不同液体小容量复苏对内毒素休克大鼠肾损伤及其ＮＯ和Ｈ２Ｓ的影响

摘要：【目的】探讨不同液体小容量复苏对大鼠内毒素休克肾损伤的影响,并观察肾皮质硫化氢和一氧化氮水平变化。【方法】清洁级ＳＤ大鼠３０只,根据复苏所用液体种类随机分为５组,正常组（Ｎ组）、内毒素休克组（ＬＰＳ,Ｅ组）、７５ｇ／Ｌ高渗氯化钠组（ＬＰＳ＋ＨＳＳ,ＨＳＳ组）、羟乙基淀粉液１３０／０．４（万汶）组（ＬＰＳ＋ＨＥＳ,ＨＥＳ组）、高渗氯化钠羟乙基淀粉４０溶液（霍姆）组（ＬＰＳ＋ＨＳＨ,ＨＳＨ组）。各组在静注ＬＰＳ（１ｍｇ／ｋｇ）３０ｍｉｎ后予小容量复苏（４ｍＬ／ｋｇ）,测量不同时间点的血压;复苏６０ｍｉｎ后处死大鼠,取肾标本行病理学及干湿质量比检测,肾皮质匀浆测定一氧化氮（ＮＯ）和硫化氢（Ｈ２Ｓ）水平。【结果】①内毒素休克大鼠右颈总动脉收缩压进行性下降,予不同液体复苏后血压有不同程度回升,其中ＨＳＨ效果最为明显;②内毒素休克大鼠肾切片病理观察发现肾小管局部坏死、肾小球足突融合、基底膜有沉积物,复苏组病理改变减轻,ＨＳＨ组病变最轻;③各组大鼠肾干湿质量比未见有明显差异（Ｐ﹥０．０５）;④内毒素休克组肾皮质Ｈ２Ｓ浓度明显下降,ＮＯ水平明显升高（Ｐ＜０．０１）,小容量复苏后,ＨＥＳ和ＨＳＨ复苏组肾皮质Ｈ２Ｓ浓度明显升高,ＨＳＨ组ＮＯ水平明显回落（Ｐ＜０．０５）。【结论】内毒素休克大鼠肾损伤明显,应用高渗盐水、羟乙基淀粉１３０／０．４溶液、高渗氯化钠羟乙基淀粉４０溶液小容量复苏后肾脏病理改变减轻,肾皮质Ｈ２Ｓ水平升高、ＮＯ水平降低。     

肌萎缩侧索硬化症基因ＴＤＰ４３致病突变对斑马鱼毒性的影响

摘 要： 【目的】 探讨肌萎缩侧索硬化症基因ＴＤＰ４３致病突变对斑马鱼毒性的影响。【方法】 以野生型ＡＢ系斑马鱼作为研究对象,构建携带红色荧光蛋白（ＲＦＰ）的ＴＤＰ４３基因野生型（ＷＴ）和突变型（Ｓ２９２Ｎ）质粒,通过显微注射法转染斑马鱼单细胞期胚胎,建立转基因斑马鱼模型。通过比较正常ＡＢ系斑马鱼、ＴＤＰ４３－ＷＴ转基因斑马鱼以及ＴＤＰ４３－Ｓ２９２Ｎ基因突变斑马鱼的胚胎发育、运动能力等,探讨ＴＤＰ４３基因突变的毒性作用。【结果】通过显微注射,成功获得表达红色荧光的ＴＤＰ４３－ＷＴ及ＴＤＰ４３－Ｓ２９２Ｎ转基因鱼。与正常ＡＢ系斑马鱼及ＴＤＰ４３－ＷＴ转基因斑马鱼相比,ＴＤＰ４３－Ｓ２９２Ｎ基因突变斑马鱼的胚胎死亡率及畸形率升高,胚胎孵化率、胚胎摆尾次数以及孵化后运动活力降低（Ｐ＜ ０．０１）。【结论】 ＴＤＰ４３基因突变影响斑马鱼胚胎发育并降低孵化后的运动功能。     

