变应性鼻炎相关因素的Ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归分析

【目的】 分析变应性鼻炎（ＡＲ）发病相关因素。【方法】 采用病例对照研究,通过系统抽样的方法,详细记录ＡＲ患者和健康者的性别、年龄、文化程度、上班／上学交通工具、职业接触粉尘史、既往史、饮食习惯、家族史、居住／工作环境。回归分析采用二分类Ｌｏｇｉｓｔｉｃ（Ｆｏｒｗａｒｄ： Ｃｏｎｄｉｔｉｏｎａｌ）法。【结果】 获得的ＡＲ发病相关因素的Ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归预测方程是：Ｌｏｇｉｔ（Ｐ）＝－６．９０９－０．０６３Ｘ１＋１．０９５Ｘ２＋２．３１９Ｘ３＋２．４３７Ｘ４＋２．２８１Ｘ５＋０．８７８Ｘ６＋１．１２９Ｘ７,其中Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３分别为文化程度为大专、高中及初中,Ｘ４、Ｘ５分别为父亲有过敏性疾病史（包括ＡＲ、支气管哮喘和过敏性遗传性湿疹）和母亲有过敏性疾病史（包括ＡＲ、支气管哮喘和过敏性遗传性湿疹）,Ｘ６、Ｘ７分别为居住／工作环境不经常开窗通风及不经常清洁。其中,文化程度为高中、初中者患ＡＲ的危险分别是文化程度为本科或以上者的２．９８９倍（９５％ＣＩ １．１４５ ～ ７．８０３）和１０．１６９倍（９５％ＣＩ ２．４５１ ～ ４２．１９３）,父亲有过敏性疾病史者患ＡＲ的危险是父亲无过敏性疾病史者的１１．４３７倍（９５％ＣＩ ２．７１５ ～ ４８．１８１）,母亲有过敏性疾病史者患ＡＲ的危险是母亲无过敏性疾病史者的９．７８４倍（９５％ＣＩ ２．４７５ ～３８．６８２）,居住／工作环境不经常清洁者患ＡＲ的危险是经常清洁者的３．０９３倍（９５％ＣＩ １．３５２ ～ ７．０７９）。【结论】 文化程度为高中、初中,父母亲有过敏性疾病史,居住／工作环境不经常清洁是ＡＲ发病的相关因素。     

矢车菊素－３－葡萄糖苷通过降低ＳＴＡＴ３活化抑制ＴＮＦ－α诱导的小鼠血管平滑肌细胞增殖

【目的】 探讨矢车菊素－３－葡萄糖苷（Ｃ３Ｇ）对ＴＮＦ－α诱导的血管平滑肌增殖的影响及可能的机制。【方法】 Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ小鼠主动脉平滑肌细胞（ＶＳＭＣ） 购于ＡＴＣＣ,体外培养后以Ｃ３Ｇ对细胞进行预处理后观察ＴＮＦ－α的促细胞增殖作用;Ｄｉｈｙｄｒｏｅｔｈｉｄｉｕｍ （ＤＨＥ）荧光染色检测ＶＳＭＣ在ＴＮＦ－α作用下的活性氧（ＲＯＳ）生成情况;实时定量ＰＣＲ检测细胞内ＮＡＤＰＨ氧化酶活化蛋白１（ＮｏｘＡ１）的ｍＲＮＡ水平;蛋白质印迹法检测细胞内ＮｏｘＡ１、信号转导与转录激活因子３ （ＳＴＡＴ３）、磷酸化ＳＴＡＴ３及β－ａｃｔｉｎ的表达水平。统计学方法采用单因素方差分析。【结果】 Ｃ３Ｇ预处理能够抑制ＴＮＦ－α诱导的ＶＳＭＣ增殖,该作用呈现剂量、时间依赖性。联合应用５０ μｍｏｌ／Ｌ Ｃ３Ｇ及１００ μｍｏｌ／Ｌ ａｐｏｃｙｎｉｎ显著减少ＴＮＦ－α诱导ＲＯＳ的生成。Ｃ３Ｇ联合ａｐｏｃｙｎｉｎ较Ｃ３Ｇ或ａｐｏｃｙｎｉｎ单独孵育更能显著抑制ＴＮＦ－α处理下ＶＳＭＣ内ＮｏｘＡ１基因的表达及ＳＴＡＴ３蛋白的磷酸化。应用ＲＯＳ清除剂触媒（ｃａｔａｌａｓｅ ２ ０００ Ｕ／ｍＬ）能显著抑制ＴＮＦ－α诱导的ＶＳＭＣ增殖及ＳＴＡＴ３蛋白活化。【结论】 Ｃ３Ｇ对抗ＴＮＦ－α诱导ＶＳＭＣ增殖的机制很可能是通过削弱ＮｏｘＡ１导致的ＲＯＳ生成,从而抑制ＳＴＡＴ３蛋白的激活。     

