长期应用恩替卡韦治疗的慢性乙型肝炎患者耐药发生情况及原因分析:8年随访研究

目的:了解慢性乙型肝炎患者长期应用恩替卡韦(ETV)治疗的耐药发生情况并探讨耐药原因。方法:对2003-2007年3月参加ETV剂量和疗效的随机双盲Ⅱ期临床试验、ETV与拉米夫定(LAM)治疗慢性乙型肝炎的随机双盲对照Ⅲ期临床试验、ETV治疗LAM失效的慢性乙型肝炎Ⅲ期临床试验及其后续ETV开放治疗临床试验的63例慢性乙型肝炎患者继续给予治疗和随访,计算截至2011年3月的累积耐药发生率,对临床耐药患者进行乙型肝炎病毒(HBV)逆转录酶区(RT)序列突变检测,并分析耐药原因。结果:63例患者中3例治疗2年后失访;1例治疗2.5年时转其他中心治疗;其他59例中16例用药4～6年,43例用药7～8年,随访4～8年,中位随访时间7年。13例患者发生临床耐药,累积耐药发生率为20.5%。9例耐药患者进行了HBV RT序列突变检测,其中5例检测出LAM耐药位点L180M和M204V突变和1～2个ETV耐药位点突变,符合ETV耐药特点;3例仅检出LAM耐药位点突变;1例检出2个ETV耐药位点突变和ADF耐药位点A181T突变。LAM经治、治疗前高病毒载量、治疗6个月病毒学应答不佳、治疗依从性差可能与耐药的发生有关。结论:长期应用恩替卡韦治疗慢性乙型肝炎耐药率较低。对治疗初期应答不佳患者,加强监测和提高治疗依从性可减少耐药的发生。     

炭疽毒素受体2表达受miR-145-5p调控在胰腺癌的作用机制研究

目的：探讨炭疽毒素受体2(anthrax toxin receptor 2,ANTXR2)在胰腺癌组织和细胞中的表达、临床意义和细胞功能,验证miR-145-5p在胰腺癌细胞中调控ANTXR2的作用机制。方法：分析GEO和TCGA数据库中胰腺癌的转录数据和临床数据。通过CCK-8实验、流式细胞术、划痕实验和Transwell实验进行细胞功能验证。采用miRNA靶点预测数据库反向预测可能通过ceRNA机制抑制ANTXR2表达的miRNA,并使用双荧光素酶报告实验进行验证。结果：ANTXR2在胰腺癌组织和细胞中的表达均上调（均P<0.05）,ANTXR2上调预示着原发肿瘤等级（P<0.05）、肿瘤细胞分化等级（P<0.05）和总体生存期（P<0.05,HR=1.72）均较差。ANTXR2可以促进胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭（均P<0.05）。ANTXR2是miR-145-5p下游的靶标（P<0.01）,miR-145-5p可以通过抑制ANTXR2的表达抑制胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭。结论：ANTXR2在胰腺癌组织和细胞中过表达,促进胰腺癌细胞增殖、迁移和侵...     

Light Emitting Diodes Irradiation Regulates miRNA-877-3p to Promote Cardiomyocyte Proliferation

Mammalian cardiomyocytes (CMs) maintain a low capacity for self-renewal in adulthood, therefore the induction of CMs cycle re-entry is an important approach to promote myocardial repair after injury. Recently, photobiomodulation (PBM) has been used to manipulate physiological activities of various tissues and organs by non-invasive means. Here, we demonstrate that conditioned PBM using light-emitting diodes with a wavelength of 630 nm (LED-Red) was capable of promoting the proliferation of neonatal CMs. Further studies showed that low-power LED-Red affected the expression of miR-877-3p and promoted the proliferation of CMs. In contrast, silencing of miR-877-3p partially abolished the pro-proliferative actions of LED-Red irradiation on CMs. Mechanistically, GADD45g was identified as a downstream target gene of miR-877-3p. Conditioned LED-Red irradiation also inhibited the expression of GADD45g in neonatal CMs. Moreover, GADD45g siRNA reversed the positive effect of LED-Red on the proliferation of neonatal CMs. Taken together, conditioned LED-Red irradiation increased miR-877-3p expression and promoted the proliferation of neonatal CMs by targeting GADD45g. This finding provides a new insight into the role of LED-Red irradiation in neonatal CMs biology and suggests its potential application in myocardial injury repair.     