ｖｏｎ Ｈｉｐｐｅｌ－Ｌｉｎｄａｕ病伴视网膜毛细血管瘤的长期随访

【目的】 探讨伴有视网膜毛细血管瘤的ｖｏｎ Ｈｉｐｐｅｌ－Ｌｉｎｄａｕ（ＶＨＬ）病患者的长期预后。【方法】 对９例伴有视网膜毛细血管瘤的ＶＨＬ病患者进行长期随访,观察其眼部及其他系统病变。【结果】随访８～１１年,平均９．１年。随访末期所有患者视网膜毛细血管瘤均双眼受累,共１８眼,治疗前与随访末期最佳矫正视力不变的有１２眼（６６．７％）,提高１眼（５．６％）,下降５眼（２７．７％）。随访末期５例（５６．６％）合并肾肿瘤,５例（５６．６％）合并中枢神经系统血管母细胞瘤,２例因肾细胞癌死亡。【结论】伴有视网膜毛细血管瘤的ＶＨＬ病患者中,眼部视网膜毛细血管瘤病变经早期及时治疗远期效果稳定,中枢神经系统血管母细胞瘤和肾肿瘤是常见的其他系统病变,肾肿瘤的远期预后不良。ＶＨＬ病的处理需要早期发现,多学科合作,规范随访,及时治疗。     

肾部分切除术后急性肾损伤早期的监测指标

【目的】 探讨肾部分切除术后急性肾损伤指标早期监测效能。【方法】７６例肾癌患者在我院接受肾部分切除术,术后根据急性肾损伤诊断标准将患者分为两组：急性肾损伤组和非急性肾损伤组,采用受试者工作特征曲线评价急性肾损伤生化指标判断急性肾损伤的效能。【结果】 ２４例（３１．６％）患者术后发生急性肾损伤,其余５２例（６８．４％）患者术后未发生肾损伤,肾损伤组患者术中肾血管阻断的时间（ｍｉｎ）较非肾损伤组长（３０ ± １９ ｖｓ ２４ ± ９, Ｐ ＝ ０．０３）,肾损伤组有５例（２０％）患者术中接受输血而非肾损伤组仅有８例（１５％）患者接受输血（Ｐ ＝ ０．０１１）,肾损伤组患者住院时间较非肾损伤组患者长（Ｐ ＝ ０．０１７）。术后２４ ｈ和４８ ｈ血清胱抑素Ｃ水平具有良好预测急性肾损伤效能,其ＡＵＣ分别为０．７９０ ［９５％ＣＩ ０．６８８ ～ ０．８９３, Ｐ ＝ ０．０００ ）和０．７５４ （９５％ ＣＩ ０．６４６ ～ ０．８６３, Ｐ ＝ ０．０００）。多元回归分析发现术后急性肾损伤危险因素包括输血 （Ｐ ＝ ０．０２８）和术后２４ ｈ血清胱抑素Ｃ浓度（Ｐ ＝ ０．０１８）。【结论】术后血清胱抑素Ｃ可能是肾部分切除术后急性肾损伤早期监测指标,输血和术后血清胱抑素Ｃ浓度可能是术后急性肾损伤独立危险因素。     

胸腰椎后路内固定术后早期手术部位感染的危险因素分析

【目的】 探讨胸腰椎后路内固定术后早期手术部位感染发生的危险因素。【方法】 回顾性分析我院２００６年７月至２０１２年７月间共２９７例胸腰椎后路内固定手术患者的临床资料,分为感染组与未感染组,单因素分析对比两组患者在危险因素方面的差异性,并进行Ｌｏｇｉｓｔｉｃ多因素回归分析。【结果】本组２９７例患者中８例发生手术部位感染,感染率为２．６９％。感染组与未感染组单因素分析发现术前白蛋白浓度、手术时间、糖尿病、术前放疗及使用异体骨等５个指标的差异有统计学意义;多因素回归分析显示,导致手术部位感染的独立危险因素包括术前白蛋白浓度（ＯＲ＝ ２．０１４, Ｐ ＝ ０．０３１）、手术时间（ＯＲ ＝ １．６５０, Ｐ ＝ ０．０４２）、糖尿病（ＯＲ ＝ ４．４５７, Ｐ ＝ ０．０１８）和术前放疗（ＯＲ＝ １７．３３８, Ｐ ＝ ０．００４）。【结论】术前白蛋白浓度、手术时间、糖尿病和术前放疗是胸腰椎后路内固定术后早期手术部位感染发生的独立危险因素。     