兔骨髓间充质干细胞向成骨方向的诱导分化及体内应用

目的：研究经矿化诱导的兔骨髓间充质干细胞(MSC)在裸鼠体内的成骨潜能。方法：分离并培养兔MSC,矿化诱导,观察MSC的形态学改变及碱性磷酸酶（ALP）活性。将诱导后的MSC-去抗原牛松质骨复合体植入裸鼠背部皮下,3 d后取材,行组织学观察。结果:经矿化诱导后,MSC的形态由长梭形向多角形和三角形转化,ALP组织化学染色阳性,活性明显增高。MSC-去抗原牛松质骨复合体植入裸鼠后3 d,组织学见细胞均匀贴附于骨小梁表面,伸展良好,未见未贴壁细胞及外源性纤维组织、血管长入。结论：经矿化诱导的MSC向成骨细胞方向分化和增殖,经观察MSC-去抗原牛松质骨复合体在裸鼠体内可成活并增殖。     

人脐带间充质干细胞移植治疗小鼠慢性输卵管炎

摘 要： 【目的】 观察人脐带间充质干细胞（ｈＵＣ－ＭＳＣ）移植对小鼠慢性输卵管炎的治疗作用,为慢性输卵管炎的临床治疗提供新策略。【方法】 从脐带中分离培养人脐带间充质干细胞,流式细胞术鉴定其免疫表型,并诱导成脂、成骨分化验证其多向分化潜能。通过阴道内接种沙眼衣原体建立小鼠输卵管炎模型,感染后４周随机分成ｈＵＣ－ＭＳＣ移植组及对照组。ｈＵＣ－ＭＳＣ移植组小鼠阴道内接种人脐带间充质干细胞,对照组小鼠阴道内注射等体积ＰＢＳ。感染后８周,观察小鼠输卵管有无阻塞、积水等慢性输卵管炎表现,病理切片观察组织形态学改变。【结果】分离培养的人脐带间充质干细胞符合间充质干细胞的一般生物学特性。感染后８周,对照组小鼠均出现输卵管阻塞、积水等慢性输卵管炎表现,而ｈＵＣ－ＭＳＣ移植组仅２例出现输卵管阻塞及积水,对照组小鼠慢性输卵管炎的发生率明显高于ｈＵＣ－ＭＳＣ移植组,差异有统计学意义（Ｐ＜ ０．０１）。ｈＵＣ－ＭＳＣ移植组输卵管病理切片显示,输卵管周围炎症细胞浸润较少。【结论】 ｈＵＣ－ＭＳＣ移植可明显减少小鼠慢性输卵管炎的发生和减轻其炎症程度,有可能为输卵管性不孕的临床治疗提供新的途径。     

