防治指南,分析应用防治恶心呕吐药物存在的问题。100例（90.09%）地塞米松（DXM）应用不合理;111例（100%）均应用5-羟色胺3受体拮抗剂,其中79例（71.17%）应用疗程不合理,17例（15.32%）超致吐风险级别用药,4例（3.60%）重复应用;104例（93.69%）无指征应用H2受体拮抗剂或质子泵抑制剂。化疗患者呕吐防治药物的应用存在不合理现象,建议加强医嘱审核,提高应用呕吐防治药物的合理性。     

肿瘤大数据在抗肿瘤药物应用中的研究进展

世界范围内肿瘤大数据已经取得了长足的进步,总结了肿瘤大数据在抗肿瘤药物应用中的研究进展,包括肿瘤流行病学、肿瘤早期诊断、新靶点和新适应症的发现、不良反应的信号发掘、患者预后模型的构建,以及肿瘤大数据存在的不足,如数据的采集、可信度、保存、安全性等。     

化疗引起的神经痛治疗靶点温度选择性TRP通道的研究进展

作为钙离子渗透性的瞬时受体电位(TRP),5种通道(TRPV1~4和TRPM2)被不同的高温激活,两种通道(TRPV1和TRPV8)被低温激活。越来越多的证据表明,TRPA1和TRPM8拮抗剂可预防顺铂、奥沙利铂和紫杉醇诱导的线粒体氧化应激、炎症、冷痛和痛觉过敏。TRPV1在顺铂引起的感觉神经元热痛觉和机械异常中有应答。TRPA1、TRPM8和TRPV2蛋白表达水平主要通过这些治疗方法在背根(DRG)和三叉神经节中增加。主要总结了5种温度调节TRP通道(TRPA1、TRPM8、TRPV1、TRPV2和TRPV4)。     

基于Box-Behnken设计-响应面法优化蜜麦麸的制备工艺

目的采用Box-Behnken响应面法优化蜜麦麸的制备工艺。方法根据《浙江省中药炮制规范》(2015版)中蜜麦麸制备方法,通过单因素试验筛选影响蜜麦麸制备工艺的关键因素,以麸皮与炼蜜比例、加热温度、加热时间为考察因素,蜜麦麸含水量、堆积密度和色度及阿魏酸含量的总评归一值作为综合指标,利用Box-Behnken设计-响应面法优选蜜麦麸制备工艺,并进行预测分析及工艺验证。结果蜜麦麸最刘制备工艺为麸皮与炼蜜比例为10∶3,加热温度为90℃,加热时间为90 s;含水量、堆积密度、色度、阿魏酸含量均符合蜜麦麸要求,综合指标平均值为0.676 0,与预测值(0.692 7)相对误差为2.41%,相对误差较小。结论优选的制备工艺稳定可靠,且简单可行,适用于蜜麦麸的制备应用。     

基于UPLC-Q-TOF-MS/MS技术的吴茱萸化学成分分析

目的 采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱法（UPLC-Q-TOF-MS/MS）技术分析吴茱萸药材中的化学成分。方法 色谱条件为ACQUITY UPLC BEH C₁₈色谱柱（2.1 mm×100 mm,1.7 μm）,流动相乙腈（A）-0.1%甲酸水溶液（B）梯度洗脱（0~3 min,6%A;3~4 min,6%~10%A;4~7 min,10%~12%A;7~8 min,12%~14%A;8~13 min,14%~15%A;13~15 min,15%~20%A;15~18 min,20%~30%A;18~21 min,30%~49%A;21~25 min,49%~51%A;25~27 min,51%~73%A;27~30 min,73%~80%A;30~31 min,80%~100%A;31~32 min,100%A）,流速0.4 mL·min^-1,柱温35 ℃。质谱条件为电喷雾离子源,正、负离子全扫描模式采集数据,检测范围m/z 100~1 200。通过高分辨质谱数据分析、参考文献数据及对照品确认,对吴茱萸药材的化学成分进行快速、全面的定性分析。结果 从吴茱萸70%甲醇提取物中共鉴定出92个化合物,包括生物碱类39个、黄酮类19个、柠檬苦素类12个、酚酸类20个和有机酸类2个;通过与对照品比对,准确归属了26个化合物。结论 吴茱萸药材化学成分类型多样,极性差异大,但不同产地、不同品种的药材样品中化学成分基本一致。该研究建立的方法能快速、准确地对吴茱萸的化学成分进行全面解析,为该药材药效成分和毒性成分的进一步阐明提供了实验依据。     

医院产科被褥的细菌学调查与安全使用周期研究

目的 了解产科患者住院使用的床上物品细菌分布及菌群特点,探讨医院产科被褥的安全使用时间及合理更换周期,以保障患者安全,降低医院支出成本.方法 以广东省卫生厅对医院爱婴区、普通病区病房布局、设置及环境要求,采用卫生部2002版＜消毒技术规范》GB15982-1995A3规定方法 ,对医院产科使用中的床单、被褥等物体表面采样,进行实验室细菌学调查,并对其细菌分布状况进行探讨. 结果 上述床单、被褥等以表皮葡萄球菌检出率最高;其中健康新生儿的床单、被褥污染率较高;不同物品检测结果,床垫污染率最高.床单、被褥等不同细菌检出率差异有统计学意义(P＜0.01);不合格物品的污染细菌检出率差异有统计学意义(P＜0.01);不同床上物品差异有统计学意义(P＜0.01) 结论 尚需要进一步加大样本量,找出医院产科被褥的安全使用时间及合理更换周期的相关依据.     

静脉用药调配中心差错分析与防范

目的：对静配中心出现差错的原因进行总结,为今后进一步防范差错提供思路。方法：根据2012年2月-2013年11月我院静配中心差错登记本及工作量统计表,计算和比较各个不同时期的差错率,并对各配置环节出现的各类差错分类汇总,分析比较。结果：我院静配中心2012年2月-2013年11月共配置成品输液1124074袋,发生差错141袋,差错率为0.125‰,自运行以来差错发生率呈下降趋势,在各环节的各种差错中,退药处理失误、加药错误和用错注射器占有较大比例。结论：有针对性地采取一系列的防范措施可降低静配中心差错率,静配中心对于差错的防范是一项需要持续改进,常抓不懈的重要工作。     

新共识指导下的幽门螺杆菌个体化治疗

目的:分析新共识指导下的幽门螺杆菌个体化治疗。方法:收集近来国内外相关报道也进行分析。结果和结论:根除率逐年下降是当前幽门螺杆菌感染根除治疗面临的棘手问题,第四次全国幽门螺杆菌诊断和治疗的共识已经颁布。在新的共识指导下,强调幽门螺杆菌的个体化治疗是提高幽门螺杆菌根除率的关键。