妊娠期特异性甲状腺功能正常参考值范围

【目的】 建立中山大学孙逸仙纪念医院妊娠期特异性甲状腺功能正常参考值范围。 【方法】 对２０１０年３月至２０１２年１２月在中山大学孙逸仙纪念医院产检的２ １２０例孕妇进行甲状腺功能的检查,包括ＴＴ４、ＦＴ４、ＴＳＨ、ＴＰＯＡｂ,并随访其妊娠结局。根据美国国家生化研究院推荐的标准,并结合妊娠结局,筛选出“正常孕妇”７５１例：早孕１３３例,中孕３８８例,晚孕２３０例。对其进行统计分析得到ＴＴ４、ＦＴ４、ＴＳＨ的正常参考值范围。 【结果】 ＴＴ４、ＦＴ４服从或经对数转换后服从正态分布,ＴＳＨ不服从正态分布。“正常孕妇”早、中、晚孕期ＴＴ４均数分别为：１３２．５６、１３７．３８、１２８．７０ ｎｍｏｌ／Ｌ,双侧９５％参考值范围分别为７４．５３ ～ １９０．５９、８７．０３ ～ １８７．７３、７８．４６ ～ １７９．０４ ｎｍｏｌ／Ｌ。早、中、晚孕期ＦＴ４均数分别为１６．１４、１３．６０、１２．０３ ｐｍｏｌ／Ｌ,双侧９５％参考值范围分别为１１．２２ ～ ２１．０６、９．９２ ～ １７．２８、９．０３ ～ １５．０３ ｐｍｏｌ／Ｌ。早、中、晚孕期ＴＳＨ中位数分别为１．０３０、１．４１５、１．５５０ ｍＵ／Ｌ; Ｐ２．５ ～ Ｐ９７．５分别为０．０３７ ～ ３．１８１、０．１４６ ～ ３．８３０、０．３５５ ～ ３．６２３ ｍＵ／Ｌ。【结论】 妊娠期甲状腺功能与非孕期有较大差异,结合妊娠结局选择正常孕妇来建立妊娠期正常参考值范围,在理论上来说可能更合理。     

肠易激综合征患者静息状态下大脑右侧海马的功能连接

【目的】 利用功能磁共振成像技术（ｆＭＲＩ）,探索肠易激综合征患者（ＩＢＳ）静息状态下大脑右侧海马的功能连接与正常对照组的区别,了解大脑右侧海马及其功能相关区域在ＩＢＳ患者的病理机制中的作用。【方法】对２１例ＩＢＳ患者及２１例年龄、性别、受教育程度均匹配的健康对照组进行静息状态下的功能磁共振成像扫描,选取大脑右侧海马为种子点,比较两组之间大脑右侧海马功能连接的差别。【结果】与正常对照组相比,ＩＢＳ患者在静息状态下大脑右侧海马与右侧扣带回中部、右侧岛叶、左右侧的中央前回的功能连接降低;与左侧额中回、左侧顶上回以及左侧楔前叶的功能连接增强。【结论】 本研究证明静息状态下ＩＢＳ患者大脑右侧海马功能连接存在异常。本研究从功能整合的角度探究ＩＢＳ患者大脑神经活动的改变,促进我们进一步理解ＩＢＳ的神经活动特点。     

申克孢子丝菌ＳＰＤＳ基因的生物信息学分析及分子克隆

【目的】 分析预测申克孢子丝菌ｃＤＮＡ中编号为Ｌｏｃｕｓ＿１６８＿Ｃｏｎｔｉｇ＿１序列编码的基因及蛋白质结构、功能特征,并进行分子克隆。 【方法】 利用ＮＣＢＩ及Ｅｘｐａｓｙ网站提供的ＢＬＡＳＴｘ、ＳｉｇｎａｌＩＰ、ＩｎｔｅｒＰｒｏ Ｓｃａｎ等生物信息学软件分析其序列,判断其是否为全长编码序列、同源序列名称,并分析其结构、定位及功能等;将其中的全长编码区利用ＰＣＲ方法进行扩增后克隆到ｐＥＴ－３０ａ（＋）载体,测序验证。 【结果】 该序列是亚精胺合成酶（ＳＰＤＳ）的同源基因,全长序列为１０６２ ｂｐ,包含完整的编码区１９０ ～ １ ０６２ ｂｐ,编码２９１个氨基酸,在ＧｅｎＢａｎｋ中,其与粗糙脉孢菌的ＳＰＤＳ基因同源性最高,达８８％。理化性质预测其编码蛋白疏水性高;无质体、线粒体等定位序列,不存在跨膜螺旋结构,为非分泌型蛋白。进化树分析结果显示与粗糙脉孢菌同源性最高;ＰＣＲ扩增及测序结果证实目的基因成功克隆进入ｐＥＴ－３０ａ（＋）质粒。【结论】 获得申克孢子丝菌ＳＰＤＳ的基因及蛋白结构、功能特点,构建了其重组表达质粒,将为进一步明确其在孢子丝菌病中的致病作用奠定理论基础。     