不同程度的腹部创伤对脊髓高迁移率族蛋白Ｂ１表达的影响

【目的】 探讨不同程度的手术创伤对脊髓高迁移率族蛋白Ｂ１（ＨＭＧＢ１）表达的影响及其临床意义。 【方法】 将１０２只成年雄性ＳＤ大鼠随机分为５组：对照组（Ｃ组,ｎ＝ ６）,不做任何处理;麻醉组（Ａ组,ｎ ＝ ２４）,仅行丙泊酚静脉麻醉;手术组（Ｓ１、Ｓ２、Ｓ３组,ｎ ＝ ２４）,在丙泊酚静脉麻醉下分别进行伤口大小为１、２、４ｃｍ的腹部手术,切割损伤至肌肉层。术后６ ｈ、１ ｄ、３ ｄ、７ ｄ采用免疫组织化学法检测脊髓ＨＭＧＢ１的表达情况,比较阳性产物的光密度值（ＯＤ）,同时观察后足底机械痛阈（ＭＴ）和热痛阈（ＴＬ）的变化。【结果】 ①腹部创伤后胸段脊髓ＨＭＧＢ１表达上调,术后１ ｄ开始明显增多,３ ｄ达到峰值,７ ｄ有所恢复,以上３个时点各手术组的ＯＤ值与Ｃ组比较差别均有统计学意义（Ｐ＜ ０．０５）。②ＨＭＧＢ１的表达量与组织损伤的程度呈正相关：术后１ ｄ,Ｓ３组的ＯＤ值（０．３４２ ± ０．００９）明显大于Ｓ１组（０．２３８ ± ０．００５,Ｐ＝ ０．０００）和Ｓ２组（０．２４７ ± ０．００８,Ｐ ＝ ０．０００）;术后３ ｄ,Ｓ３组的ＯＤ值（０．３９６ ± ０．００８）明显大于Ｓ２组（Ｐ ＝ ０．００３）和Ｓ１组（Ｐ＝ ０．０００）,Ｓ２组（０．３３５ ± ０．００６）明显大于Ｓ１组（０．２８２ ± ０．００７,Ｐ ＝ ０．００６）;术后７ ｄ,Ｓ３组的ＯＤ值（０．２９８ ± ０．００４）明显大于Ｓ２组（０．２５８ ± ０．００４,Ｐ ＝ ０．００８）和Ｓ１组（０．２４５ ± ０．００４,Ｐ ＝ ０．００６）。③术后６ ｈ各手术组的机械痛阈均开始下降,下降程度和持续时间与创伤程度正相关,Ｓ３组的机械痛阈术后第７天仍低于术前（Ｐ＝ ０．０１３）。 【结论】 ＨＭＧＢ１参与手术应激与疼痛的发生发展过程,其表达量与组织损伤的程度呈正相关,慢性手术疼痛的形成可能与ＨＭＧＢ１的持续表达有关。     

中国南方人群遗传性痉挛性截瘫ＳＬＣ３３Ａ１基因的突变检测

【目的】 ＳＬＣ３３Ａ１基因已被报道是我国北方一个ＨＳＰ家系的致病基因,但研究未发现在欧洲的ＨＳＰ患者中有该基因的突变。本研究的目的是检测ＳＬＣ３３Ａ１是否为中国南方人群中遗传性痉挛性截瘫患者的致病性基因之一。【方法】 对收集到的７０例中国南方散发遗传性痉挛性截瘫的患者,提取基因组ＤＮＡ,并进行ＳＬＣ３３Ａ１基因所有编码外显子及外显子－内含子交界区域的直接测序;鉴定所发现的遗传变异,并同我们所收集到的５７例无血缘关系的正常人进行比对,以及生物信息学分析。【结果】我们只发现 ＳＬＣ３３Ａ１基因区域的８个已存在于数据库中的单核苷酸多态性,未发现任何致病性突变。【结论】 与国外学者的报道相符合,我们的７０例中国南方ＨＳＰ病人中没有ＳＬＣ３３Ａ１所导致的病人,故 ＳＬＣ３３Ａ１对ＨＳＰ的致病性需要进一步的核实、研究。     