黄芩提取物多指标成分鉴定及指纹图谱的研究

目的：应用超高效液相串联飞行时间质谱法鉴定黄芩提取物中黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素4种活性成分及其指纹图谱同时检测的方法。方法：以ACQUITYTM UPLC BEH C₁₈色谱柱（2.1mm×100mm,1.7μm）,乙腈-0.1%甲酸溶液梯度洗脱,流速0.2mL?min^-1,检测波长275nm,柱温30℃。结果：4种成分色谱显示分离度良好,经质谱得到各成分离子碎片,查阅相关文献均得以证实,并在同一色谱条件下检测指纹图谱,结果显示相似度良好。结论：该方法简便、灵敏、准确,可用于黄芩提取物的质量控制研究。     

Antifungal Activity of Gallic Acid In Vitro and In Vivo

Gallic acid (GA) is a polyphenol natural compound found in many medicinal plant species, including pomegranate rind (Punica granatum L.), and has been shown to have antiinflammatory and antibacterial properties. Pomegranate rind is used to treat bacterial and fungal pathogens in Uyghur and other systems of traditional medicine, but, surprisingly, the effects of GA on antifungal activity have not yet been reported. In this study, we aimed to investigate the inhibitory effects of GA on fungal strains both in vitro and in vivo. The minimal inhibitory concentration (MIC) was determined by the NCCLS (M38‐A and M27‐A2) standard method in vitro, and GA was found to have a broad spectrum of antifungal activity, with MICs for all the tested dermatophyte strains between 43.75 and 83.33 μg/mL. Gallic acid was also active against three Candida strains, with MICs between 12.5 and 100.0 μg/mL. The most sensitive Candida species was Candida albicans (MIC = 12.5 μg/mL), and the most sensitive filamentous species was Trichophyton rubrum (MIC = 43.75 μg/mL), which was comparable in potency to the control, fluconazole. The mechanism of action was investigated for inhibition of ergosterol biosynthesis using an HPLC‐based assay and an enzyme linked immunosorbent assay. Gallic acid reduced the activity of sterol 14α‐demethylase P450 (CYP51) and squalene epoxidase in the T. rubrum membrane, respectively. In vivo model demonstrated that intraperitoneal injection administration of GA (80 mg/kg d) significantly enhanced the cure rate in a mice infection model of systemic fungal infection. Overall, our results confirm the antifungal effects of GA and suggest a mechanism of action, suggesting that GA has the potential to be developed further as a natural antifungal agent for clinical use. Copyright © 2017 John Wiley & Sons, Ltd.     

新加良附方影响小鼠肝癌组织VEGF与MVD表达的研究

目的 观察新加良附方对小鼠肝癌组织血管内皮生长因子(VEGF)和微血管密度(MVD)表达影响.方法 建立移植型小鼠肝癌H22实体瘤模型后,分别取模型对照、环磷酰胺(CTX)对照及新加良附方大、中、小剂量5组肿瘤组织.以免疫组化染色法观察肿瘤组织VEGF、MVD表达.结果 新加良附大、中剂量可降低肿瘤组织中VEGF的表达,与模型对照组比较,有统计学意义(P＜0.01);与CTX对照组比较,新加良附大、中、小剂量组均有统计学意义(P＜0.01).新加良附中剂量组能降低MVD,与模型对照组比较有统计学意义(P＜0.05).结论 新加良附方抑制小鼠肝癌生长可能与下调VEGF、MVD,表达有关.初步表明新加良附方可能通过抑制肿瘤血管生成而发挥抗肿瘤效应.     