高度近视ＬＡＳＩＫ术后远期视觉相关生活质量调查

【目的】 研究高度近视患者ＬＡＳＩＫ术后远期视觉相关生活质量。【方法】 应用视觉相关生活质量调查问卷对８０例高度近视ＬＡＳＩＫ术后患者及８０例术前高度近视患者进行调查,同时对术后患者进行视力、屈光度及近对比敏感度检查,评估术后远期视觉相关生活质量及了解术后常见视觉障碍,评分越高,视觉障碍越严重。【结果】ＬＡＳＩＫ术后患者生活质量得分为（８．６ ± ８．２）分,低于术前对照组得分（１６．２ ± ８．９）分（Ｐ ＜ ０．０５）。视觉障碍阳性率发生较高的前６项条目,依次为电脑使用和阅读容易疲劳（２８．８％）、近视力感受变差（２２．６％）、夜间视物模糊（２２．６％）、眼干涩不适（２０．１％）、眩光（２０％）、夜间驾驶困难（１７．５％）。其中电脑使用和阅读引发视疲劳与术后视力、高空间频率（１８ｃｐｄ）呈负相关（ｒ ＝ －０．２５７、－０．２６５）;近视力感受变差与术后视力呈负相关（ｒ ＝ －０．３０６）,与术后屈光度存在正相关（ｒ ＝ ０．２７０）;夜间视物模糊与术后视力、低空间频率（３ｃｐｄ）存在负相关（ｒ＝ －０．４３６,－０．２２６）,与术后屈光度存在正相关（ｒ＝ ０．４７８）;眩光与术后视力、各空间频率存在负相关（ｒ ＝ －０．２６５ ～ －０．４０８）,与术后屈光度存在正相关（ｒ ＝ ０．３４２）;夜间驾驶困难与术后视力、高空间频率（１８ｃｐｄ）呈负相关（ｒ ＝－０．３５１、－０．２４９）,与术后屈光度存在正相关（ｒ ＝ ０．３６９）。【结论】 ＬＡＳＩＫ手术能有效改善高度近视患者远期的视觉生活质量。电脑使用和阅读容易疲劳是ＬＡＳＩＫ术后远期高度近视患者最常见视觉障碍。     

乙型肝炎病毒ＢＣＰ、ＰｒｅＣ和Ｃ区基因突变与母婴传播免疫失败的相关性

【目的】 探讨ＢＣＰ、ＰｒｅＣ和Ｃ区基因突变率及突变热点与ＨＢＶ母婴传播免疫失败的关系。【方法】 选取血清ＨＢｓＡｇ阳性且ＨＢＶ ＤＮＡ定量＞１０００Ｕ／ｍＬ的孕妇,以所分娩的新生儿是否发生免疫失败和孕妇血清ＨＢＶ ＤＮＡ定量水平将孕妇分为免疫失败组（１９例）和对照１组（免疫成功且ＨＢＶ－ＤＮＡ定量≥１．０ × １０７ Ｕ／ｍＬ,４８例）、对照２组（免疫成功且ＨＢＶ－ＤＮＡ定量＜１．０ × １０７ Ｕ／ｍＬ,３８例）。对３组孕妇血中ＨＢＶ进行ＢＣＰ／ＰｒｅＣ／Ｃ区基因ＰＣＲ扩增和测序,比较３组的突变率和突变位点的不同。【结果】免疫失败组与对照１组间ＨＢＶＤＮＡ定量相比,差异无统计学意义（Ｐ ＞ ０．０５）,但均大于对照２组（Ｐ ＜ ０．０５）;ＢＣＰ、ＰｒｅＣ、Ｃ区基因突变率,免疫失败组与对照１组间相比,差异无统计学意义（Ｐ＞ ０．０５）,但均低于对照２组（Ｐ ＜ ０．０５）。突变热点ｎｔＡ１７６２Ｔ、ｎｔＧ１７６４Ａ、ｎｔＧ１８９６Ａ在３组中的发生率差异无统计学意义（Ｐ ＞ ０．０５）。【结论】ＢＣＰ／ＰｒｅＣ／Ｃ区基因突变率与ＨＢＶ ＤＮＡ定量有关,但未见其与ＨＢＶ母婴传播免疫失败有明显相关性;也未见ｔＡ１７６２Ｔ、ｎｔＧ１７６４Ａ、ｎｔＧ１８９６Ａ等突变热点与免疫失败的相关性。