成熟卵泡比例与ＨＣＧ注射时机的选择及对卵子发育潜能的影响

【目的】 探讨采用成熟卵泡比例来决定ＨＣＧ注射时机的可行性,研究在不同成熟卵泡比例的情况下注射ＨＣＧ对卵子发育及妊娠结局的影响,摸索最适合的成熟卵泡比例。【方法】 本回顾性研究共纳入１９８例需行单精子胞浆注射（ＩＣＳＩ）助孕治疗的女性不孕患者。按照ＨＣＧ日成熟卵泡（≥１８ｍｍ）的不同比例将患者分成３组：①低比例组：成熟卵泡比例 ≤ ２０％;②中比例组：２０％ ＜ 成熟卵泡比例 ≤ ４０％;③高比例组：成熟卵泡比例 ＞ ４０％,注射ＨＣＧ后３６ｈ取卵,将获得的卵丘复合物剥除卵丘颗粒细胞用于检测ＧＲＥＭ１和ＨＡＳ２基因的ｍＲＮＡ表达水平。分别统计和比较３组患者卵子成熟、受精、胚胎发育及临床妊娠情况。【结果】卵子成熟率在低比例组显著低于中比例组和高比例组（Ｐ ＜ ０．０５）。正常受精率在３组间无显著差异（Ｐ ＞ ０．０５）。异常受精率在低比例组显著低于中比例组和高比例组（Ｐ＜ ０．０５）。卵裂率、可利用胚胎数在低比例和中比例组之间无显著差异,但均高于高比例组（Ｐ ＜ ０．０５）。优质胚胎率、种植率、妊娠率在低比例组均显著高于中比例组和高比例组（Ｐ＜ ０．０５）。卵丘颗粒细胞ＧＲＥＭ１和ＨＡＳ２基因ｍＲＮＡ表达水平在低比例组显著高于中比例组和高比例组（Ｐ ＜ ０．０５）。【结论】 采用成熟卵泡比例决定ＨＣＧ的注射时机可以更全面地反映卵泡的整体发育状态,并为把握ＨＣＧ注射时机提供更为准确的依据。随着成熟卵泡比增加卵子的发育潜能逐渐降低,因此注射ＨＣＧ时应将成熟卵泡的比例控制在一定范围较合适。     

ＨＬＡ－Ａ*０２０１转基因小鼠侵袭性肺曲霉病模型的建立与鉴定

摘要：【目的】建立ＨＬＡ－Ａ*０２０１转基因小鼠侵袭性肺曲霉病模型,并进行实验室鉴定。【方法】在真菌孢子感染前,给予ＨＬＡ－Ａ*０２０１转基因小鼠腹腔注射环磷酰胺。乙醚麻醉后,小鼠经鼻腔吸入３组不同浓度的（３×１０６、３×１０７、３×１０８ｍＬ－１）烟曲霉孢子悬液。阴性对照组小鼠吸入ＰＢＳ。感染后３６ｈ,处死各组小鼠,取肺组织病理行ＨＥ、ＰＡＳ以及ＧＭＳ染色分析,以验证感染是否成功并计算肺侵袭性肺烟曲霉感染小鼠模型成模率。肺组织研磨涂皿后行菌落计数,分析小鼠肺烟曲霉负载量。【结果】小鼠肺组织病理检查显示,正常肺组织结构遭到显著破坏,大量菌丝生长并可见菌丝侵犯血管现象,证实侵袭性肺曲霉病模型造模成功。在免疫抑制的方法和条件恒定时,３种孢子浓度由低到高成模率分别为３６．７％、７６．７％、９６．７％。各实验组成模小鼠肺组织研磨液在ＰＤＡ培养基上均有大量烟曲霉菌落生长,未感染小鼠组未见烟曲霉菌落生长。【结论】成功建立ＨＬＡ－Ａ*０２０１转基因小鼠侵袭性肺曲霉病模型,在免疫抑制的方法和条件恒定时,模型成模率与接种孢子悬液的浓度成正比,采用高浓度的孢子悬液（３×１０８ｍＬ－１）时,可以达到较高的成模率。     