灸法研究的战略思考

在中医针灸学现代化和国际化进程中,灸法的应用日益受到关注。灸法作用机理研究已成为针灸医学研究领域亟待解决的关键科学问题。该文在总结前期灸法研究成果的基础上,对灸法下一步深入研究进行了思考和展望,认为亟需开展多学科交叉研究,阐明灸法的内源性调节机制,揭示艾灸得气、灸温、灸材等因素的作用特点、规律和机制,明确艾灸热、光、烟与灸效的关系,并确证艾灸与针刺作用的异同,以推动灸法研究新一轮的发展和创新;并展望灸法在“治未病”及防治疾病中的作用与贡献。     

利用LC／MS检测中药总成分中各大类成分含量的方法学探讨

目的:利用液相-质谱(LC-Ms)技术检测总成分,并对其含量计算进行研究.方法:以感冒中药复方YL2000为例,利用LC-MS测定其中的总黄酮、总生物碱和总香豆素等主要大类成分,以HPLC测定的其中单体成分含量作参照,对LC-MS中各大类成分百分比进行含量计算.结果:以此方法计算的总黄酮、总生物碱、总香豆含量以及总含量与所用紫外分光光度法所测的含量基本一致.结论:利用LC-MS对成分结构的归属来确定各大类成分的构成比例,以所测代表成分HPLC含量结果作参照来计算各大类成分的含量具有一定的可行性.     

隔药灸对溃疡性结肠炎大鼠结肠NF-κB 和STAT3 活性的免疫调节机制

目的：观察隔药灸改善UC大鼠结肠炎症的效应,通过NF-κB通路和STAT3磷酸化参与免疫调节的作用机制。方法：将大鼠随机分成正常组、UC组和隔药灸组,每组8只。采用4% DSS诱导UC的大鼠模型,造模成功后采用隔药灸大鼠双侧天枢穴,每穴灸2壮艾炷,每天1次,共7次。通过比较组织病理学、血清学促炎症因子的蛋白浓度观察隔药灸干预UC大鼠的效应。采用Western Blot检测结肠组织NF-κB通路及STAT3活性探讨隔药灸改善UC大鼠结肠炎症反应的潜在机制。结果：UC组大鼠结肠组织病理学提示黏膜上皮表面溃疡形成,炎症反应明显,隔药灸能修复结肠上皮损伤,减轻UC大鼠结肠组织的炎症反应。与正常组比较,UC组大鼠血清IL-1β和IL-6蛋白浓度显著升高（P < 0.05,P < 0.01）,p-STAT3磷酸化水平显著增加,pIκB-α和NF-κB p65蛋白表达均显著增加,IκB-α蛋白表达显著降低;与UC组比较,隔药灸组大鼠血清IL-1β和IL-6蛋白浓度显著降低（P < 0.05）,结肠组织NF-κB p65蛋白表达和pIκB-α磷酸化水平均降低,IκB-α蛋白表达增加。结论：隔药灸可能通过抑制NF-κB通路和STAT3磷酸化,减少了促炎症因子IL-1β和IL-6的释放,从而减轻了UC大鼠的结肠炎症反应。     

艾灸治疗炎症性肠病的古代文献与现代研究的思考及展望

目的：通过对古、现代文献的梳理,探讨炎症性肠病的病因病机,总结艾灸治疗炎症性肠病（Inflammatory Bowel Diseases,IBD）的选穴规律和实验机制,为临床应用与研究提供选穴、灸法依据和理论支持。方法：古代文献检索“中国中医药数据库检索系统”,现代文献检索Pubmed、中国知网（CNKI）和维普数据库2005年1月-2016年1月的文献。筛选符合的文献进行综合分析。结果：中医学认为本病的病因多与外邪、饮食、情志或久病体虚有关,针灸治疗IBD 当标本兼顾,既要疏调肠腑气机,也要温养脾胃,选取胃经经穴既可健脾益胃、升清降浊,又可调理肠腑、强身止泻。在此中医理论指导下进行的现代研究提示,艾灸对穴区局部可刺激温度感受器,提高穴区的肥大细胞脱颗粒率;对靶器官肠道具有通过调控转录因子影响免疫相关因子的表达,以及促受损的肠黏膜屏障修复而发挥抗炎作用;艾灸还具有防治肠纤维化的作用。结论：艾灸温养脾胃、疏调肠腑气机的治疗方法对防治IBD有效,基于该理论的机制研究已取得一定进展,但具体机制有待于进一步深入研究。