短程地塞米松不能提高乙型肝炎慢加急性肝衰竭生存率

摘要：【目的】评估小剂量地塞米松治疗早期慢加急性乙肝肝衰竭患者的疗效及安全性。【方法】选取２００９年１月至２０１２年１２月１３８例慢加急性乙肝肝衰竭患者,所有患者均接受内科标准治疗（ＳＭＴ）,其中３５例患者在标准内科综合治疗基础上,通过外周静脉每天推注１０ｍｇ地塞米松,共３ｄ（ＤＭＴ组）,按照基线匹配原则选取３５例为对照组（ＳＭＴ组）,随访１２周。观察患者生存情况以及治疗不同时间点肝功能、并发症发生率情况。【结果】ＳＭＴ组及ＤＭＴ组１２周累计生存率分别为４５．７％（１６／３５）、５４．３％（１９／３５）,Ｐ＝０．６５４。２组患者入组后１、２、４、８、１２周各时间点两组患者之间谷丙转氨酶、白蛋白、总胆红素、凝血酶原时间国际标准化比值、ＭＥＬＤ评分差别无统计学意义。两组患者感染、上消化道出血、肝性脑病、肝肾综合症、电解质紊乱以及腹水６种并发症的发生率无统计学差异。４０岁以上,ＭＥＬＤ积分２８以上以及肝性脑病是患者死亡的独立危险因素。【结论】小剂量地塞米松治疗早期慢加急性乙肝肝衰竭不能改善肝功能,提高患者生存率。年龄、ＭＥＬＤ评分、肝性脑病是评估预后的独立危险因子。     

短时受精后早剥卵对胚胎质量及妊娠结局的影响

摘 要： 【目的】 探讨短时受精后早期剥除颗粒细胞对体外受精胚胎质量及妊娠结局的影响。【方法】 回顾性分析２０１２年在本中心助孕的有早剥卵的１０３个ＩＶＦ周期与７４个ＩＣＳＩ周期,以ＩＣＳＩ组为对照,比较两组的２ＰＮ受精率、多ＰＮ受精率、可利用胚胎形成率、卵裂期优质胚胎形成率、种植率和临床妊娠率,再以ＩＶＦ周期中的卵子是否进行早剥分为两组,比较早剥对ＩＶＦ周期中２ＰＮ受精率、多ＰＮ受精率、可利用胚胎形成率、卵裂期优质胚胎形成率、种植率和临床妊娠率的影响。【结果】在ＩＶＦ周期中共有１１８１枚卵子纳入研究,其中早剥卵子５１３枚,非早剥卵子６６８枚,在ＩＣＳＩ周期中共有６１９枚成熟卵子纳入研究。结果显示,ＩＶＦ组的２ＰＮ受精率、卵裂期优质胚胎形成率低于ＩＣＳＩ组,多ＰＮ受精率高于ＩＣＳＩ组,差异有统计学意义（Ｐ＜ ０．０５）;其余比较均无统计学差异。而ＩＶＦ的全部卵子中,早剥卵子组的２ＰＮ受精率、多ＰＮ受精率、可利用胚胎形成率、优质胚胎形成率、种植率、临床妊娠率与非早剥组相比,均无统计学差异（Ｐ＞ ０．０５）。 【结论】 与传统ＩＣＳＩ相比,短时受精后早期剥除卵丘颗粒细胞并未降低可利用胚胎形成率;与常规ＩＶＦ相比,早剥也未提高多ＰＮ受精率;早剥卵是安全的,并能够使受精情况不明的患者受益。